气相色谱法测定咖啡因中三氯甲烷的残留量

咖啡因是一种黄嘌呤生物碱化合物，是一种中枢神经兴奋剂，能够暂时的驱走睡意并恢复精力。有咖啡因成分的咖啡、茶、软饮料及能量饮料十分畅销，因此，咖啡因也是世界上最普遍被使用的精神药品。在咖啡因合成过程中，粗品咖啡因结晶离心后母液中含有0.5%-1.5%的咖啡因，生产中使用三氯甲烷萃取，回收母液中的咖啡因。在人用药品注册技术要求国际协调会（ICH），美国药典（USP）和中国药典中都划定三氯甲烷为第二类溶剂，有麻醉性和致癌可能性，并规定其限度0.006%。当只检查一种残留溶剂，故采用毛细管柱顶空进样等，方法，测定方法简便，准确，重复性好。

实验仪器：顶空自动进样器；气相色谱仪；顶空瓶：20ml顶空瓶。

色谱条件：

色谱柱： 30m×0.25mm×0.25μm，石英毛细管色谱柱。

顶空进样器条件：炉温，70℃；取样针，85℃；传输线，110℃；载气气压力，16.5psi；加压时间，3min；进样时间，0.02min；拔针时间，0.2min；保温时间，20min。

GC条件：汽化室温度，110℃；柱温箱温度，80℃；检测器温度，375℃；载气，N2（纯度为99.999%）；流速，1ml/min；分流，30；补充气体，30ml/min。

样品含量测定：

（1）样品溶液：分别取5个成品批次咖啡因样品0.1000g至10ml容量瓶中加水溶解，取1ml至顶空瓶中密封，在70℃保温20分钟，然后测试。有三氯甲烷峰出现时用三氯甲烷对照溶液的浓度和峰面积计算样品中三氯甲烷含量。

（2）对照溶液：取分析纯三氯甲烷适量精密称定，用超纯水稀至0.600ug/ml溶液取3个顶空瓶每瓶将上述溶液取1ml到入密封，在70℃保温20分钟，然后进样，每瓶进一次样，以3次进样各峰面积计算RSD，RSD≤2.5%。

（3）三氯甲烷残留量限度为0.006%，通过计算本测试方法三氯甲烷的残留量检测限（LOD）和定量限（LOQ）分别为0.00003%和0.00006%。