SD大鼠脂肪间充质干细胞
一、细胞基本属性 |
细胞名称 | SD大鼠脂肪间充质干细胞 |
英文名称 | Sprague-Dawley Rat Adipose-derived Mesenchymal Stem Cells(SD ADSCs) |
商品货号 | ORCB2002R |
种属来源 | 大鼠 |
组织来源 | 脂肪 |
细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁生长 |
产品规格 | 1X10^6cells/T25培养瓶 |
产品描述 | SD大鼠脂肪间充质干细胞取自SD大鼠的腹股沟脂肪,经检测,确保细 胞无细菌、真菌、支原体和病毒污染,表达多种间充质干细胞特异性表面标记,具有良好的增殖和分化潜能,经定向诱导,可分化为脂肪细胞、成骨细胞、成软骨细胞等。 |
培养体系 | SD 大鼠脂肪间充质干细胞专用培养基 |
换液频率 | 发现有比较多的死细胞或培养基颜色较黄时,应换液。一般为每 2-3 天换液 |
传代比例 | 一般为 1:2 |
传代周期 | 细胞汇合度达 80%~90%时,可进行传代,一般为 48~72 h,不可让间充质干细 胞完全融合或过度融合,以免发生生长接触抑制,影响细胞的生长状态。 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5%; 温度:37℃ |
一、 收货后处理方法
收到细胞后请检查包装是否完整,干冰是否充足,冻存管有无破损,并核对管身标签信息和数量,确认是否与装箱单一致。如有异常情况,请及时与我们联系。
如不立即进行实验,请将细胞放至-80°C或液氮中保存。
二、 SD ADSCs的复苏
1. 实验前开启水浴锅预热完全培养基。
2. 在工作台中准备好 15 mL 离心管加入 5 mL预热后的完全培养基。
3. 从-80°C 冰箱中取出冻存管,将冻存管置于37°C水浴锅内,快速摇动解冻直到内容物融化,同时需注意避免水面没过管口。NOTE:建议将液氮中的细胞提前取出置于-80°C 待液氮挥发后复苏。
4. 对冻存管外壁进行常规消毒后,在工作台内小心开盖,尽量避免气泡溢出,轻柔吹打数次,转移至 15 mL 离心管内。使用 1 mL 培养基清洗冻存管内壁,一并收集至 15 mL 离心管内。
5. 250 g 离心 5 min,收集细胞沉淀,弃掉上清并加入 2 mL 完全培养基重悬(如有台盼蓝可取少量进行染色计数)。
6. 将重悬后的细胞接种至 T25 或同等底面积器皿,“划十字”摇晃细胞培养器皿,使细胞均匀分布。把细胞放入 37°C,5%CO2,饱和湿度的培养箱中培养。
7. 24h 后镜下拍照观察,换液后继续培养。如有异常情况,请及时与我们联系。
三、 SD ADSCs的传代
1. 预热 1×PBS、胰酶和完全培养基。
2. 吸去原培养基。用 1×PBS 洗涤细胞 2~3 次。
3. 吸去 1×PBS。加入胰酶。轻轻旋转,使胰酶覆 盖 细 胞 表 面 , 消 化 , 显 微 镜 下 观 察 约
70%~80%左右的细胞变圆后,用手轻拍培养器皿外壁使细胞脱壁。
4. 当观察到细胞明显脱落,立即加入预热的完全培养基终止消化。用吸管吸取液体,反复轻柔吹打培养器皿底壁,使细胞彻底脱离器皿底壁。NOTE:建议可添加 2 倍胰酶用量的完全培养基用于终止消化。
5. 将细胞悬液转移到离心管中。用 1xPBS 清洗底壁,收集细胞悬液至离心管中。
6. 250 g 离心 5 min。
7. 小心弃去上清液,加入 1~2mL 完全培养基重悬细胞。
8. 选择合适的培养器皿,加入适量完全培养基,按照合适的传代比例(一般为 1:2)接种细胞,“划十字”摇晃细胞培养器皿,使细胞均匀分布。
9. 把细胞放入 37°C,5%CO2,饱和湿度的培养箱中培养。
四、 SD ADSCs的冻存
1. 待细胞生长至可传代的汇合度,即可消化准备冻存。
2. 消化细胞,取少量细胞悬液计数。细胞悬液经250 g离心5 min。
3. 小心弃掉上清。用4°C预冷的冻存液重悬细胞,一般冻存密度为1×10^6个/mL。
4. 对冻存管进行标识后,把细胞分装到冻存管中,旋紧冻存管盖。
5. 如使用澳睿赛冻存液,冻存管直接竖直放入-80°C冰箱即可。如使用程序冻存液,需将冻存管放入程序降温盒后方可放入-80°C冰箱。
6. 24小时后可将细胞转移到液氮进行长期保存。
五、 该细胞只可用于科研。
1. 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2. 本产品未通过用于活体诊断的审核
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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