Homo Blood PCR Mix 专为抗凝全血样品直接进行PCR设计,其Blood DNA聚合酶(来源COD DNA聚合酶)对全血样本中的杂质具有高度耐受性(最高加入全血样品为10%)。在进行血液直扩时,可轻松扩增出4.5kb的gDNA片段。该酶的延伸速度为4kb/min,产物平末端。该制品中已经含有溴酚蓝染料,PCR扩增完毕后可直接点样于琼脂糖凝胶,无需再加入DNA Loading Buffer。
Blood DNA聚合酶具有5’-3’的聚合酶活性、3’-5’的外切酶活性,其保真度为Taq酶的40倍。Blood Buffer Mix中含有独有的增强因子和缓冲系统。使用该制品可以从人抗凝全血中,高灵敏度的直接扩增4.5kb的DNA频段。该制品的扩增速度为4kb/min。
储存
长期储存置于-20°C以下,可保存2年,避免反复冻融。
应用实例1:在以A3824-03或 A3828-03,用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果,可以看到检测反应<20min(达平台期)。
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应用实例2: 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略,在反应结束后,倒置反应管,溶解管盖上染料后,阳性样本呈现出醒目的绿色,阴性表现出橙色,区分明显。且该方法不受样本类型限制,杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板,1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies,NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。
![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1ab7e4d0-ee4e-4ac0-a331-5e5047ebd645.jpg)
应用实例3:采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2,结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性,而60℃条件下1min内酶活完全释放,恢复100%活性
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