RNaseOUT-RNase Inhibitor 为采用电子重构架技术重组表达, 可高效的与RNase A/B/C形成1:1的复合物,从而保护RNA免受降解。与野生型人源(human)、鼠源(murine)、猪源(porcine) Inhibitor比较来看,该酶在如下几方面得到明显提升:(1)抗氧化/抗巯基类性能的提升,在0-10 mM DTT浓度下,活性无明显差异,因此不仅适用于PCR,也可适用于转录等高浓度DTT体系。(2)亲和力得到明显提升,在特定条件下可以完全抑制RNase,从而长效保护体系中的RNA分子。(3)耐热性显著提高,在55°C条件下加热10min后,仍然保留90%以上活性。
单位定义
抑制5 ng RNase A 的50%活性所需的RNase Inhibitor量定义为一个活性单位。
储存
-20°C可保存2年。
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
应用实例3:采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2,结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性,而60℃条件下1min内酶活完全释放,恢复100%活性
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