盘点那些年我们用过的检测器(二) ——细说示差检测器

盘点那些年我们用过的液相检测器（一）

1、钨灯 2、聚光透镜 3、狭缝 4、准直镜 

5、狭缝 6、检测池 7、反光镜 8、零位玻璃 

9、光敏接收元件

低功率、长寿命的钨灯发射出的光线经过准直透镜和狭缝后，通过参比池（参照池）和样品池（样本池），经平面镜反射回来后，再次通过光学单元，最后通过透镜聚焦到一对光传感二极管上（光传感器）。在测试期间，参比池和样品池中充满流动相。参比池随后与流路隔开，流动相仅流过样品池。如果两个池中介质的折射率没有差异，光线在通过它们时将不会发生折射。

光线照射到一对光电二极管上，其中每个光电二极管都将给出一个电信号。随后这些信号会被放大，从而测得两个信号之间的差异。如果是零折射，这些信号之间的差异应该为零伏。借助一个电控机械联动装置，用户可以通过光路中的折射透镜来优化光电二极管的零偏转输出。还可以通过额外电路轻松地将信号输出校正为电子零点。

当流动相的折射率发生变化时，通过样品池和参比池之间界面的光将被折射，从而使一个光电二极管上的光强增大，另一个电二极管上的光强减小。这种差异产生具有振幅和极性的信号，此信号被放大后，可以驱动图表记录仪。

示差折光检测器是一种通用型检测器，只要被测组分与洗脱液的折光指数有差别就可使用。生命科学中常遇到各类糖类化合物，没有紫外吸收，一般常用示差折光检测器，她的通用性比UVD广，但灵敏度要低，对温度变化敏感，并与梯度洗脱不相容，因而限制了它的使用。

应用一：麦芽糖、果糖、葡萄糖、异麦芽糖、麦芽三糖

色谱条件

色谱柱：月旭Xtimate^® NH₂（4.6×300，5μm）。

流动相：乙腈:水=75：25；

检测器：RID；

柱温：30℃；

流速：1.0mL/min；

进样量：50μL。

色谱图

应用二：磷酸果糖二钠、蔗糖、葡萄糖、果糖

色谱条件

色谱柱：月旭Xtimate^® sugar-Ca（7.8×300mm，8μm）。

流动相：纯水；

检测器：RID；

温度：柱温75℃，检测器40℃；

流速：0.2mL/min；

进样量：10μL。

色谱图

要想获得良好的实验结果，使用RID的三大法宝：

第一、脱气；

第二、平衡好流动相；

第三、保持恒温恒压。

在实际工作中我们会遇到很多典型的问题，接下来我们一起来分析一下这些问题如何破。