白酒中塑化剂的GC-MS分析

近日，媒体爆出白酒塑化剂超标事件，在国内又掀起了“塑化剂”热潮。
1 实验部分
1.1方法原理
样品在一定温度下氮吹除去乙醇等易挥发物质，然后用正己烷萃取，静置分层后取上清液进GC-MS分析。
1.2 仪器与试剂
气质联用仪GC-MS
    涡旋振荡器，氮吹仪，分析天平（感量0.0001g）。
邻苯二甲酸酯标准品
正己烷（色谱纯）
1.3 样品处理
量取5mL样品于10mL玻璃离心试管中，在85℃下氮吹20min(也可以采用水浴加热的方法)，除去乙醇等易挥发物质，冷却至室温，加入2mL正己烷，加盖密封后在涡旋振荡器上振荡提取1min，静置分层后取上层清液进GC-MS分析。
1.4 分析条件
色谱条件：Equity-5^TM（30m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱，柱前压100KPa，载气流量1ml/min，吹扫流量：2ml/min, 进样口260℃，柱温：60℃保持1min，以20℃/min升至220℃,保持1min；然后以5℃/min升至300℃保持5min。不分流进样，60S后打开分流阀，分流比：50︰1；进样量1uL。
质谱条件：EI源，电子能量70eV，离子源200℃，接口280℃，溶剂延迟：6min。扫描方式：全扫描定性，扫描范围：44.5~450u，扫描周期：0.6s，倍增器高压：1200V；
选择离子扫描定量，定量离子见表1。
选择监测离子时间分段设置如下：
6.25 min～10min: 77,135,149,163,177,205,223
10min～14.2min：45,59,72,85,104,149,205,223,251
14.2min～17.45min：91,101,149,193,206,233,251
17.45min～30min：77,149,167,225,249,279
 
 
 
表1 邻苯二甲酸酯类化合物定量和定性选择离子表

序号	中文名称	保留时间	英文简称	定量离子	辅助定量离子	CAS号
1	邻苯二甲酸二甲酯	7.93	DMP	163	77,135	131-11-3
2	邻苯二甲酸二乙酯	8.86	DEP	149	177	84-66-2
3	邻苯二甲酸二异丁酯	10.83	DIBP	149	223,205	84-69-5
4	邻苯二甲酸二丁酯	11.57	DBP	149	223,205	84-74-2
5	邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯	11.94	DMEP	59	149,104	117-82-8
6	邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯	12.67	BMPP	149	85,251	146-50-9
7	邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯	13.01	DEEP	45	72,149	605-54-9
8	邻苯二甲酸二己酯	15.40	DHXP	149	251,233	84-75-3
9	邻苯二甲酸丁基苄酯	15.59	BBP	149	91,206	85-68-7
10	邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯	16.97	DBEP	149	101,193	117-83-9
11	邻苯二甲酸二环己基酯	17.62	DCHP	149	167,249	84-61-7
12	邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯	17.78	DEHP	149	167,279	117-81-7
13	邻苯二甲酸二苯酯	18.01	——	225	77	84-62-8
14	邻苯二甲酸二正辛酯	20.10	DNOP	149	279	117-84-0

 
 
 
2 实验结果
2.1 标准样品谱图
 
14种邻苯二甲酸酯出峰顺序依次为：邻苯二甲酸二甲酯（DMP），邻苯二甲酸二乙酯（DEP），邻苯二甲酸二异丁酯（DIBP），邻苯二甲酸二丁酯（DBP），邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯（DMEP），邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（BMPP），邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯（DEEP），邻苯二甲酸二己酯（DHXP），邻苯二甲酸丁基苄酯（BBP），邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯（DBEP），邻苯二甲酸二环己基酯（DCHP），邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP），邻苯二甲酸二苯酯，邻苯二甲酸二正辛酯（DNOP）。
 
 
 

图1  邻苯二甲酸酯混合标准溶液全扫描TIC图(4ug/ml)
 
 

图2  邻苯二甲酸酯混合标准溶液SIM扫描TIC图(2ug/ml)
 
 

图3  某品牌白酒样品SIM扫描TIC图
2.2 标准曲线
以正己烷为溶剂，配制0.2、0.4、1、2、4 μg/mL系列混合标准溶液，按照上述方法进GC-MS分析，以浓度为横坐标，定量离子峰面积为纵坐标建立标准曲线，曲线方程、线性相关系数及相对标准偏差见表2。
 
 
表2 邻苯二甲酸酯类化合物标准曲线方程及相关参数

序号	中文名称	保留时间	线性相关系数	线性方程	RSD/%
1	邻苯二甲酸二甲酯	7.93	0.9991	y = 2E+06x - 94104	3.6
2	邻苯二甲酸二乙酯	8.86	0.9990	y = 3E+06x + 16477	4.5
3	邻苯二甲酸二异丁酯	10.83	0.9980	y = 3E+06x + 187214	3.8
4	邻苯二甲酸二丁酯	11.57	0.9986	y = 2E+06x + 56025	5.3
5	邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯	11.94	0.9990	y = 2E+06x + 106025	6.0
6	邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯	12.67	0.9985	y = 2E+06x - 111007	8.1
7	邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯	13.01	0.9991	y = 2E+06x - 103508	2.2
8	邻苯二甲酸二己酯	15.40	0.9987	y = 4E+06x - 157116	3.9
9	邻苯二甲酸丁基苄酯	15.59	0.9976	y = 2E+06x - 110666	4.8
10	邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯	16.97	0.9981	y = 858722x - 144477	5.9
11	邻苯二甲酸二环己基酯	17.62	0.9979	y = 2E+06x + 53810	6.8
12	邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯	17.78	0.9981	y = 2E+06x + 62018	6.1
13	邻苯二甲酸二苯酯	18.01	0.9989	y = 1E+06x - 313909	7.6
14	邻苯二甲酸二正辛酯	20.10	0.9996	y = 2E+06x + 85830	5.9

 
 
 
 
 
 
2.3 回收率实验
量取5ml白酒样品，加入一定量邻苯二甲酸酯混合标准溶液，每个浓度进行三个平行试验，按照上述方法进行前处理，测定回收率，结果如下表。
 
 
 
表3  样品加标回收率结果（%）

序号	中文名称	保留时间	加标浓度 0.16mg/kg	加标浓度 0.4mg/kg
1	邻苯二甲酸二甲酯	7.93	98	102
2	邻苯二甲酸二乙酯	8.86	100	105
3	邻苯二甲酸二异丁酯	10.83	86	89
4	邻苯二甲酸二丁酯	11.57	89	85
5	邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯	11.94	73	78
6	邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯	12.67	83	81
7	邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯	13.01	82	86
8	邻苯二甲酸二己酯	15.40	93	97
9	邻苯二甲酸丁基苄酯	15.59	109	113
10	邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯	16.97	108	110
11	邻苯二甲酸二环己基酯	17.62	85	88
12	邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯	17.78	115	120
13	邻苯二甲酸二苯酯	18.01	112	119
14	邻苯二甲酸二正辛酯	20.10	91	99

 
2.4样品测试
选取市售的两种白酒，按照1.3方法对样品进行处理后进样分析，结果见表4。
 
                                      表4 白酒样品测试结果                      单位：mg/kg

序号	化合物名称	样品A	样品B
1	邻苯二甲酸二甲酯	N.D	N.D
2	邻苯二甲酸二乙酯	N.D	N.D
3	邻苯二甲酸二异丁酯	0.044	0.056
4	邻苯二甲酸二丁酯	0.08	0.48
5	邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯	N.D	N.D
6	邻苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯	N.D	N.D
7	邻苯二甲酸二（2-乙氧基）乙酯	N.D	N.D
8	邻苯二甲酸二己酯	N.D	0.09
9	邻苯二甲酸丁基苄酯	N.D	N.D
10	邻苯二甲酸二（2-丁氧基）乙酯	N.D	N.D
11	邻苯二甲酸二环己基酯	N.D	N.D
12	邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯	0.02	0.12
13	邻苯二甲酸二苯酯	N.D	N.D
14	邻苯二甲酸二正辛酯	N.D	N.D

 
 
 
2.5结论
   采用GC-MS检测白酒中的塑化剂；方法简便、快速，可同时检测14种邻苯二甲酸酯类化合物，在0.2～4μg/mL浓度范围内线性关系良好，加标回收率在73%～120%之间，精密度良好，检出限完全满足食品中塑化剂检测要求。
 
附：部分邻苯二甲酸酯化合物的质谱图及检索结果
 

图4 邻苯二甲酸二甲酯质谱图及谱库检索结果(1号峰)
 
 
 
 

图5 邻苯二甲酸二乙酯质谱图及谱库检索结果（2号峰）
 
 
 
 
 
 
 

图6 邻苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯质谱图及谱库检索结果（5号峰）
 
 
 
 

图7邻苯二甲酸丁基苄酯质谱图及谱库检索结果（9号峰）