HPLC法测定人血浆中齐留通

    齐留通是一种在体内和体外有效的选择性5.脂氧合酶抑制剂，临床应用为其外消旋体。由美国公司研制开发，1997年3月在美国首次上市。齐留通可以直接抑制5.脂氧合酶的活性，减少白三烯的合成，从而减轻支气管内炎症，降低气道反应性，达到控制哮喘发作的治疗目的。
    为研究齐留通在中国健康志愿者体内的药物动力学，需要建立灵敏可靠的生物样品的分析方法。国外有文献采用HPLC-UV法测定生物样品齐留通浓度，其定量限均可达到0.01mg/L，但血浆样品的处理采用固相萃取。  

    血浆样品经液液萃取的齐留通HPLC-UV血药浓度测定法，定量限为0.0781mg/L。该法准确+灵敏且回收率高，可用于齐留通临床血药浓度的监测、药物动力学和生物利用度研究。
    检测仪器：高效液相色谱仪，工作站，台式高速离心机，微量旋涡混合仪。
    色谱条件：流动相：磷酸二氢钠（20mmol/L，pH4.0左右）-乙腈-四氢呋喃（75:25:5）流速1.5ml/min；柱温35℃；检测波长260nm。
测定方法：精密称取齐留通和乙酰苯胺适量，以甲醇分别配成1000mg/L"齐留通的对照储备液和64mg/L的内标储备液。用蒸馏水稀释储备液得到相应浓度的工作溶液，置0℃冰箱保存待用。
取血浆样品0.5mL，加入乙酰苯胺溶液（64mg/L）50µL，混匀。加入二氯甲烷-无水乙醇（9:1）6mL，旋涡混匀2min，2500r/min离心5min，取下清液，置35℃水浴中氮气吹干。残渣用甲醇-水（1:1）100µL溶解，进样20µL，记录色谱图及峰面积。以齐留通的峰面积与内标峰面积的比值定量。