血清血浆microRNA提取试剂盒
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1317-25T | 25T | 血清血浆microRNA提取试剂盒 |
P-PR1317-100T | 100T | 血清血浆microRNA提取试剂盒 |
产品介绍:
描述:血清血浆 miRNA 提取试剂盒是目前提取小 RNA(<200nt)操作步骤最简单、重复性最好、小 RNA 产 率最高的方法之一。使用该试剂盒通过一步上柱即可获得高 纯度 miRNA,可在 10min 左右完成小 RNA 的提取;且使用 该试剂盒提取的小 RNA(Small RNA)中,长度在 15~200nt 范围的 RNA 在 95%以上,基本不含有大 RNA 和 DNA,可 直接用于后续的反转录、Northern 杂交、测序等应用。
储存:室温可保存 2 年。
使用防护建议:Serum/Plasma miRNA Reagent 溶液中含有胍盐,其具有强烈的腐蚀性,试验时请务必佩戴防护眼镜、手套、口罩等防护措施,如有皮肤接触请立即用大量清水冲洗,再另行就医。
自备试剂:异丙醇、乙醇、75%异丙醇、2ml EP 管
操作方法:
(1) 向 1.5ml EP 管中加入 800μl Serum/Plasma miRNAReagent。将 300μl 血清或血浆样本加入到上述 800μlmiRNA Reagent A 中,用腕力混匀 30s,室温放置 5min。
(2) 13,000rpm 离心5min,将上清约 1ml 吸入到新的 2ml EP管中。加入 1ml 异丙醇,上下颠倒混合均匀。
(3) 将上述溶液分三次加至吸附柱中(每次约 700μl),13,000rpm 离心 15s,倒掉过柱液。
(4) 向吸附柱中加入700μl 75%异丙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(5) 向吸附柱中加入 500μl 无水乙醇洗涤一次,13,000rpm离心 15s,倒掉过滤液。
(6) 吸附柱 13,000rpm 空离心 2min,去掉残留的乙醇。
(7) 将吸附柱放入到新 1.5ml EP 管中,室温放置 2min,使残留乙醇挥发。在吸附柱滤芯上加入 30μl RnaseFree H2O,室温静置 2min,13,000rpm 离心 2min,洗脱产物即为提取的 miRNA。
注意事项:
(1) 由于血清血浆中的 miRNA 含量极低,提取的 miRNA 浓度通常在 5 ng/μl 以下,因此难以用常规的 NanoDrop 测量浓度,建议直接使用 10 μl 进行下游反转录。由于本试剂盒提取的是小 RNA,该浓度下的 miRNA Copy 数足以进行下游检测。
(2) 由于血清血浆中 miRNA 的含量低,为了获得更可靠的实验数据,建议使用特异性和灵敏度更好的 TaqMan 探针法进行 miRNA 的下游检测。本试剂盒提取的 miRNA 并不限于其它检测方法和用途,包括 SYBR Green 法检测、二代测序、芯片等检测领域。
(3) 血清血浆 TaqMan miRNA 反转录试剂盒为血清血浆专用,不可用于细胞和组织的 miRNA 检测实验。
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pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
植物叶绿素(chlorophyll)含量试剂盒 | SLAP2抗体 SLAP2 |
大量蛋白样品液相法去内试剂盒 | Toll蛋白相互作用蛋白抗体 Tollip |
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细胞内核酸氧化8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)比色法测定试剂盒 | G蛋白偶联受体82抗体 GPCR GPR82 |
细胞过氧化酶活性染色试剂盒 | HERPUD蛋白家族成员2抗体 HERPUD2 |
人白介素1可溶性受体Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa分析检测试剂盒 | 晚期糖基化终末产物特异性受体抗体 RAGE |
蛋白激酶Cε型抗体 phospho-PKC Epsilon (Ser729) | 平滑肌细胞相关蛋白4抗体 MFSD1 |
蛋白质磷酸酶2调节亚基5D/PP2A-B56-δ抗体 PPP2R5D | 鸟嘌呤核苷酸交换因子RGNEF抗体 RGNEF |
非霍奇金瘤重复蛋白3抗体 NHLRC3 | 小鼠催乳素(PRL)elisa检测试剂盒 |
富含亮氨酸重复蛋白15抗体 LRRC15 | 原钙粘蛋白γA8抗体 PCDHGA8 |
乙醛脱氢酶1型重组兔单抗了抗体 ALDH1A1 | 大鼠Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)elisa分析检测试剂盒 |
磷酸化周期素E2抗体 phospho-Cyclin E2 (Thr396) | 鳞状细胞癌增强蛋白1抗体 GASC1/KDM4C |
总胆固醇(TC)含量测试盒 | PTB结合核蛋白2抗体 RAVER2 |
冰冻切片组织化学AP酶联NBT/BCIP间接检测试剂盒(含AP二抗) | 受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体 ZAR1L |
PE标记人CD57单克隆抗体 human CD57/PE | 血清血浆microRNA提取试剂盒FITC标记人CD117 (c-kit)单克隆抗体 human CD117 (c-kit)/FITC |
丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶MST4抗体 MST4 | FAM63A蛋白抗体 FAM63A |
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