大鼠终板软骨细胞
Rat endplate chondrocyte
一、细胞基本属性 |
细胞名称 | 大鼠终板软骨细胞 |
组织来源 | 椎间盘组织 |
商品货号 | ORCR152 |
种属来源 | 大鼠 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 |
细胞简介 | 大鼠终板软骨细胞分离自椎间盘终板软骨组织;椎体终板是椎体在生长发育过程中,椎体上下面的骨骺板骨化停止后形成骨板,呈轻度凹陷,即为骨性终板。椎体终板的中央仍为一薄层透明软骨覆盖,并终生存在,即为软骨终板,上下软骨终板与髓核和纤维环连接共同构成椎间盘。椎体终板构成了椎间盘的上下边界,位于椎体中心的松质骨和椎间盘之间。是由软骨下骨和厚度相当的覆盖其上的软骨组成。主要作用是防止椎间盘髓核组织嵌入椎体,同时具有平衡分散应力的作用。成熟的终板软骨细胞多2-8个成群分布于软骨陷窝内,这些终板软骨细胞由同一个母细胞分裂增殖而成,称为同源细胞群。电镜下,终板软骨细胞有突起和皱褶,细胞质内有大量的粗面内质网和发达的高尔基复合体及少量的线粒体。在组织切片中,终板软骨细胞收缩为不规则形,在软骨囊和细胞之间出现较大的腔隙。体外培养的终板软骨细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。 |
培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
换液频率 | 每3-4天换液一次 |
生长特性 | 贴壁 |
细胞形态 | 梭形、多角形 |
传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
传代比例 | 1:2 |
消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
方法简介:澳睿赛实验室分离的大鼠终板软骨细胞采用胶原酶 - 中性蛋白酶联合消化并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:澳睿赛实验室分离的大鼠终板软骨细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
大鼠终板软骨细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
大鼠终板软骨细胞体外培养周期有限;建议使用澳睿赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 贴壁细胞消化
1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。
3. 细胞收货脱落
1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;
3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。
4. 细胞实验
因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和澳睿赛技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
1)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
2)本产品未通过用于活体诊断的审核
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
大鼠终板软骨细胞信息由澳睿赛生物技术(上海)有限公司为您提供,如您想了解更多关于大鼠终板软骨细胞报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应大鼠终板软骨细胞外,澳睿赛生物技术(上海)有限公司还可为您提供大鼠肝实质细胞、大鼠小肠隐窝上皮细胞、兔血管外膜成纤维细胞等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。