文献速递|M2生物芯片点样仪助力抗体共价偶联过程及流动特性研究

文献速递|M2生物芯片点样仪助力抗体共价偶联过程及流动特性研究

【Preparative Biochemistry & Biotechnology】Study on covalent coupling process and flow characteristics of antibody on the surface of immunoassay microfluidic chip

抗体在免疫分析微流控芯片上偶联特性以及流动特性分析

微流控芯片集成了样品反应、处理和分离整个过程，与传统检测方式相比，具有体积小、试剂消耗少、检测时间短、操作方便等诸多特点。因此，被广泛应用在分子诊断和即时检测(POCT)领域。

微流控芯片的免疫检测反应是一个动态过程，需要将反应物持续运送到固相载体表面。目前，大多研究集中在免疫反应的底物上，而对反应物的流量以及流速等特性的研究十分有限。如何结合微流控芯片内部结构得到最佳流速的免疫检测，成为芯片表面修饰技术急需解决的问题之一。本文研究了几种聚苯乙烯亚基表面修饰的工艺，用于阐明抗体固定与流速对免疫反应效果的影响。抗体采用共价结合的方式进行固定，基于酶联免疫吸附原理进行荧光定量检测及免疫应答过程的评估。另外，以降钙素原为例，系统地研究了抗体共价偶联过程和流动特性对免疫检测结果的影响，为免疫检测微流控芯片的结构设计提供理论基础。

• 作者单位：清华大学精密/超精密制造装备与控制重点实验室，清华大学天津先进装备研究院

• 期刊：Preparative Biochemistry & Biotechnology 

• 发表年份：2021年

• 样本：蛋白抗体

• 芯片类型：自制微流控芯片

• 芯片点样仪：M2公司iTWO 200生物芯片点样仪

芯片设计和免疫反应原理如图1所示：使用德国M2生物芯片点样仪将标记物(荧光微球)点印在反应区，特异性抗体点印在测试区(仅与感兴趣的抗原结合)，非特异性抗体点印在对照区(只与标记物或抗原结合)。当含有抗原的血液流经反应区时，抗原在反应区与标记物结合，通过检测区后，标记抗原被特异性抗体捕获，形成“抗体-抗原-抗体免疫复合物”，从而产生荧光，当血液流入控制区域时非特异性抗体捕获未结合的标记抗体。最后使用荧光定量分析仪进行荧光信号分析。

结果显示：对血液中降钙素原检测过程中，研究人员发现平均流速约为0.2 mm/s时免疫反应信号最强；与氨基和醛基修饰相比，环氧基修饰的芯片抗体免疫效率最高，对于小分子基团修饰的芯片，引入聚L -赖氨酸可以增加抗体的固定数量。

原文链接：https://doi.org/10.1080/10826068.2021.1958344

M2-Automation成立于2003年，总部位于德国柏林，是一家创新技术开发公司，专注于微量/超微量、非接触式自动化移液和生物芯片点样技术。仪器准确性、精确性高，重复性好，全程自动化点样，同时可根据客户需求进行定制。

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