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使用Kurabo核酸提取仪进行RNA的提取
2019/04/29 10:13
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方案摘要：
产品配置单：
Kurabo QuickGene-610L核酸提取系统
型号： Kurabo QuickGene-610L
产地： 日本
品牌：
¥20万 - 30万
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方案详情：
RNA是以DNA的一条链为模板，以碱基互补配对原则，转录形成的一条单链，主要功能是使遗传信息能够翻译成蛋白行使生物学功能，是遗传信息向表型转化过程中的桥梁。当我们研究基因的表达和调控时，第一步需要做的就是从组织或细胞中分离和纯化RNA。
首先了解一下RNA提取的小原则：
1.保证RNA的完整性；
2.获得高纯度的RNA；
3.操作简便，稳定性强。
抽提RNA的使用目的：
1.cDNA文库构建要求RNA完整而无酶反应抑制物残留；
2.Northern对RNA完整性要求较高，对酶反应抑制物残留要求较低；
3.RT-PCR对RNA完整性要求不太高，但对酶反应抑制物残留要求严格。
因此，明确实验目的是进行后续实验的首要条件。
Trizol法抽提：
Trizol是一种常用的总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，抑制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA，步骤如下：
液氮研磨--加入Trizol裂解混匀--加入氯仿抽提--离心--加入异丙醇沉淀--离心--酒精洗涤--离心--无酶水重溶。
Trizol作为RNA提取的常用方法，具有一下缺点：
1.操作步骤较复杂；
2.耗时长；
3.会用到氯仿等有毒试剂；
4.新手成功率低。
天美代理的日本KURABO公司的核酸提取仪采用专利的多孔膜法可以完美解决RNA降解的问题，另外具有操作简单，得率纯度高，片段完整，无需离心（可以直接放在安全柜操作）等优点，具体如下：
个人型核酸纯化仪Mini480和Mini8L
模块互换，一机两用
Mini480和Mini8L设计小巧，方便携带，可在实验室随意空间放置，空间占用小，更方便，对于P2，P3实验室内以及危险生物实验样品，可放置在安全柜，实验台等地方进行提取工作，可使用所有试剂盒，步骤如下：
加入试剂后手动转动增压轮，3次后进行洗涤，最后一次将管架拿到前面一排，在加入洗脱试剂后，转动增压，即可对DNA/RNA样品进行洗脱，收集。8个样品完成DNA/RNA样品纯化只需8分钟。
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