20 世纪末，Vogelstein 等人提出数字PCR( digitalPCR，dPCR) 的概念，拉开了数字PCR基础研究的序幕，随后数字PCR技术不断改进，直到2010年正式成为分子生物学、医学诊断和环境监测等领域的重要研究工具。2019年Bio-Rad推出全球首台一体化数字PCR仪，使数字PCR进入“2.0”时代。该产品大幅减少了之前数字PCR产品所需要的繁杂手动移样操作，为数字PCR更好地打开临床市场提供了助力。作为国内专注于研发数字PCR的企业，深圳市博瑞生物科技有限公司（以下简称“博瑞生物”）当初是如何毅然决定进入这个领域？如今又如何看待数字PCR市场格局？带着这些问题仪器信息网采访到了博瑞生物创始人——於林芬。於林芬：博士，深圳市孔雀人才，深圳市博瑞生物科技有限公司董事长 创立初衷：改进原有技术路线，研发国产数字PCR一体机博瑞生物成立于2016年，由资深留学归国人员、中科院博士和高级工程师共同创办，是一家围绕体外诊断行业（IVD）的前沿技术——液滴数字PCR技术及其关联产业，集设备、试剂、及配套耗材的研发、生产和销售于一体的国家高新技术企业。谈及创立博瑞生物的初衷，於林芬表示，她在博士后期间主要从事液滴细胞培养和药物筛选，实验期间接触到数字PCR，觉得当时的数字PCR产品操作过程太过繁琐，手动转移液滴造成大量液滴损失，并且仪器价格非常昂贵、配套耗材种类繁多、单次使用成本高。“回到国内，我跟后来的合伙人聊完这件事情，当即就讨论了两个问题：第一，能不能改进技术路线，做一个不需要液滴转移的技术流程；第二，能不能够做出一款国产一体化数字PCR仪器。经过深入的思考和探讨后，我们一致觉得技术上是可行的。为了实现这个想法，我离职创立了博瑞生物，全力以赴地做好产品。”於林芬说。致力打造“简单好用、性能可靠、价格便宜”的数字PCR产品数字PCR微滴生成技术主要有两大类：芯片式和液滴式。微流控芯片技术是芯片式的一种，该技术涉及材料、化学、物理、微机电、生物等多个学科，学科交叉性强，产品成熟周期长，但产品稳定后优势十分明显：产品体积小、成本低、可批量生产、性能稳定等。博瑞生物采用微流控芯片油包水阶梯乳化的液滴生成技术。於林芬说：“博瑞生物在微流控芯片领域深耕多年。我从2002年研究生阶段在导师林炳承研究员的引领下进入这个前沿领域，先后从事基础研究、应用研究和产品开发工作，深刻体会到微流控芯片从原型到稳定产品过程中的周期长、难度大的特点。幸运的是，随着国内精密加工工艺水平的提升，我们先后完成了芯片的设计验证、注塑工艺验证和封接工艺验证，最终做出了一款性能优良、结果稳定可靠的微流控芯片数字PCR产品。”据於林芬介绍博瑞生物自成立之初就立志做一体化数字PCR的领导者，不断精心打磨低成本、一体化、高稳定性的数字PCR系统。她表示：“我们的目标是，操作上比同类产品简单，性能和可靠性做到最优，性价比有绝对的竞争力。为这个目标我们奋斗了6年，终于打造了一款集液滴生成、PCR扩增、液滴检测和数据处理于一体的数字PCR系统DropXpert S6，真正做到芯片进、结果出，让数字PCR可以像荧光定量PCR一样简单，同时，价格也在用户可接受的范围内。”DropXpert S6数字PCR市场格局分散，市场应用前景一片光明於林芬说：“当前数字PCR市场格局相对分散，国外厂商主要包括Bio-Rad、Thermo Fisher、Qiagen、Stilla等国际巨头，国内厂商主要有博瑞、新弈、领航、锐讯和迈克。”她认为目前国内外数字PCR技术水平差距并不大，从一体化数字PCR的研发进度来看，国内外几乎处于同一起跑线，甚至国内技术有望超越国外达到国际领先水平。关于数字PCR尚未在临床领域有重量级应用的问题，於林芬是这样认为的：“我认为主要原因有三点：一，早期数字PCR产品都是分体机，操作繁琐，不适合临床；二，早期数字PCR系统的重复性、稳定性以及可靠性上不够完美，影响了数字PCR的灵敏度和精密度；三，数字PCR的使用成本比荧光定量PCR高一个数量级，用户接受度低。”如果数字PCR可以同时做到操作简单、结果可靠、价格便宜，其应用市场将会非常广阔。於林芬认为未来数字PCR的市场机会主要有以下几个方面：临床诊断、生物制药和农业等。“数字PCR作为一种高精度、高灵敏度的基因分析技术，将在精准医疗领域发挥重要作用。数字PCR在临床诊断中的应用正在快速扩展，包括肿瘤标志物检测、遗传病诊断、微生物检测等。随着技术不断进步并通过临床验证后，数字PCR有望成为临床诊断的重要工具。除此之外，数字PCR在生物制药领域还可用于检测基因表达、病毒感染和基因编辑等过程中的质量控制，确保生物制品的一致性和安全性。在农业和环境监测领域，数字PCR可用于农作物品种检测、转基因检测、病原微生物监测等，为农业生产和环境保护提供可靠的数据支持。” 於林芬表示，在众多细分领域，如基因表达差异研究、拷贝数变异(CNV)研究、低丰度DNA模板分子的精确定量、甲基化含量鉴定、二代测序辅助建库、肿瘤治疗的伴随诊断和实时监控等，数字PCR的用途也十分广泛。打造优质数字PCR一体机，开启“博瑞+”模式於林芬表示，数字PCR作为一个技术门槛非常高的技术，不仅需要综合材料、化学、物理、电子、生物、软件、机械等各个方面的人才，而且还要突破仪器和芯片稳定量产的工艺难题，把仪器或芯片做出来不难，难的是做好。“大部分的数字PCR公司需要经过5-6年的技术积累才能够做出一款成熟稳定的产品。在数字PCR这个赛道上，需要所有的数字PCR厂家共同去推动数字PCR在临床上的应用，数字PCR已进入一体机时代，我们能够在此时及时推出一款性能稳定的DropXpert S6一体机是非常有意义并可以为数字PCR的临床应用做出贡献。”努力打造优质产品是投资方对博瑞生物的要求，也是博瑞生物对自己的要求。在谈到核心竞争力的时候，於林芬表示：“我们最终的核心竞争力由产品的质量和价格决定。我们会继续打磨DropXpert S6，让它成为我们公司的精品。我们也会不断地升级我们的产品，开拓更多的应用。”采访的最后，於林芬表示博瑞生物将采用“博瑞＋”的模式打造开放的数字PCR平台，为工业、科研、临床用户提供以数字PCR为中心的分子检测服务体系，与合作伙伴们在“科技＋产品＋服务”方面紧密合作，一起推动数字PCR在生命医学领域的应用。

结直肠癌（colorectal cancer，CRC）是最常见的严重危害人类健康的恶性消化道肿瘤之一，在世界范围内有很高的发病率和死亡率，根据世界卫生组织国际癌症研究机构（IARC）发布的2020年全球最新癌症负担数据显示，2020年我国结直肠癌新发56万，占所有新发肿瘤的12.2%；死亡数29万，占所有死亡肿瘤的9.5%。 ▲结直肠癌发病人数排名第二 随着人们生活水平的提高以及生活方式的改变，尤其是膳食结构的改变，结直肠癌的发病率日渐提高，严重危害我国居民的健康。 01 肠癌越早干预，获益越大 一般来说，结直肠癌发展需要10-15年时间，我们可以在它癌变前通过早筛来实现有充足的时间发现和治愈。 然而，60～70%的患者在被诊断时发现为中晚期结肠癌，而只有大约10%的患者被发现为早期。美国预防服务工作组（USPSTF）的统计数据显示，如果健康人每年进行定期筛查，可以避免约60%的CRC死亡，平均5年生存率可从46%增加到73%。因此，一种有效的结直肠癌早期筛查方法可以提高5年生存率，从而降低死亡率。  ▲结直肠癌早期干预生存率高 结直肠癌的预后与诊断分期紧密相关，筛查和早诊早治对于提高患者生存率具有重要意义。随着科技的进步，除了便潜血、肛门指检、结肠镜等传统结直肠癌筛查方式外，还有新型的检测方法——人类肠癌基因甲基化检测，就是一项无创结直肠癌筛查技术。 02 甲基化检测技术优势 精准：无检测盲区，特异性达95.9%，早期敏感性达76.6%；早诊：提前发现癌前病变和早期肠癌；无创：无需肠道准备，仅需抽血。 因此基因甲基化检测可以作为肿瘤早期筛查的标记物以及预后评估指标，在临床肠癌筛查中具有巨大潜力。 03 博瑞生物甲基化检测，助力肠癌早筛 深圳博瑞生物提供围绕一体化数字PCR集设备、试剂及配套耗材的解决方案和产品，积极推动结直肠癌的早期筛查。  博瑞生物一体化数字PCR仪 DropXpert S6 博瑞生物数字PCR仪操作流程简便，结果精准且高效，提高“早发现”的能力。将数字PCR应用于基因的甲基化检测，可以大大提高检测的灵敏度和特异性并实现绝对定量。  博瑞生物DropXpert S6操作流程 04 血液基因甲基化检测，让肠癌早筛更精准 博瑞生物人Spetin9、SDC2、SFRP2甲基化检测试剂盒是一款基于一体化数字PCR的快速检测试剂盒。该试剂盒通过三个基因位点甲基化的检测，结合数字PCR定量的准确性，进而用于结直肠癌的早期筛查。  博瑞生物人Spetin9、SDC2、SFRP2甲基化检测试剂盒 结直肠癌早筛对于提高患者的存活率至关重要，数字PCR技术检测相关基因甲基化具有定量准、灵敏度高、重复性好的优势，博瑞生物结合自身技术优点开发出的人Septin9/SDC2/SFRP2位点的甲基化试剂盒，初步验证结果良好，能够为结直肠癌的肿瘤早筛提供新的解决方案。 05 重视结直肠癌的预防 《中国结直肠癌预防共识意见》提到，66%-78%的CRC可以通过以下几点来避免：● 调整饮食习惯● 改变生活习惯● 定期筛查，积极治疗癌前病变 博瑞生物作为数字PCR领域的领军企业，征途不止于肠癌这一个目标，始终秉承“用科技的力量，睿见生命的质量”的理念，向更多癌症的早筛领域孜孜不倦地探索前行，致力于肿瘤筛查创新科技的研发，助力癌症的早发现、早诊断、早治疗。