LC-SPX生化/LC-MJX霉菌培养箱在粪大肠菌群检测中的应用

①高压灭菌器。

②力辰科技生化/霉菌培养箱：LC-SPX-150BE/LC-MJX-150BE。

③超净工作台。

海水，乳糖蛋白胨培养液、EC培养液（E.Coli Broth）。

采用发酵法( multiple-tube fermentation, MTF ) 利用大肠菌群繁殖时使乳糖发酵并能使乳糖蛋白胨培养液变黄同时产生气泡的原理。

( 1 ) 初发酵实验：以无菌操作等量吸取 10 mL 经充分摇匀的海水水样，分别加入 5 支各盛有 5 mL 已灭菌的三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管中；等量吸取 1 mL 海水水样，分别加入 5 支各盛有10 mL 已灭菌普通浓度的乳糖蛋白胨培养液的试管中；吸取 1 mL 海水水样注入盛有 9 mL 已灭菌清洁的海水的试管中，摇匀。然后等量吸取 1 mL 此种稀释液于 5 支盛有 10 mL 已灭菌普通浓度的乳糖蛋白胨培养液的试管中，于 44 ℃ 培养 ( 24 ± 2 ) h，产酸产气者视为可疑菌群。产酸的试管颜色变黄 ，产气者试管内有气泡表明试验阳性。导管内产气不明显 ，可轻拍试管，有小气泡升起的为阳性 。

 ( 2 ) 复发酵实验：将可疑菌群管接种于 EC 培养液（E.Coli Broth)中，于 44 ℃ 培养 ( 24 ± 2 ) h，在此期间内所得的产气阳性管即证实有粪大肠菌群存在。依据阳性管数查表 ，计算每升水样中粪大肠菌群数的最近似值 ( most probable number, MPN )。