水产品中孔雀石绿检测的固相萃取方法

（superclean al-n）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，hplc 法作为分析方法，检测水产品中孔雀石绿含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

孔雀石绿(cas:569-64-2)

三、应用范围

本方法适用于鲜活水产品中孔雀石绿的检测的 hplc 检测及确证。四、参考标准

《gb/t 19857-2005 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定》五、实验材料

nuanalytical superclean alumina-n 固相萃取柱 1000mg/3ml。六、实验方法

1、 样品待测溶液制备

准确称取鱼肉样品 5.0  g 于 50  ml 离心管中，加入 10  ml 乙腈，超声波振荡提取 5  m

in，涡旋 1  min，4000r/min 离心 5  min，上清液转移至 50  ml 离心管中,残渣按照上述步骤

重复提取一次；合并两次提取液，用乙腈定容至 25  ml。

2、活化

依次用 5  ml 乙腈活化

3、上样和洗脱

在中性氧化铝固相萃取柱上加入 5 ml 待净化样品，收集流出液，然后用 4 ml 乙腈洗脱，合并收集流出液。

4、重新溶解

流出液 45  ℃氮吹至近干，1 ml 乙腈定容，过 0.45 μm 滤膜，，供高效液相色谱测定。

5、hplc 条件

色谱柱：superlu c18 (250×4.6mm, 5μm)       检测器：uv-vis@618 nm

流动相：a-乙腈             b-0.05 mol/l 乙酸铵缓冲溶液

流速：1.2 ml/min                     进样体积: 50 μl

洗脱方式：梯度洗脱，洗脱程序如下：

七、实验结果

1、0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果

表 1    0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿的添加回收结果

2、添加水平为 0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图

图 1    添加水平为 0.5 mg/kg 鱼肉中孔雀石绿检测的液相色谱图