永诺生物一步法逆转录数字PCR技术 助力新冠病毒检测

近期，湖北省武汉市爆发的新型冠状病毒（2019-nCoV）感染肺炎疫情牵动着每一个中国人的心。目前，确诊感染者数量急速上升，疫情正在向全国各省市迅速蔓延。无数医务人员奔赴前线与病毒作战，但他们并非孤军奋战！作为抗击疫情的幕后支持者，大量科学仪器厂商义无反顾投身疫情防控工作中，加紧研发疫情解决方案，全力支援疫情防控工作。

永诺生物，这家以数字PCR技术为核心的分子诊断公司，于2020年1月21日开发出基于数字PCR系统的检测试剂盒。

仪器信息网：针对此次新型冠状病毒（2019-nCoV）感染肺炎疫情，贵单位推出了什么样的检测仪器、试剂和解决方案？有何特点？

永诺生物：自2019年12月本次2019-nCoV新型冠状病毒肺炎爆发以来，永诺生物医疗团队于2020年1月21日率先开发出基于数字PCR系统的检测试剂盒（见图1）。

图1.永诺生物新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂盒（数字PCR法）

该试剂盒依托于永诺生物MicroDrop-100数字PCR平台（见图2）进行研发。

图2.永诺生物MicroDrop-100微滴式数字PCR系统

该试剂盒采用一步法逆转录数字PCR技术，参考2020年1月13日世界卫生组织推荐的检测方法并结合2019-nCoV序列进行引物探针设计，将RNA逆转录及数字PCR扩增整合到一个反应体系，单管双检同时测定2019-nCoV ORF1ab基因及N基因，消除由于病毒变异带来的漏检风险，同时引入了人内源性管家基因RPP30对检测全流程进行监控，确保检测结果的真实可靠。该试剂盒检测阳性企业参考品及阴性企业参考品结果如下（见图3）。

图3 .新型冠状病毒（2019-nCoV）核酸检测试剂盒（数字PCR法）检测阳性企业参考品及阴性企业参考品

与目前基于荧光定量PCR平台的新型冠状病毒检测试剂盒相比，该试剂盒采用了数字PCR平台进行研发。数字PCR技术拥有更高的灵敏度，对痰液中的核酸抑制物有更高的耐受性，因此，对于采用荧光定量PCR筛查Ct值位于37~40的疑似患者，可以采用数字PCR平台进一步复核以辅助诊断。此外，在缺乏新型冠状病毒标准物质的情况下，该试剂盒可以对病毒的拷贝数进行定量，辅助医生进行病程管理。

仪器信息网：目前，贵单位开展了哪些具体工作？给疫情防控带来了哪些具体帮助？

永诺生物：自2019年12月2019-nCoV新型冠状病毒肺炎发生以来，确诊病例及疑似病例呈现爆发性增长，大大超出了人们的预期。基于核酸的检测手段成为确诊方法，由于荧光定量PCR仪的保有量高，操作简便，是本次抗击新型肺炎的主要检测平台。但随着确诊病例的快速增加，患者的有效诊疗、疗效评估、治愈判定，成为新的挑战，数字PCR具备高灵敏度/抗干扰/绝对定量能力，是对荧光定量PCR平台的重要补充。基于此，永诺生物医疗团队紧急组织研发人员开发出基于数字PCR系统的检测试剂盒。目前，我们正在与新型肺炎定点医院及疾病预防控制中心沟通，以无偿形式提供给临床一线使用，为新型肺炎的诊断及治疗贡献力量。

仪器信息网：针对疫情防控，后续还将有哪些工作计划？

永诺生物：我们将持续关注新型冠状病毒肺炎疫情进展，针对可能出现的病毒变异即时开发适用的试剂盒。此外，基于数字PCR的技术特点，特别是对新型冠状病毒的定量能力，我们将积极参与到新型肺炎的救治及科学研究，为新型肺炎患者的病程管控及肺炎发病机制的研究做出贡献。