振荡在生物培养中的作用生物培养分为静态培养和振荡培养。振荡培养，亦称悬浮培养，是指把微生物细胞接种于液体培养基中，并放置在摇床或振荡器上不停振荡的一种培养方法。广泛应用于菌种筛选和微生物扩大培养，是微生物生理、生化、发酵和其他生命科学研究领域中常用的培养方式。振荡培养不适用于含有易挥发性化学溶剂，低浓度爆炸气体和低燃点气体的物质以及有毒物质的培养。那静态培养与振荡培养有什么区别呢？CO2培养箱为细胞培养模拟了一个适宜的培养环境，包括温度，CO2浓度和湿度等外部条件。如干细胞在静态培养条件下，细胞贴附在底部瓶壁，溶解氧和营养物质会形成浓度梯度。然而悬浮细胞在温和的振荡培养条件下，消除了浓度梯度，增加了溶解氧浓度，更有利于生长。在细菌和细胞培养时，振荡培养可改善与培养基成分的接触和氧的供应，特别是对真菌的培养，不会形成菌膜或者菌团。霉菌静置培养得到的菌体能明显看到是有菌丝的，形态与平板上生长状态有些类似；而摇床培养得到的菌体是球形的，即菌丝聚集成团。所以在微生物工业上与振荡培养具有同样效果的搅拌培养也已被广泛应用。组织培养中的旋转培养法也是振荡培养的一种。摇床振荡培养的作用：1、传质，就是底物或代谢产物更好在体系内转移和发挥作用。2、溶氧，在好氧培养过程中，空气是滤过开放的，所以通过振荡可以让更多空气中氧气溶解于培养基中。3、体系均一，有利于对不同参数的取样测定。

摇床振幅如何正确选择?什么是摇床的振幅？摇床的振幅指托盘在做圆周运动时候的直径，有时候我们也叫“振荡直径”或“轨道直径”符号：Ø。什么是氧气传递效率（OTR）？氧气传递效率是指，氧气从大气中传入到液体中的效率。OTR数值越高，氧传递效率越高。振幅和转速的影响这两个因素都会影响培养瓶中培养基的混合。 混合效果越好，氧传递速率（OTR）就越好。遵循这些指导原则，可以选择最适合的振幅和转速。一般来说，选择25mm振幅可以作为万能振幅应用于所有培养。正因为如此，大多摇床的振幅都是25毫米。在一些应用中，如果对氧传递/细胞生长有特殊的限制，可能会选择一些特殊的振幅。细菌，酵母和真菌培养：摇瓶中的氧气传递效率比生物反应器低得多。多数情况下氧传递可能是摇瓶培养的限制因素。 振幅与锥形培养瓶的大小相关：大瓶使用大振幅。建议：25mm振幅应用于从25毫升到2升的锥形培养瓶50mm振幅应用于2升至5升的锥形培养瓶细胞培养：* 然而，哺乳动物细胞培养对氧气的需求相对较低，较低的功率输入即可。* 对于250mL摇瓶，在较为宽广的振幅和振速范围（20-60mm振幅；100-300rpm）都可以提供足够的氧气传递。* 如果直径较大的烧瓶（Fernbach烧瓶）推荐使用50毫米振幅* 使用一次性培养袋，推荐使用50mm振幅。微孔板和深孔板：对微孔板和深孔板有两种不同的方法可以获得最大的氧气转移！* 50mm振幅，转速不低于250rpm * 使用3mm振幅，转速在800-1000rpm请注意以下几点在许多情况下即使选择了合理的振幅，也未必能增加生物培养量，因为培养量的增加会受到多个因素影响。举例：如果十个因素中有一两个不理想，那么无论其他因素有多好，培养量的增长都是有限的，或者可以这样说，如果培养量的受限因素只有氧传递时，振幅的正确选择会得到明显的培养箱增加。比如，碳源若是受限因素，无论氧传递效果多好，也不会达到理想的培养量。振幅和转速振幅和转速都会对氧传递造成影响。如果在转速很低（比如100rpm）的细胞培养中，振幅的不同对氧传递几乎没有明显影响。要达到最高的氧传递效果，首先是尽可能的提高转速，托盘会适当的平衡转速。并不是所有的培养物都能够在高速震荡下良好生长，一些对剪切力敏感的培养物，高转速会导致培养物死亡。其他影响因素其他因素对氧传递也会有影响: * 装液量，锥形烧瓶的装液量为不超过总体积的三分之一。如果要达到最大氧传递，装液量不能超过10%。永远不要将装液量达到50%。* 扰流板:在所有类型的培养中，扰流板都有效提高氧传递。有些厂家推荐使用“超高产量”培养瓶。这种瓶的扰流板会增大液体摩擦力，摇床可能会达不到最大设定转速。振幅和转速的关联关系摇瓶中的离心力可以通过下面公式计算FC=rpm2 ×振幅离心力和振幅间存在线性关系：如果使用25mm振幅 到 50mm振幅（转速相同），离心力增加了2倍离心力和转速存在平方关系:如果转速提高到2倍（振幅相同），离心力提高4倍。如果转速提高到3倍，离心力则提高9倍！如果用振幅25mm，在给定的速度下，进行培养。如果希望用振幅50mm，达到相同的离心力，转速应该用1/2的平方根计算，因此您应该使用70％的转速，达到形同的培养条件。请注意上述只是理论上的计算离心力的方法。现实应用中会有其他影响因素。这种计算方法可以得到近似值，供操作参考。

箱体分舱段，培养条件更稳定二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（比如哺乳动物为37°C）、稳定的CO2水平（一般为5-7%）、恒定的酸碱值（pH值一般为7.2-7.4）、较高的湿度，是细胞、组织、细菌培养的一种仪器，是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备。CO2培养箱频繁开门存在的弊端：CO2培养箱的开门情况是影响细胞培养稳定环境的关键因素之一。CO2培养箱门打开的时间越长、次数越多，内部温度、CO2和湿度恢复到设定值所需的时间就越长。在实验室中，如果多人共用一台二氧化碳培养箱，存在频繁开关培养箱门的情况。每次开关培养箱门，培养箱内原有的的温度，二氧化碳浓度，湿度等条件，都会经历一次巨大的变化。一次约为30秒的开箱门，二氧化碳浓度会直接归零，温度会下降12度以上（设置37度，室温20度），湿度下降到环境湿度。全部条件再恢复的时间往往要15分钟以上。培养的样品，会因为多次开关门造成的培养环境频繁波动，难以达到预期最佳培养效果。频繁开关门，同步伴随的还有二氧化碳过量的消耗。同时，培养箱门打开后，敞开面积大小也会对细胞培养造成影响，因为它决定了内部环境与外部环境气体交换的程度。基于以上情况，如果我们在培养敏感型细胞，如人内皮细胞、HEK细胞、干细胞等，选择配置有分割腔体的CO2培养箱能够有效帮助我们避免细胞培养条件受到干扰，从而提高培养结果的可重复性。分割腔体的优势和作用：在培养箱中，将内部整个空间分为若干个独立的小腔体，每个腔体都有独立密封门。优势如下：1. 多人共用培养箱时，只需要在每个分割门上做好标记，每次取样品时，只需要打开独立的分割箱门，即可获得需要的样品，方便了样品分类。2. 分割门的打开，对整个箱体内部培养环境影响很小，大大减少了供应气体消耗和热量流失，同时降低了CO2培养箱内受污染的风险。3. 关上箱门后，往往在几分钟内就可以恢复到培养环境的原设定值。4. 培养条件的相对稳定，就意味着更容易或者良好的培养结果。

细胞培养的污染有哪些类型      细胞培养污染往往是细胞培养实验室最常遇到的问题，有时会带来十分严重的后果。细胞培养的污染物可分为两大类，化学污染物，如培养基、血清和水的杂质、内毒素、增塑剂和洗涤剂；以及生物污染物，如细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体，以及其他细胞系的交叉污染。虽然不可能完全消除污染，但通过彻底了解其来源并遵循良好的无菌技术，就可以减少其发生的频率和严重性。生物污染的主要类型：1、 细菌污染细菌是普遍存在的单细胞微生物。它们的直径通常为几微米，并且可以具有各种形状，从球体到棒状和螺旋状。由于它们无处不在和生长速度快，细菌以及酵母菌和霉菌是细胞培养中最常见的生物污染物。检测：在被感染后的几天内，通过肉眼检查培养物很容易检测到细菌污染；受感染的培养物通常出现浑浊（即浑浊），有时表面有一层薄膜。培养基的 pH 值突然下降也经常遇到。在低倍显微镜下，细菌表现为细胞间微小的移动颗粒，在高倍显微镜下观察可以分辨出单个细菌的形状。2、 霉菌污染霉菌是真核微生物，以称为菌丝的多细胞细丝形式生长。这些多细胞细丝的连接网络包含基因相同的细胞核，被称为菌落或菌丝体。检测：与酵母菌污染类似，培养物的 pH 值在污染的初始阶段保持稳定，然后随着培养物受到更严重的感染并变得浑浊而迅速增加。在显微镜下，菌丝体通常表现为细丝状，有时表现为更密集的孢子团。许多霉菌物种的孢子在其休眠阶段可以在极其恶劣和不适宜居住的环境中生存，只有在遇到合适的生长条件时才会被激活。3、 病毒污染病毒是借助宿主细胞进行繁殖的微观感染因子。它们极小的个体大小使得它们很难在培养中检测到，也很难从细胞培养实验室使用的试剂中去除。因为大多数病毒对其宿主有非常定向的依赖，它们通常不会对宿主以外物种的细胞培养产生不利影响。然而，使用病毒感染的细胞培养物可能对实验室人员造成严重的健康危害，尤其是在实验室培养人类或灵长类动物细胞时。检测：细胞培养物的病毒感染可以通过电子显微镜、使用一组抗体的免疫染色、ELISA 测定或使用适当病毒引物的 PCR扩增来检测。4、 支原体污染支原体是没有细胞壁的简单细菌，被认为是最小的自我复制生物。由于它们的尺寸极小（通常小于一微米），支原体很难被检测到，直到它们达到极高的密度并导致细胞培养物变质；在此之前，通常没有明显的感染迹象。一些生长缓慢的支原体可能会在培养物中持续存在而不会导致细胞死亡，但它们可以改变培养物中宿主细胞的行为和新陈代谢。检测：与细胞污染一样，被酵母菌污染的培养物会变得浑浊，尤其是当污染处于晚期时。被酵母菌污染的培养物的pH值几乎没有变化，直到污染变得严重，在此阶段pH值通常会增加。在显微镜下，酵母表现为单个卵形或球形颗粒。

为什么细胞培养需要二氧化碳？CO2既是细胞代谢产物，也是细胞所需成分，它主要与维持培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境，pH为7.2～7.4，以不超出6.8～7.6为宜。在细胞培养过程中，随着CO2释放量的增多，培养基会变酸，因此常加入NaHCO3（与CO2溶于水后所形成的H2CO3构成一个缓冲对）来调节pH，以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气，以便于气体的交换。细胞培养所用的培养箱一般为CO2培养箱，一是二氧化碳培养箱能够对温度、二氧化碳浓度和湿度提供精确稳定的控制，以便于其研究工作的进展；二是二氧化碳培养箱能够对培养箱内的微生物污染进行有效的防范，并且能够定期消除污染，以保护研究成果，防止样品损失。是不是采用其他pH缓冲系统就不需要CO2培养箱了呢？细胞培养的气体环境一般是95%的空气和5%的CO2。人们发现由于空气中的二氧化碳浓度很低，如果细胞不在二氧化碳培养箱中培养，培养液中的HCO3会被耗尽，这样会影响细胞的正常生长。所以大部分动物细胞的培养，还是需要二氧化碳培养箱。 为什么动物细胞培养用CO2培养箱，植物细胞不用？通常来说，CO2培养箱主要用来模拟形成一个类似细胞在生物体内的生长环境，例如提供适当的pH值、温度、湿度等。二氧化碳不仅是细胞生长的必需成分，还与维持培养液的pH有关，刺激细胞呼吸。植物体细胞可以在离体的情况下增值分化，对二氧化碳的要求不高，一般空气中的浓度就可以满足，只需保证空气新鲜干净即可。而动物体细胞不行，所以动物体细胞需要二氧化碳培养箱，而植物体细胞可以不使用二氧化碳培养箱。

使用二氧化碳培养箱如何有效控制污染？污染是细胞培养失败的主要原因之一。CO2培养箱应具备良好的污染控制放置培养过程中的细胞污染。污染源可分为直接或间接来源。直接来源是受污染的试剂、培养基或种子培养物。间接污染源包括实验室表面、设备和人员。细菌主要通过交叉污染传播。这可以通过良好的无菌技术、定期清洁和严格遵守设备定期维护计划来防止。良好的设备功能设计和定期使用自动自净化程序可进一步帮助减少污染。污染物是如何进入CO2培养箱并扩散的呢？CO2培养箱可能成为间接污染源。与生物安全柜不同，培养箱无法防止空气污染物的流入，因为在日常使用过程中必须打开门。培养箱室也可能被无菌技术的粗心大意以及细胞培养容器中未被注意到的飞溅物所污染。一旦污染物进入培养箱，温暖潮湿的环境会促进进一步的繁殖。如果未检测到污染，且未执行定期清洁和维护计划，则会对培养物造成风险。         污染物是如何进入CO2培养箱并扩散的呢？使用适当的无菌技术以及定期的清洁和消毒计划将有助于减少污染物的传播。例如，鉴于CO2培养箱在使用过程中有时会伴有霉菌生长，为确保培养箱免受污染且保证仪器箱体内的生物清洁性，可使用带有紫外清洁功能的CO2培养箱；另外一种方式是安装特有铜外壳HEPA滤器，能过滤培养箱内空气，可过滤除去99.97%的0.3um以上的颗粒，并能有效杀死过滤时被挡在滤器内的微生物颗粒。1. HEPA过滤器，需要腔室中的风扇辅助空气循环，以便通过滤清器吸入空气。优点是主动过滤空气，但有几个缺点：* 由于内部结构复杂，接缝和拐角处会滋生污染物。* 为了准备清洁和消毒，需要花费更多的时间来拆卸装置。* 腔室中产生的强制气流可能导致细菌进入的可能性更高。太小而无法过滤掉的污染物会在整个腔室中传播（例如支原体和病毒）。* 如果不能按照维护计划更换过滤器，过滤器可能会堵塞并成为污染源。2. 紫外线是另一种旨在消除可能进入腔室的空气和水源污染物的措施，广泛应用于箱体类产品中灭菌处理。UV技术的优势主要包括：* 可以有效的杀死病毒、孢子、包囊、包括隐孢子虫和贾第鞭毛虫。* 杀菌完成后，没有残留，不会对实验人员和目的培养物造成危害的剩余效应。* UV杀菌是一个物理过程，它不是化学消毒剂，因而不涉及有毒/有害或腐蚀性化学品的产生、搬运、运输或储存等。此外，自动杀菌装置能使箱内温度达到125℃从而杀死污染微生物，当它与HEPA系统结合使用就能够极大的减少污染。带有氧化铜内腔的培养箱，也同样具有抗菌和抗生物活性特点。氧化铜会使细胞内产生游离氧，从而引起氧化损伤，DNA损伤，细胞器膜破坏，从而抑制微生物生长。氧化铜对多种微生物，如对弧菌、大肠杆菌、枯草杆菌、金黄葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门杆菌等的生长都有明显的抑制作用

生物燃料研究的理想选择——光照发酵罐随着全球传统化石燃料供应量的减少，人们对可持续燃料的生产需求日渐增长。为降低对进口石油的依赖，减少温室气体的排放，人们迫切需要一种更清洁，更易得的能源物质。而微藻类因其繁殖快、培养周期短、无需耕地和耗水量少等优势成为了首选的生物能源给料。微藻类能将60％以上的重量转化为脂类。据估计，在相同的土地面积上，微藻类生产的脂类约是其他作物的15-300倍。 那么，我们一起看看常见水藻产脂类能力吧~Table 1.常见水藻产脂类能力汇总表种名脂含量  （% 生物质干重）脂生产能力  （mg/L/d）生物质体积生产能力  （g/L/d）生物质面积生产能力  （g/m3/d）纤维藻24.0-31.011.5-17.4布朗葡萄藻25.0-75.00.023.0牟勒氏角毛藻33.621.80.07普通小球藻5.0-58.011.2-40.00.02-0.200.57-0.95小球藻18.0-57.018.73.50-13.90绿球藻19.353.70.28寇氏隐甲藻20.0-51.110盐生杜氏藻6.0-25.0116.00.22–0.341.6–3.5/   20–38后棘藻27.447.30.17纤细裸藻14.0-20.07.70等鞭金藻7.1-3337.80.08-0.17微球藻20.0-56.060.9-76.50.17-0.51微拟球藻12.0-53.037.6-90.00.17-1.431.9-5.3富油新绿藻29.0-65.090.0-134.0三角褐指藻18.0-57.044.80.003-1.92.4-21斜生栅藻11.0-55.00.004-0.74中肋骨条藻13.5-51.317.40.08四列藻12.6-14.743.40.30一、发酵培养二、生物柴油转化几乎所有的水藻都能产生脂类，占生物质重量的1%－85%。在低氮条件下，一个“脂触发”过程让某些藻类开始在细胞内积聚脂类。这种现象倾向于在低氮条件下发生，此时营养物质被耗尽，细胞停止分裂。微藻类产生的脂类通常为三酰甘油，又称TAG。TAG被转化为脂肪酸甲酯（FAME），即生物柴油。生产可使用生物柴油的最后一步是除去副产物甘油，及任何其他可能存在的污染物。甘油的密度大约为1050 kg/m3，而生物柴油的密度为880 kg/m3，因此，可以用重力沉降或离心的方法除去甘油。通常会通过加入蒸馏水除去大多数的污染物，包括肥皂、残留的催化剂以及甲醇。烷基酯用于干燥生物柴油和除去多余的水份，酸中和催化剂和可能形成的肥皂，然后用水冲洗。生物柴油可以用10% H3PO4 冲洗，再用水冲洗。硅胶和酸式硅酸镁可用于吸附污染物，污染物可以用膜除去。海洋生物尤其是微藻和大型藻类的细胞和组织培养是世界研究领域中的热点之一，其中有些次生代谢产物如卤代萜类是研究较为广泛的次生代谢产物。

如何正确使用二氧化碳培养箱？二氧化碳培养箱，作为生物工程所需要的设备，是细胞、组织、细菌培养的关键设备。而作为重中之重的细胞培养，二氧化碳培养箱需要严格密封，并准确控制腔体内部的参数如：温度、样品的pH以及相对湿度等。如何正确使用二氧化碳培养箱并提高实验效率呢？1.使用前A.设备应放置在平坦的表面上、无振动、通风良好B.电源插座必须与设备适配，在使用前，请确保设备接地。C.使用前，建议使用至少70%乙醇与30%蒸馏水浸湿的布料清洁整个腔室、支架和水盘。清洁完毕后，向培养箱内水盘加入适量的无菌蒸馏水。使用前需要调平培养箱，在培养箱的第二个隔板上放一个小型水平尺，调整水平脚，直到培养箱水平且稳定。D.确保使用的供气气体是纯净达标的，避免损坏设备，缩短使用寿命。二氧化碳培养箱不适用于含有易挥发性化学溶剂，低浓度爆炸气体和低燃点气体的物质以及有毒物质的培养。2. 使用中A.尽量缩短开门时间和减少开门次数，避免箱内污染及培养条件波动较大，影响培养效果。B.在培养过程中，不要随意更改参数和关闭电源，以免影响细胞培养。为了保证实验结果的准确可靠,在日常使用中,可以测量和校准培养箱内的温度及CO2，以确保实际数值与设定数值保持一致。C.定期更换水盘内的无菌蒸馏水，以免滋生细菌产生污染。D.随时注意供气气体的剩余量，确保连续供气。E.培养箱需要定期进行灭菌，防止微生物污染。灭菌前，清空箱体，水盘可以放在里面，但不能有水。F.当您看到产品冒出烟雾、闻到燃烧之类气味或看到任何其他奇怪现象时，您必须切断电源并停止使用设备。G.开关箱门时，请使用门把手轻轻的操作，避免过度冲击损坏设备。3.使用后A.培养箱在不使用时，请关闭电源，关闭前需要擦干箱体内的水分。B.定期清洁培养箱，控制面板请务必使用干布清洁。C.不要将设备存储在高湿度的地方，可能会形成冷凝水。D.移动设备时，请用胶带固定门和其他可移动部件，不要将其倒置，避免设备损坏。

二氧化碳培养箱如何进行清洁及消毒灭菌1、 二氧化碳培养箱的清洁清洁是指去除灰尘、污垢和有机污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿布拖擦。粉尘、污物以及有机物是微生物的栖身之所，并可能影响除污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂)的作用。二氧化碳培养箱必须先经过清洁才能实现消毒和灭菌的目的，许多杀菌剂只对经过清洁过的物品才具有杀菌活性。清洁时必须使用与以后使用的消毒剂或杀菌剂化学性质上相容的试剂进行清洁、消毒。① 清洁箱体表面：先拂去表面的灰尘，再用湿的海绵或软布清洗，再用软布擦干。如果有污物则用低浓度的清洁剂清洗，然后擦干。② 清洗箱体内部：选择合适的消毒剂。所有的物件和表面必须彻底清洗，然后用无菌水冲洗，再擦干或晾干。③ 清洗玻璃门：清洗箱内的玻璃门时使用的清洁剂和清洗培养箱内部时使用的相同。然后用蒸馏水漂洗，从而清除残留的清洁剂，最后用软布把门擦干。2、 二氧化碳培养箱的消毒和灭菌消毒是指杀死微生物的物理或化学手段，但不一定杀死其孢子。灭菌是指杀死所有微生物，当二氧化碳培养箱内细胞受到污染时则需要采取灭菌措施。一般，在二氧化碳培养箱内细胞没有污染的情况下平均1-3个月彻底消毒一次。最常用的3种消毒灭菌的方式是：液体消毒剂、紫外和干热。①液体消毒剂：选择对二氧化碳培养箱无腐蚀性的液体消毒剂，并且液体消毒剂的消毒效果好坏和很多因素有关。比如：场所的温度、接触时间、pH、穿透能力、有机物的反应。这些因素中的一些很小的变化可能会造成去污剂的效力上大的不同。因此甚至在很有利的情况下，当最终要求必须无菌时，液体去污剂也不是完全可信赖的去污方法。② 紫外消毒：一般先用蒸馏水清洗干净后，再用培养箱自带的紫外灯照射一天。当紫外灯在有遮光罩的情况下照射时，紫外线照射到腔体的次数很少。③ 干热灭菌：当CO2培养箱用于污染危险区域时，干热灭菌可作为清洁室内的附加手段。干热灭菌采用6面直接加热，加热温度高达125°C。这使得腔体能够破坏细菌。高温（125°C）在培养箱中保持2小时以上。经过8小时的灭菌程序（包括2-3小时的预热时间，具体情况取决于温度），灭菌室内的温度降低并恢复到37°C或上一个程序设定的温度。除了以上几种方法外，还可以采用联合杀菌的方法，几种消毒灭菌的方法同时使用来达到彻底清洁的效果。

二碳箱气套式与水套式加热该如何选择？细胞生长需要适宜的温度。哺乳动物细胞培养温度一般为36.5±0.5℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。总的来说，培养细胞对低温的耐受力比对高温强。温度上升不超过39℃，细胞代谢强度与温度成正比。39-40℃培养1h，细胞受到一定损伤但仍可能恢复；41-42℃培养 1h，细胞受到严重损伤，但不致全被杀死，个别仍可能恢复；43℃以上培养1h，细胞将被杀死。相反，温度不低于0度，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞置于25-35℃，细胞仍能生存和生长，但速度减缓；放在4℃数小时后，再回到37℃，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而缓慢，温度降至冰点以下，细胞可因胞质结冰受损而死亡。温度控制对培养细胞的健康和生长非常关键。CO2培养箱能够对温度提供精准稳定的控制，主要有两种温控类型：水套式和气套式。它们的区别主要在它的加热方式上，其实气套式与水套式这两种加热方式对实验结果影响不大、都能够达到可靠的效果，只是在温度恒定和加热快慢上有所区别，所以用户可根据自身的实验环境和实验室条件来选择。1、水套式加热水套式加热方式是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的，其主要优点是：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就可以较长时间保持培养箱内的温度准确性和稳定性。但水套式需要对水箱进行定期加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况，若清理不及时可能会有潜在的污染隐患。2、气套式加热气套式加热主要是通过设置在箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，也叫六面直接加热；气套式和水套式相比较，加热速度更快。为了不影响培养，培养箱应在培养区域外安装一个风扇，可以帮助培养室内的空气循环，而不会干扰细胞培养；当箱门开启或关闭时，这种温和的空气循环可以加快内部温度，CO2浓度和湿度的恢复。此加热方式特别适用于短期培养以及需要箱门频繁开关取放样的实验。另外，对于用户来说气套式设计比水套式更简单化。