有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留速测试剂盒
(酶抑制法)
1 适用范围
适用于检测新鲜蔬菜中的有机磷类和氨基甲酸酯类农药残留量。
2 检测依据
试剂盒使用方法依据国家标准GB/T 5009.199-2003 《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》。
3 试剂盒组成
序号 | 名称 | 规格(100T) | 规格(200T) | 规格(500T) |
1 | 显色剂 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
2 | 底物 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
3 | 胆碱酯酶 | 1瓶 | 2瓶 | 5瓶 |
4 | 缓冲试剂浓缩液 | 1瓶 | 1瓶 | 1瓶 |
5 | 说明书 | 1份 | 1份 | 1份 |
4 溶液配制
4.1缓冲溶液:取500 mL纯净水,加入5 mL缓冲试剂浓缩液,混匀备用,室温保存;
4.2胆碱酯酶:无需配制,使用时直接取100 μL,4℃冷藏保存;
4.3显色剂:无需配制,使用时直接取100 μL,4℃冷藏保存;
4.4底物:加入10 mL纯净水溶解,使用时直接取100 μL,4℃冷藏保存。
5 样品提取
选取有代表性的蔬菜样品,擦去表面泥土等杂物后取样。叶菜一般取来自不同植株叶片的叶尖部样品,果菜从不同个体的表皮处取样。
叶菜取2克1 cm见方叶尖部分于样品杯中,茎类及水果取3克1 cm见方表皮于样品杯中;加入10 mL缓冲液,震荡1-2 min;倒出提取液或过滤液,静置2 min待测。
葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇、番茄汁液等样品中,含有对酶有影响的植物次生物质,容易产生假阳性。处理这类样品时,可采取整株(体)蔬菜浸提;一些含叶绿素较高的蔬菜时,也可采取整株(体)浸提的方法,减少色素干扰。
6 操作步骤
6.1对照测试
在一支干净试管中分别加入2.5 mL缓冲溶液,100 μL显色剂,100 μL胆碱酯酶,混匀;37℃恒温设备中放置10分钟后加入100 μL底物,摇匀并立即倒入比色皿,用农残检测仪进行对照测试。
6.2样品测试
在另一支干净试管中分别加入2.5 mL样品提取液,100 μL显色剂,100 μL胆碱酯酶,混匀;37℃恒温设备中放置10分钟后加入100 μL底物,摇匀并立即倒入比色皿,用农残检测仪进行样品测试。仪器根据测定结果显示出抑制率。
操作提示:在加底物的环节中,可预先将底物加入比色皿中,待恒温静置10分钟时间一到,马上将反应管中的反应液倒入已经加有底物的比色皿中,并迅速放入测试通道进行测试,这样可以减少同时检测多个样品时因加底物时间过长而造成的误差。
7 结果判定
以分光光度计测试时,于412 nm处测定吸光度值在3分钟内的变化,按以下计算公式算出抑制率:
抑制率(%)=[(△A0-△At)/ △A0]×100%
以农残检测仪检测时,其抑制率>50%时检测结果为阳性,表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在。对于阳性结果的样品需要重复检验2次以上,如有必要,可用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。
8注意事项
8.1酶活性要求:本试剂盒中酶正常活性△A0≥0.3,符合国标方法要求;
8.2使用:任何试剂应遵循使用一瓶配制一瓶原则,用前应摇匀,用完后才是用新试剂,防止变质;
8.3试剂只出不入原则:从任何试剂瓶吸出的试剂,禁止再次吸入瓶内,以免交叉污染;
8.4对色素干扰严重的过滤液,可用活性碳脱色处理,过滤或离心后,取清液作为样品提取液。
9 贮存条件与有效期
9.1保存:试剂盒应保存于4℃冰箱,保质期12个月,常温保存3个月;
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