XinBio人淋巴细胞分离液

产品介绍

XinBio人淋巴细胞分离液是葡聚糖和液影酸钠混合液达到特定的比重，通过离心分层获得纯化的单核细胞淋巴细胞。

分离原理：血液中单独核细胞和淋巴细胞，其容积、形状和溶解度与别的细胞不一样，淋巴细胞分离液是某种密度接近1.075∽1.090 之间而近似于等渗的溶液，用它做密度梯度离心，使一定密度的细胞按相对密度梯度分布，进而将各类血细胞多方面分离。

成份：主要为多聚糖，泛影酸钠

形状：本品为透明澄清液体，微乳光，无肉眼可见不溶物

密度：1.077±0.001g/mL 

渗透压：290±15mOsm

用途：用于分离提取人外周血或脐带血中的单个核细胞

贮藏条件及有效期： 4-30°C 避光保存，禁止冻存。有效期24个月。

使用时的短暂光照对本品的影响可忽略不计，但在每次使用后，应尽快放回避光处保存。

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使用方式

1. 将分离所用的缓冲液与本品均恢复至室温。

2. 用离心管收集血液，并与等量的生理盐水，Hanks 液或不含钙镁的PBS 混匀（血液不稀释亦可）。

3. 取15mL 离心管，加入3mL 本品，并将2 步骤中的稀释血液缓缓铺加到本品的上层。注意：铺加血样时建议速度适中，尤其是刚开始时的铺加， 避免破坏淋巴细胞分离液与血样的界面。

4. 室温下，800g 离心20min。

5. 离心后，离心管由上到下分为4 层：血浆层-白膜层-人淋巴细胞分离液层-红细胞与粒细胞的沉淀。不用弃去上层液体， 用巴斯德管小心吸取白膜层至另一新的离心管中。

注意：由于样本之间的差异，有的血样离心后，仍有部分的红细胞以及粒细胞残留在分离液层中，无法沉淀完全，因此用巴斯德管吸取白膜层的细胞时，尽量少吸取到分离液层中的液体。

6. 用10mL生理盐水，Hanks 液或不含钙镁的PBS重悬获得的PBMC，300g，离心10min。

7. 重复操作步骤 6 一次，沉淀即为 PBMC。

注意事项

1. 本品对光敏感，将本品持续暴露在光照中会使泛影酸钠中的碘离子分离，影响分离效果，但日常的使用过程中，这种影响可忽略不计。

2. 若本品储存于冰箱中，那么需将本品恢复至室温后使用。

3. 血样的新鲜程度与分离效果关系密切，为了获得佳的分离效果与细胞活性，好在取血后2h内进行分离操作，血样的存放时间越长，分离效果越差。

4. 由于样本之间的差异，为了获得佳的分离效果，可能需要调整离心力与离心时间，但通常离心力大不超过1000g。