福建检验检疫局日前发布消息称,该局自主研发“转基因大豆2704-12(品系)的LAMP检测引物及方法”获国家发明专利授权。这是福建检验检疫局自主研发的转基因检测领域首个专利。目前,这项技术已作为检验检疫行业标准(SN/T 3767.15-2014),在国内转基因大豆检测中进行推广应用。
据福建检验检疫局相关专家介绍,转基因大豆2704-12品系是国家农业部批准允许进口的,进口时必须开展符合性验证检测的一种品系。国内外还未见转基因大豆A2704-12品系LAMP检测引物及方法的报道。此次福建检验检疫局自主研发的转基因大豆检测方法,首次设计、筛选到了转基因大豆A2704-12品系的LAMP检测引物,并建立普遍适用于基层实验室的转基因大豆A2704-12品系LAMP检测方法。
该方法具有高效、简便、高特异性等优势。一是高效。LAMP方法只需要恒温就能完成扩增反应,没有PCR反应中那样循环温模板的变性、退火、复性过程,因此可将PCR法的2-3小时的扩增时间缩短至约1小时,即能扩增出109~1010倍靶序列拷贝,DNA产量高达500ug/mL,且能检测到的拷贝数低至PCR检测限的1/10。二是简便。因LAMP的恒温扩增和产物直观检测的特点使其只需要一个简单的恒温器,无需昂贵的检测设备,有利于对现场检测或基层实验室推广应用。三是高特异性。采用六个区段、六条引物对靶DNA序列进行扩增,决定了LAMP法的特异性高于只用1对引物进行扩增的PCR法。
据悉,目前检测转基因特异品系的方法主要有普通PCR方法和实时荧光定量PCR方法。普通PCR方法耗时长,操作繁琐,灵敏度不够,容易产交叉污染,质控复杂,假阳性、假阴性比例偏高。实时荧光定量PCR方法灵敏度高,但成本昂贵,技术要求高,且必须使用大型仪器设备。
此次福建运用LAMP这种新颖的恒温核酸扩增方法,在转基因特异品系检测领域有效建立了普遍适用于检验检疫一线基层实验室的快速、简便、高效的转基因品系检测方法,检测成本远低于荧光定量PCR。
[来源:中国食品报]
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