电透析(electrodialysis)的原理在于:在电场作用下,脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)溶液中存在的小分子量带电物质(离子或分子),可以从LPS中离解出来,从而达到去除这类物质的目的。目前所常用的电透析仪包括两个组成部分:一为市售的电泳仪;二为自制或市售的电透析槽。电透析槽由3个相互分隔开的小槽组成,即中间槽及两个侧槽。两个侧槽中装有铂电极而与电泳仪相连,中间槽装置有冷却系统以保证在电透析条件下LPS溶液控制在10℃以下。中间槽放置人一定浓度的LPS溶液,而两个侧槽注入双蒸馏水。3个槽之间以透析膜隔开。在电流作用下,LPS中存在的带电小分子物质通过透析膜而分别趋向两个侧槽中的正负电极。电透析时观察到阴极pH值上升,而阳极pH值不变或仅有轻微的下降,证明LPS中含有多量带正电荷的物质和很少或不含带负电荷的物质。当阳极pH值上升至9~10时,调换侧槽中的双蒸馏水。这一步骤在整个电透析过程中需重复数次。
在电透析过程中LPS溶液的pH值常常下降,同时LPS使形成不溶性物质。为了很好地达到去离子的目的,LPS可以用三乙胺或NaOH中和至pH为7.0左右,而使LPS重新溶解,这一步亦需重复2~3次。电透析结束时,LPS一般以酸性的形式存在。此时可以不同的碱中和而取得所需的LPS盐,如以NaOH中和则取得LPS钠盐,以三乙胺中和则取得LPS三乙胺盐。电透析后LPS可直接进行冷冻真空干燥,此后保存在-4~-20℃,每次使用前再转化成需要的盐。
[来源:科德角国际生物医学科技(北京)有限公司]
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