2018/01/29 14:13
阅读:1314
分享:方案摘要:
产品配置单:
赛默飞Trace1300E 气相色谱仪
型号: Trace1300 E
产地: 意大利
品牌: 赛默飞
¥30万 - 50万
参考报价
联系电话
方案详情:
进入临床实验和正在研发的单抗药物日趋增加,对于单抗药物的安全性和有效性评价的测试也越发重要。与小分子药物相比,单抗药物更易在生产、运输和储存的过程中,发生各种翻译后修饰的变化,比如单抗中甲硫氨酸和酪氨酸氧化,天冬酰胺脱酰胺化,天冬氨酸异构化等都会影响药物分子的稳定性,同时影响蛋白的结构和功能。因此,对各种翻译后修饰的质控分析也提出了更高要求。目前使用 LC-MS/MS 在线分析质谱技术,在常规的肽图分析中,可以同时对多种翻译后修饰进行定性和定量分析,比如甲硫氨酸氧化、N 糖基化、天冬酰胺脱酰胺化,但对于天冬氨酸异构化我们关注的都比较少,本文我们为大家提供更加完整的天冬氨酸异构化解决方案,有助于单抗药物的精细质控分析。
天冬氨酸(D)异构化是一种自发性的非酶翻译后修饰,发生异构化后的天冬氨酸(isoAsp),在蛋白骨架中插入了一个亚甲基,也就是同时天冬氨酸侧链减少了一个亚甲基,如图 1 所示,因此引起蛋白结构的变化,从而引起蛋白功能的变化。抗体 CDR 区域中天冬氨酸异构化已被证实会降低受体结合效率,影响最终的药效。位于铰链结构区域,或者位于 DG/DS(G为甘氨酸,S为丝氨酸)区域的天冬氨酸易发生异构化。同时在弱酸性溶液中,会增加天冬氨酸异构化的水平。在天冬酰胺(N)发生脱酰胺化时,会伴随带来天冬氨酸异构化,并且异构化的水平和非异构化的水平基本在 3:1 的比例,一般包含 NG 区域和 PENNY(P为脯氨酸,E为谷氨酸,Y 为酪氨酸)区域的天冬酰胺易发生脱酰胺化,并带来天冬氨酸异构化。由于异构化本身不会引起分子量和电荷的变化,因此大大增加分析的难度。在完整蛋白的水平上,可以使用离子交换和亲和色谱进行天冬氨酸异构化分析,不过对于低丰度的异构化水平就无法准确确定,因此,我们需要在肽段水平上进行天冬氨酸异构化的分析,当使用反相色谱(RP)进行分析时,一般异构化的肽段会优先于未异构化的肽段被洗脱下来,不过在受到柱子填料和流动相添加离子对试剂等因素影响时,同样会出现晚于未异构化肽段流出的现象。目前,在常用的碰撞诱导激活解离(CID)和高能碎裂(HCD)进行二级碎裂时,无法通过碎片离子进行天冬氨酸异构化的确认。ETD作为一种补充碎裂方式,尤其在进行长肽段,翻译后修饰肽段和完整蛋白水平分析时,可以提供与 CID/HCD 互补以及 ETD 特征性的碎片离子,从而准确的确定氨基酸序列以及翻译后修饰位点的信息。本篇中使用电子转移解离(ETD)时,包含天冬氨酸异构化的碎片会产生相应的特征质量增加,如图2所示,因此可以准确的判断天冬氨酸异构化的位点。
本文基于最新的三合一超高分辨质谱Orbitrap Fusion Lumos分析平台,采用ETD碎裂方式,建立了天冬氨酸异构化质谱解析方法,为单抗药物的准确、快速、精细解析提供了可靠的分析手段,尤其当一些药物质控分析中出现异常电荷异质性或药物异常降解时,可以进行肽图水平的精确质谱分析。
下载本篇解决方案:
更多
高压离子色谱Inuvion快速测定自来水中的常见阴离子
水中常见阴离子如氟离子、氯离子、亚硝酸根、硝酸根、溴离子、硫酸根、磷酸根等的含量,与水质密切相关。在《GB5749-2022 生活饮用水卫生标准》中,氟化物、硝酸盐、氯化物、硫酸盐作为生活饮用水水质常规指标,并给定了限值。在《GB8537-2018 食品安全国家标准 饮用天然矿泉水》中,对氟化物、硝酸盐、亚硝酸盐给与了限度要求。与传统离子检测方法,如分光光度法、电位滴定法、容量法和离子选择电极法等方法相比,离子色谱具有分析速度快、操作方便、选择性好、灵敏度高、性能稳定等优势,在水质分析中得到了广泛应用[1-20]。涉及到阴离子检测的标准及检验方法,大多使用离子色谱对多个阴离子进行同时测定,如《GBT 5750.5-2023 生活饮用水检验方法》、《GB 8538-2022 食品安全国家标准 饮用天然矿泉水检验方法》、《GBT 39305-2020 再生水水质氟、氯、亚硝酸根、硝酸根、硫酸根的测定离子色谱法》、《GBT14642-2009 工业循环冷却水及锅炉水中氟、氯、磷酸根、亚硝酸根、硝酸根和硫酸根的测定 离子色谱法》、《GB 13580.5-1992 大气降水中氟、氯、亚硝酸盐、硝酸盐、硫酸盐的测定离子色谱法》等国标方法,以及大量行业标准和地方标准。 在常规条件下,7种不同的阴离子,需要在10-30分钟内完成分离。近10年来,多款高压离子色谱产品及多种小粒径阴离子色谱柱相继推出,使离子色谱进入了新时代,也使高效、快速的阴、阳离子分离方法有了实现的可能。本篇AN使用赛默飞2023年发布的高压离子色谱新品Inuvion,开发出了一种快速分离的方法,搭配4 m的IonPac AS18小粒径柱,7分钟内完成7种阴离子的分析,灵敏度高,分离度好。
环保
2024/07/25
高压离子色谱Inuvion快速测定生活饮用水中的亚氯酸 盐、溴酸盐、氯酸盐、二氯乙酸和三氯乙酸
生活饮用水消毒过程中,消毒剂(如氯、氯胺、二氧化氯和臭氧)与无机物或有机物发生反应时,会产生消毒副产物(Disinfection by-products,DBPs)。一些消毒副产物已经被证实具有致癌性、生殖和发育毒性等,对人群健康构成潜在威胁[1]。在《GB 5749-2022 生活饮用水卫生标准》中,有5种消毒副产物作为生活饮用水水质常规指标,并给定了限值。其中,溴酸盐的最高含量不允许超过10 g/L,亚氯酸及氯酸盐含量均不得超过0.7 mg /L,二氯乙酸和三氯乙酸的最高含量分别不允许超过50 g/L和100 g/L。 饮用水中除含有消毒副产物外,还含有多种常规离子,如氯离子、硝酸根离子、碳酸根离子、硫酸根离子等,含量可达数百ppm,对消毒副产物的分离和检测有一定干扰。《GBT5750.10-2023 生活饮用水标准检验方法第10部:消毒副产物指标》中,给出了推荐的色谱条件,使用KOH作为淋洗液,梯度洗脱,分析方法时长约为40 min。 近10年来,多款高压离子色谱产品及多种小粒径阴离子色谱柱相继推出,使离子色谱进入了新时代,也使高效、快速的分离方法有了实现的可能。本篇AN使用赛默飞2023年发布的高压离子色谱新品Inuvion,开发出了一种快速分离的方法,借助于4m的IonPac AS19小粒径柱,21分钟内完成生活饮用水中亚氯酸盐、溴酸盐、氯酸盐、二氯乙酸及三氯乙酸,与国标推荐方法相比,效率提升100%。Inuvion的卓越性能,使该方法在分离度、准确度、稳定性均符合要求的前提下,检出限远低于国标限度要求,可满足用户对于生活饮用水中的消毒副产物快速、高通量的检测需求。
环保
2024/07/25
Thermo Fisher Scientific iCAP TQe ICP-MS/MS测定土壤和沉积物多种元素
本应用指南重点介绍了根据第三次全国土壤普查和环境监测方法 HJ766 和 HJ803 进行的土壤样品分析1,2。特别是,证明了Thermo Scientific™ iCAP™ TQe 三重四极杆 ICP-MS/MS 具有可靠的性能保证,提供了一种简单直接的分析方法,该方法仅使用氧气作为反应气体,具有出色的干扰消除能力和更高的灵敏度,达到了以单碰撞模式为主的SQ ICP-MS工作效率。
环保
2024/02/27
赛默飞色谱质谱土壤污染物分析解决方案-助力全国第三次土壤普查
万物土中生,土壤是人类赖以生存的物质基础。近年来频发的土壤污染事件频发,对食品安全、人居环境和人体健康都构成严重威胁,土壤污染防治工作迫在眉睫。 在“土十条”、“土壤环境质量标准”基础上,2022 年2 月,国务院印发了《关于开展第三次全国土壤普查的通知》,决定自今年起开展第三次全国土壤普查,全面深入推进耕地质量监测、评价、建设和保护等工作。 土壤环境监测作为检测土壤质量的有效手段,通过对土壤中重金属、有机污染物等污染物监测,能为土壤环境污染治理和预防提供参考依据。赛默飞土壤污染物解决方案,紧贴国家标准,涵盖仪器、软件、色谱柱、耗材和应用,我们采用行业前沿方案帮助解决您所面临的棘手的土壤污染物分析挑战。
环保
2024/02/27