出差路上，收到杨博士微信，问我周五晚上是否有空，流式大咖层浪生物老板刘总来郑州了，是位大牛，有必要见一下，应该能碰撞出火花。杨博士组局，肯定要捧场啊，于是给妻子请个假，准时赴约。层浪生物刘总早就听杨博士提过，也是他投资的一家公司，之前发过电子版彩页，有做流式的客户可以推荐一下。虽然杨博士一再介绍层浪刘总是大牛，清华本硕连读，在医疗巨头M公司工作过，是全国第一批做流式的，在流式行业深耕十几年，流式行业的专家，但那时候的确没太上心，也只是有客户主动要时才牵个线，因为看了彩页发现主要是流式设备，试剂项目少，那时候对流式行业也不熟悉。直到这次和刘总见面深入交流，才对刘总有了更深入的了解，的确是大牛，称流式届的雷军也不为过，同时也对流式行业有了更深入的了解，也敬佩杨博士的投资眼光，看人看项目都很准。 在座的好几位都是正在创业路上的创业者，话题自然就聊到创业，几杯酒下肚，刘总的话匣子也打开了，回忆起了自己20年的流式历程。刘总是80后，清华机械工程系，无损检测技术本硕连读，大四开始就搞过“血球计数器”，用于清华研制的当时最先进的核反应堆，和流式细胞仪的微球计数一脉相承，也算是冥冥之中与流式结缘。毕业之后进入了M公司北京研究院做研发，两年多血球，五年多流式，后来公司战略调整，砍掉流式产品线，那时候刘总刚刚三十出头，正是干事业的年龄，却遭受如此打击，很是不甘，在离职感言时作诗一首，其中一句“美哉乐哉，出自我手，壮哉雄哉，市场我有”，前半句是工程师思维，后半句就有老板的思维了，也有了创业的苗头。毕竟已经做了5年流式系统设计，整个流式设备都熟悉，也对流式行业很热爱，肯定想继续做流式，离开M公司之后，那时国流式公司很少，只能创业了。2016年时医疗投资市场很好，就有人投钱支持刘总创业继续做流式，刘总就联合几位好友开始了创业，那时候年轻，还是纯洁的工程师思维，觉得能继续做流式就很开心了，没有想太多，也为接下来的失败埋下了伏笔。三个年轻人雄心壮志激情澎湃，要做中国流式第一品牌，没日没夜的搞产品，一年多时间就把产品做出来了，投资人投的几百万也基本上花完了。开始参加各种展会卖产品，第一次做销售，业绩可想而知，很惨淡，那时候流式在临床市场还很一般，他们只有设备没试剂。天使投资人战略调整，不愿意继续投钱了，刘总开始搞融资，想着钱到位就可以招聘营销团队，可以加大研发，可以扩大生产，做大做强，很理想化，按照理论公式创业。也见了很多资本，资本一看团队背景不豪华，有仪器没试剂，有研发无市场，前面的投资人给的估值很低，投资额不大却占股30%，后面升值空间有限，相当于给第一家投资人打工，都不愿意投。公司处于破产边缘，之前都是拿投资人钱给自己发工资，现在需要从家里拿钱给员工发工资，心理上要迈很大一道坎，大家开始有压力，对未来也开始恐慌，对发展也有了不同意见。刘总也心力交瘁想卖掉公司，但是卖来卖去也找不到合适买家。有医疗巨头想涉足流式，觉得买公司不如高薪挖刘总，但那时候开着流式公司有竞业协议，又不能打工，真是进退两难，陷入人生至暗时刻。聊到人生至暗时刻，刘总喝杯酒平复一下心情，不禁眼眶湿润，朗诵了当时作的一首诗，记录那时的心情，“回首往事意如何，创业艰辛苦乐多。山高水远脚下路，岁月光阴掌中磨。踏破崎岖迷雾在，激昂总伴意蹉跎。惊慌恐惧寻常事，喜乐悲愁等闲过。不忘初心得始终，不畏将来得善果。北风摧折枯叶落，梅花怒放更婀娜!”（庆幸刘总没被挖走，否则哪有小编今天在这儿）读完诗，在座的都为刘总的才华鼓掌，也敬佩刘总的过去，一起干杯，一杯敬过往，一杯敬现在，一杯敬未来。即使在人生至暗时刻，刘总也倔强的不认输，咬紧牙关的坚持。既然没人投没人买，指望别人拯救，不如放手一搏，刘总拿出自己的积蓄交房租，发工资，也赢得了团队的信任。为了生存，只要能挣钱的活都接，开始与整个流式行业合作，提供技术和服务，也给高校科研机构合作设备开发。从工程师思维转变为客户思维，客户需要什么就提供什么，很纯粹的为客户服务，用十足的诚意打动客户，也第一次领悟了“心诚则灵”四个字，经过努力，慢慢活下来了。同时，在人生至暗时刻悟到了很多，提升了商业思维和战略执行能力。对于很多技术背景的工程师创业者而言，毕业就有优渥的工作环境，一身象牙塔的经历，要建立商业思维并不容易。所以融资不顺对创业者而言不见得是坏事，不靠融资自己挣脱出来的才能完成商业思维蜕变。所谓商业思维，要抛弃理想主义而采取现实主义。既包括简单的“赚钱盈利”意识，也包括为达商业目的格局开放、灵活变通，与商业伙伴们“合纵连横、战略合作”，与事业伙伴们“精诚协作，共同成就”。在这个过程中刘总深刻理解了“卓越、奋斗、协作、共赢”的含义，要努力奋斗、要突破自我，也要谦卑协作、利他成我，这也成了层浪生物的核心价值观。在和客户合作过程中，也深刻体会到了客户对高质量稳定可靠的仪器设备的需求，一心做产品，专注搞质量。对客户的新需求积极响应，不断完善，持续赢得客户信任。2020年重新创业，创办北京层浪生物。有了客户思维和商业思维，层浪生物发展很快，推出了国产品牌首台“2光8色”流式细胞仪，同时赋能整个行业，提供技术和服务帮助行业伙伴实现自有品牌和商业梦想，短短几年就从零做到了几千万销售额，已经能盈利了，考虑到公司要进一步发展，要投入大量资金搞研发，就引入资本，有了第一次的经验，这次引入资本就设计的相对合理。有了资本助力，产品开发速度更快，又推出了国产品牌首台“3光14色”流式细胞仪和流式荧光解决方案，精雕细琢的产品经得起考验，客户经过严格测试，发现性能完全媲美进口，纷纷采购，进口流式细胞仪厂家也主动上门合作，终于苦尽甘来，公司步入正规发展道路。听完刘总的故事，在座的都很受激励，更加坚定了创业道路。我提议为流式老兵干杯，预祝层浪生物更上一层楼。刘总说，流式老兵显得太矫情，太悲壮，他称自己为流式盗火者，源自希腊神话普罗米修斯，他从太阳神阿波罗那里盗走火种送给人类，给人类带来了光明。他也立志用自己的努力，把高端的流式技术普及化，创建多彩世界，守护美丽生命，这也是层浪的企业使命。为“流式盗火者”干杯刘总的精彩故事也令我感受颇深，每个成功人士背后都有一段甚至几段漫长的黑暗时刻，熬过去就会见到光明，在黑暗中也见识到了人性的黑暗，令创业者身心疲惫甚至崩溃，需要创业者强大的内心，最终的成功者一定是有使命感的，是真的愿意为这个世界做出贡献的。如今IVD行业也处于黑暗时刻，我依然艰辛未来一定是充满光明的，光明的方向就是客户的真实需求，做出真正满足临床需求的产品，能真的解决临床痛点。 小编独家：老板照片大放送

 流式细胞术做为一种快速的细胞定量分析技术，能够同时对单个细胞进行多种特征参数的检测，如细胞大小、DNA含量、蛋白质表达等，现已成为科研领域中不可或缺的重要工具。而流式检测能顺利进行的硬要求之一是，样本必须能在鞘液中流动，因此，无论是培养的细胞，还是从各种组织中提取出来的细胞，都需要把待测样本制备成单细胞悬液！制备欠妥的样本，不仅会直接影响实验的准确性和结果的可靠性，一些大的细胞团块甚至会堵塞液流系统而影响仪器的正常运行。层浪技术宝典第二期，为更好地掌握流式检测的样本制备环节，给大家带来了小鼠淋巴组织单细胞悬液制备的全流程。希望你不管是实验“小白”还是有经验的研究者，都可以能从中受益，轻松搞定实验！    Phase.1 实验过程              1      取脾脏：    ①颈椎脱臼法处死小鼠（图A）；在解剖台上固定小鼠，从底端小心剪开小鼠整个腹部皮肤，暴露出小鼠腹膜（图B）；②剪开小鼠腹膜，暴露出脾脏，摘取，并充分去除上面的脂肪组织（图C、图D）；·③将取下的脾脏置于预冷的PBS中浸泡待用。2      研磨制备单细胞：    将脾脏置于在70μm筛网上，使用研磨棒轻柔碾碎脾脏组织，脾脏细胞和红细胞通过筛网过滤至PBS中；脾脏充分研磨之后，收集筛网下端溶液至50mL离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；3      裂解红细胞：    ①在离心后的细胞悬液中加入1mL ACK红细胞裂解液，重悬细胞，在室温裂解5min；②裂解结束后，加入5mL 含2% FCS的RPMI培养基终止裂解，涡旋混匀；4      过滤、洗涤：    通过70μm过滤网过滤，将过滤后的细胞悬液收集至离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；5      单细胞计数：    使用染色缓冲液重悬细胞调整细胞浓度至1*107/mL，吸取100μL细胞悬液至流式管中，准备染色。 注意事项：1.研磨力度尽量轻柔，避免造成过多机械性死亡的细胞；2.摘取脾脏后，尽可能移除黏连的脂肪组织，提高脾脏细胞的占比；3.建议使用新鲜配制的红细胞裂解液。      Phase.2 流式结果                        小鼠脾脏中Th17细胞检测分析：      ① 通过FSC-H/SSC-H圈出淋巴细胞主群（图A）；② 通过CD3圈出总的T细胞：CD3+（图B）；③ 通过CD4/CD8圈出杀伤性T细胞（TCL）：CD3+CD4-CD8+；辅助性T细胞（Th）：CD3+CD4+CD8-（图C）；④ 在Th细胞群中，进一步圈出Th17细胞：CD3+CD4+CD8-IL-17A+（图D）。

       9月12日，由清华大学生物医学测试中心共享仪器平台主办，北京层浪生物科技有限公司承办的FongCyte™流式细胞仪技术讲座圆满落幕。本次培训采取预报名形式，内容涵盖理论讲座与上机演示两部分。无论是在前期报名阶段，还是培训进行期间，都收获了流式领域学者的广泛支持。接下来，让我们对本次培训活动进行简要总结：        理论讲座共享仪器平台介绍开场由清华大学生物医学测试中心副主任、共享仪器平台负责人冯倩倩老师进行致辞。冯老师以其深厚的专业底蕴和前瞻视野，对共享仪器平台的组织架构、开放设备分类、应用及服务项目等内容进行了详细地阐述，为流式技术在这片学术沃土中的深入传播与应用播下了火种。由此，与会人员不仅对共享仪器平台的功能和资源有了更全面的认识，更感受到了其对于后续高效展开科研工作的强大助力。向下滑动查看                                    流式细胞术基础原理FongCyte™流式细胞仪功能详解紧接着，层浪生物的技术支持与技术经理分别就《流式细胞术基础原理》与《FongCyte™流式细胞仪功能详解》两大核心议题，进行了深入浅出的讲解。她们凭借丰富的流式实践经验，不仅为听众解答了诸多疑惑，更为下午即将展开的上机实操环节奠定了坚实的理论基础：向下滑动查看                                            上机演示上机演示环节中，在层浪生物技术支持的指导下，参会者进行了《人外周血淋巴细胞亚群11色实验和4色亚群练习》、《细胞周期实验和分析》、《细胞凋亡实验和分析》三项核心实验实操。切身感受到层浪FongCyte™的诸多优势：操作便捷好上手、分析数据快准狠、仪器智能省心省时……赞叹声不绝，收获了在场人员的一致好评：                

     Phase.1 实验过程              1      取淋巴结：    ① 颈椎脱臼法处死小鼠（图A）；在解剖台上固定小鼠，从底端四肢剪开皮肤，小心剪开小鼠整个腹部皮肤，暴露出小鼠腹膜（图B）；·        ·② 小鼠淋巴结主要分布在：腹股沟左右两侧（图C）、腋窝（上箭头）和肱（下箭头）淋巴结的位置（图D）；下颌骨（上方箭头）、腋窝（中间箭头）和臂部（底部箭头）淋巴结的位置（图E）；左侧淋巴结位置在图示箭头处（图F），摘取下来淋巴结如图G所示；③ 将取下的淋巴结置于预冷的PBS中浸泡待用；2      研磨制备单细胞：    将淋巴结置于在70μm筛网上，使用研磨棒轻柔碾碎，淋巴结细胞通过筛网过滤至PBS中；淋巴结充分研磨之后，收集筛网下端溶液至50mL 离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；3      过滤、洗涤：    通过70μm过滤网过滤，将过滤后的细胞悬液收集至离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；4      单细胞计数：    使用染色缓冲液重悬细胞调整细胞浓度至1*107/mL，吸取100μL细胞悬液至流式管中，准备染色。 注意事项：1.研磨力度尽量轻柔，避免造成过多机械性死亡的细胞；2.摘取淋巴结后，尽可能移除黏连的脂肪组织，提高淋巴结细胞的占比。      Phase.2 流式结果                        小鼠淋巴结中Tfh细胞检测分析：      ①通过FSC-A/SSC-A圈出淋巴细胞主群（图A.R1）；②用FCS-A/FCS-H去除粘连体信号，分析单细胞（图A.R2）③圈出活性的T细胞：LD/B220-CD3+（图A.R3 ），在T细胞中圈出CD3+CD4+的细胞群（图A.R4）；④通过共表达高水平的CXCR5和PD1来鉴定Tfh细胞（图B）；⑤Tfh细胞高表达CD44和CXCR5（图C.左），并且转录因子Bcl6高表达（图C.右）。            Phase.1 实验过程                  1      取胸腺：      ① 颈椎脱臼法处死小鼠，在解剖台上固定小鼠（图A）；小心剪开小鼠整个腹部皮肤，暴露出小鼠腹膜（图B）；·        ·          ·② 切除腹壁；小心地切开隔膜（如箭头所示），而不损伤血管、肝脏或胆囊（图C）；③ 在不损害血管、肝脏、肺或心脏的情况下切除胸腔，暴露胸腺；胸腺用箭头标记（图D）；④ 将胸腺置于预冷的PBS中浸泡待用；2          研磨制备单细胞：          将胸腺置于在70μm筛网上，使用研磨棒轻柔碾碎，胸腺细胞通过筛网过滤至PBS中；胸腺充分研磨之后，收集筛网下端溶液至50mL 离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；3          过滤、洗涤：          通过70μm过滤网过滤，将过滤后的细胞悬液收集至离心管中，在4℃条件下，300g离心5min，去除上清液；4          单细胞计数：          使用染色缓冲液重悬细胞调整细胞浓度至1*107/mL，吸取100μL细胞悬液至流式管中，准备染色。注意事项：1.研磨力度尽量轻柔，避免造成过多机械性死亡的细胞；2.摘取胸腺后，尽可能移除黏连的脂肪组织，提高胸腺细胞的占比；3.摘取过程中，避免手术器械破坏胸腺附近的血管；若胸腺上有大量血液残留，可用PBS冲洗1-2次后再进行单细胞悬液制备。      Phase.2 流式结果                        小鼠胸腺中Treg细胞检测分析：      ①通过FSC/SSC特性圈出淋巴细胞（G0）(图A)；②在淋巴细胞群（G0）中，通过FSC-A/FSC-H(图B)和SSC-A/SSC-W（图C）排除粘连体；使用死活染料圈出活细胞群体（G3）（图D）；③在活细胞中，圈出CD4+CD8-细胞群（图E.G4）；随后展示FOXP3和CD25表达情况，区分两群Treg前体细胞（图F.G5&G6）和Treg细胞（图F.G7）；④胸腺Treg细胞可分为CD24highCD69+的未成熟细胞（图G.G9）；和CD24dim/lowCD69-的成熟细胞（图G.G8）；⑤CD4SP细胞也可分为CD24highCD69+的未成熟细胞（图H.G10）和CD24dim/lowCD69-的成熟细胞（图H.G11）。

           Autumn        层浪市场活动        科学仪器|发育生物|细胞器|神经科学|医药产业 SNAPSHOT        夏末秋初之际，层浪生物踏上了一段充满探索与交流的旅程，我们携手众多合作伙伴，共赴多场不同领域的行业盛会。通过这些活动，我们不仅加深了与现有客户的联系，还成功吸引了众多行业伙伴的目光，为公司的未来发展奠定了坚实的基础 。接下来，让我们一同回顾这些精彩纷呈的展会点滴：深圳            华南科学仪器联盟大学堂                8月23日，第17期华南科学仪器联盟大学堂成功举办，历经16期的经验累积，已然奠定其在科研仪器展示与行业交流领域的标杆地位。在这个集展示、交流、合作于一体的平台，层浪生物亮相其中，以专业形象与前沿仪器产品展现其深耕行业的专注和执着。我们与渠道伙伴、终端用户面对面深度互动，提供精准技术解答与实操演示，深化大家对产品性能的了解和信任。  郑州全国发育生物学大会                       8月30日-9月2日，为促进我国发育生物学领域科研人员之间的交流与合作，展示我国发育生物学研究的尖端成果和重要进展，由郑州大学（天健先进生物医学实验室）、中国细胞生物学学会、中国动物学会、中国遗传学会共同主办，郑州大学第三附属医院承办的“第七届全国发育生物学大会”正式召开。层浪生物在展台一隅，聆听专家们的精彩专题报告、前沿的论文分享，同往来参会人员积极接触，收获颇丰。恩施            中国细胞生物学学会                              9月1日-5日，第三届中国细胞生物学学会细胞器生物学分会学术研讨会在湖北恩施召开，由中国细胞生物学学会细胞器生物学分会与华中科技大学、华中师范大学和湖北民族大学联合举办。该会分为六大部分，吸引了众多国内外细胞器生物学领域的杰出学者，是该细分领域的重要交流平台。层浪生物受邀参与其中，通过专业展示和深入交流，受到了现场参会嘉宾的广泛关注和一致好评。  大连国际神经科学论坛                                               9月6日-7日，第十一届大连国际神经科学论坛在大连医科大学召开，共设三个核心主题，分别围绕突触结构与环路功能、脑发育与脑疾病、以及前沿技术与行为调控展开。层浪生物携科研型流式细胞仪FongCyte™精彩亮相，与众多专家学者齐聚一堂，共同深度探讨神经生物学的前沿研究成果与未来发展方向，促进企业与神经科学领域专家的密切合作，推动脑科学研究的持续发展。合肥            生物医药创新与产业大会                                              9月6日-7日，第二届合肥生物医药创新与产业大会（2nd Hefei BIIC）成功举办。大会聚焦生物医药前沿，围绕抗体药物、细胞治疗药物、基因治疗药物、核酸药物和新型疫苗等创新药物研究、开发与产业化的热点和难点问题，积极开展学术交流、资本对话和产业合作。与会期间，层浪生物与众多参会人员共话行业与领域发展，携手探索创新药物研发的无限可能，共同推动生物医药产业的蓬勃前行。                          

随着八月的微风轻拂，层浪生物迎来了一场在静谧中积蓄力量的旅程，旨在为销售与技术团队铺设一条通往专业和卓越的道路，同时深化我们对公司文化的共同认知。01文化共鸣 产品深解培训一开始，随着创始人的娓娓道来，我们共同回溯了层浪生物发展历程中的数个关键转折点，还了解了企业从诞生到壮大的完整脉络，以及企业价值观体现的初心和追求。这过程加深了员工对公司文化的认同和理解。而后，市场部等人对流式产品和市场潜力的介绍激发了团队关于市场动态和趋势的热烈讨论，加深了大家对公司产品的全面深入了解。文化共鸣和产品理解双重深化，将每位员工紧密联系在一起，为实现同一愿景而努力。02专业提升 精准前行如果将销售比作航行中的领航员，技术支持就是经验丰富的舵手，双方密切配合，共同负责将产品顺利交接到客户手中。在此次培训中，一方面通过剖析销售过程管理和细化销售技巧，提升了销售团队的综合能力，使大家能够更加精准地洞察客户需求，在沟通中体现层浪生物的专业性和价值传递；另一方面，通过对各类案例的深入分析，也进一步提升和精炼了技术支持的专业能力。在激烈的角色实战对抗环节中，通过抽签分组，销售与技术通力合作，体验了过程演练和话术演练，为价值销售奠定了坚实的基础。层浪细流，汇聚成海为期三天的培训就此圆满收官，这是一场关于卓越、奋斗、协作、共赢的静水流深。层浪生物愿邀您一同见证，这份静谧中的力量，是如何层波叠浪，汇聚成声势煊赫的汪洋。

近日，层浪科研型流式细胞仪FongCyteTM在清华大学生物医学测试中心共享仪器平台已完成新机装机和调试工作🎊，并于7月10日正式开放运行，试运行期间免收机时费，诚邀各位前来体验！试运行⭐免收机时费时间2024年7月10日开放试运行地点清华大学医学科学楼B1024联系吴老师 010-62781860⚠️试运行截止日期请依据共享仪器平台通知设备亮点速览点击标题查看仪器详情：《科研型FongCyteTM流式细胞仪》关于平台生物医学测试中心共享仪器平台，是清华大学生命科学联合中心资助的综合型平台，由生物医学测试中心统一管理。立足清华面向社会，为生物医学研究提供科学、规范、优质的技术支撑与测试服务。按照仪器设备的功能和服务方向，又分为光学显微镜机组、流式细胞仪机组、小型共享仪器机组和shRNA文库机组。未来，平台也将继续引进高精尖设备，最大限度地整合科研综合资源及力量，以满足广大实验室的科研需求。

六月，夏风轻拂，阳光遍撒层浪生物也如同这初夏的风一般悄然却又热烈地展开了一系列市场活动San DiegoBIO20246月3日-6日（美国西部时间），层浪生物参与了全球生物技术领域备受瞩目的盛会——美国生物技术大会暨展览会（BIO International Convention）。此次大会，层浪与全球各地的顶尖生物技术企业以及各业界精英进行了深入交流与探讨，积极开拓海外市场，寻求更多商务合作的机会。  上海FCMClub 6月22日，由流式家主办、复旦大学人类表型组研究院细胞表型平台协办的流式交流会在上海浦东召开。在会议中，层浪生物的工作人员就流式基础知识和层浪流式仪器两大板块进行了细致深入地宣讲介绍，为推动国产流式技术的持续进步抛出一块引玉之砖。期待着与各位同行共同学习、共同进步，共同推动流式技术的创新发展。北京青年免疫沙龙6月25日，层浪生物赞助北大医学部成功举办了青年免疫沙龙。在此次活动中，舒绍坤研究员与多位老师围绕《肿瘤新靶点筛选》这一主题进行了深入且富有建设性的探讨和交流。热烈的学术氛围不仅在沙龙期间持续高涨，甚至在会议结束后依然延续。为了进一步支持我国的医学学术研究，层浪工作人员还特别为各位老师介绍了层浪流式的基础知识和使用技巧，助力我国顶尖医学学府更好地开展科研探索。

Phase.1 局限  免疫细胞亚群检测面临窘境  人体免疫系统在抵御外来侵害，监视异常细胞，维持机体内环境稳定中扮演着至关重要的角色。基于这一核心功能，免疫细胞亚群检测在评估机体免疫状态，辅助筛查和评价多种良恶性疾病及其并发症，以及健康管理等方面，也都发挥着不可或缺的作用。多参数流式细胞术（multi-parameter flow cytometry，MFC）是免疫细胞亚群检测，评估免疫功能的关键技术。然而，随着近年来临床对疾病监测需求的增加，传统的TBNK检测——仅检测T、B、NK细胞的比例和绝对数，由于检测细胞群体少，功能评估简单，所能反映的免疫细胞信息并不全面，其临床应用的实际效果与预期相差甚远。Phase.2 破局精细化分析免疫细胞亚群共识发布为了应对这一挑战，2023年发布了《基于多参数流式细胞术精细化分析外周血免疫细胞亚群的中国专家共识》【1】（以下简称“共识”），为免疫细胞功能检测领域带来了重大的概念更新和扩展：共识建议将原先的T、B、NK淋巴细胞、单核/巨噬细胞、粒细胞等常见免疫细胞，以及使用不同标志物组合进一步检测的特征性和功能性常见基础细胞亚群重新定义为“外周血基础免疫细胞亚群”；【2】同时，建议在传统TBNK免疫细胞亚群的基础上，增加调节性T细胞（Treg）、树突状细胞（DC）等各类免疫细胞，以及检测其分化发育、功能性和活化状态相关标志物，并进一步分类出来的免疫细胞亚群，定义为“精细化分析外周血免疫细胞亚群”。【3-5】多参数精细化分析免疫细胞亚群为临床检测增加了更多参数，获得了更多细胞亚群的信息，在淋巴瘤、肿瘤前驱病变筛查，部分遗传和免疫缺陷性疾病诊断，良恶性疾病的发生、发展及预后评估，免疫治疗和造血干细胞抑制免疫重建中，均发挥了极其重要的作用。Phase.3 前行层浪流式&精细化免疫细胞亚群8色方案共识9【1】提出，精细化分析免疫细胞亚群建议由8色MFC管完成，其精细化程度与方案根据临床应用需求选择。可以采用多管8色及以上方案或一管超多色方案，精细化亚群比例分别为占上一层亚群的比例。我们依照共识建议的8色多管组合方案中的方案1（表2），使用层浪LongCyteTM临床型流式细胞仪进行了精细化免疫细胞亚群8色分析，结果如下：1T细胞管设门策略：依次设置单个细胞门（single），活细胞门（live），live门内设置T细胞（T cell）门。T cell门内设置CD4+T（T4）、CD8+T（T8）、CD4+CD8+T细胞（DP）细胞门。T、T4、T8细胞中分别CD28+、CD28-细胞群。T、T4、T8、DP中分别设置HLA-DR+CD38-（DR+38-）、HLA-DR-CD38+（DR-38+）、HLA-DR+CD38+（DR+38+）、HLA-DR-CD38-（DR-38-）细胞群。T8中设置初始 T 细胞（TN ）、中央记忆T 细胞（TCM）、效应记忆T 细胞（TEM）、终末分化效应记忆T细胞（TEMRA）亚群。2Treg/Th细胞管设门策略：依次设置单个细胞门（single）、活细胞门（live）、T细胞门（T cell）、CD4+T细胞门（T4）、调节性T细胞门（Treg），T4、Treg中分析初始 T 细胞（TN ）、中央记忆T 细胞（TCM）、效应记忆T 细胞（TEM）、终末分化效应记忆T细胞（TEMRA）。T4、TCM、TEM中进一步分析辅助性T细胞（Th）亚群。3DC/单核/NK管设门策略：依次设置单个细胞门（single）、活细胞门（live）、T细胞门（T cell）、αβT细胞门（αβT）、γδT细胞门（γδT）、NK细胞门，αβT细胞中设置CD8+T细胞（αβT T8）和TRBC1+细胞门（αβT  TRBC1+），γδT细胞中设置TCR Vδ2阳性细胞门（γδT Vδ2）。分析上述各群细胞的CD57+、CD279+、CD57+CD279+细胞群，分析γδT和TCRVδ2细胞的CD56+、CD56+CD57+细胞群。4TCR管设门策略：依次设置单个细胞门（single）、活细胞门（live）、单个核细胞门（PBMC）、非T非B细胞门（CD3-CD19-），非T非B细胞门内设置NK、单核细胞（monocyte）、系别阴性（lin-）细胞门，NK细胞门内设置CD56和CD16组合表达亚群，单核细胞门内设置经典单核细胞（Mo1）、中间单核细胞（Mo2）、非经典单核细胞（Mo3）亚群，lin-细胞门内设置树突状细胞门（DC），DC内区分浆样树突状细胞（pDC）和髓样树突状细胞（mDC）。5B细胞管设门策略：依次设置单个细胞门（single）、活细胞门（live）、单个核细胞门（PBMC）、B 细胞门（B cell）、浆细胞（plasma cell）门 ，B细胞门内设置 CD27-B 细胞门、记忆性B细胞门（memory B）、CD5+B细胞门，分析B和CD5+B 细胞门内kappa、lambda表达，CD27-B细胞内分析初始B前细胞（pre naiveB）和过渡阶段B细胞（transitional B），memory B中分析浆母细胞 （plasmablast）。使用仪器层浪生物LongCyteTM3光14色流式细胞仪  参考文献：【1】基于多参数流式细胞术精细化分析外周血免疫细胞亚群的中国专家共识.中华预防医学杂志 2023 年11 月第 57 卷第 11 期【2】中华人民共和国卫生部. WS/T 3602011流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南[S].北京:中国标准出版社,2011.【3】Paul F Ruhle,Rainer Fietkau,etal.Development of a Modular Assay for Detailed Immunophenotyping of Peripheral Human Whole Blood Samples by Multicolor Flow Cytometry.Int J Mol Sci.2016 Aug 11;17(8):1316.doi: 10.3390/ijms17081316.【4】Greg Finak,Marc Langweiler,etal.Standardizing immunophenotyping for the Human Immunology Project. Nat Rev Immunol.2012 Feb 17;12(3):191-200. doi: 10.1038/nri3158.【5】Oras A,Quirant Sanchez B,etal.Comprehensive flow cytometric reference intervals ofleukocyte subsets from six study centers across Europe.Clin Exp Immunol. 2020 Dec;202(3):363-378.doi: 10.1111/cei.13491.

6月14日，“第一届流式细胞仪技术（软硬件）与应用研讨会”在清华大学生物医学馆拉开帷幕。近百名来自众多知名科研院校和医疗机构的专家和科技人员参加了研讨会。14日上午，层浪生物创始人——刘铁夫也受邀参与其中，并就“流式细胞仪系统学习”展开了专题理论讲座。15-16日，层浪生物的工作人员还参加了特设的上机实操环节，使用FongCyteTM科研型流式细胞仪，展示了多色方案分群效果、仪器自动补偿功能等。流式细胞仪系统学习|刘铁夫流式系统的诞生“机电液光软，生医临法算”，流式系统的开发，离不开这十大专业构成。流式系统的构成光学系统前光、流动室、后光前光为激光器的光路，对激光器的光路电压进行整形，打到流动室中，流动室是所有信号的源头，在此发生散射后会进入后光系统，被分解成前向散射光FSC、侧向散射光SSC和其他一系列荧光信号。液路系统吸样测量、清洗维护电子系统信号检测系统、驱动监测系统、主控板、电源板软件系统嵌入式软件、工作站软件上机实操环节|层浪生物 上机环节，层浪工作人员使用科研型流式FongCyteTM3激光14色，进行了十一色人外周血淋巴细胞精细亚群分型实验，并用内置的自动补偿等特色功能，快速建立实验检测条件，引得众多老师驻足学习，其数据结果展示如下：

CYTO2024线上论坛中国流式新力量-6.8时逢端午，国产流式一众行业大佬相约《CYTO2024-中国流式新力量》线上论坛，于6.8上午在线上开展了热烈的探讨。层浪生物创始人刘铁夫也受邀参与其中，分享了他这些年的流式经验和观点看法。本条咨询记录了铁夫总的几个对话回复，与您分享。 人物介绍 国产流式的赶浪人刘铁夫刻苦钻研，深耕流式领域十余载层浪生物的创始人，于2008年开始流式技术的开发，曾参与组织过国内首台临床流式的系统设计工作。刻苦研发八余年，在2016年决心创业，深耕流式技术在国内的开拓与发展，迄今为止又八年，现为北京层浪生物科技有限公司的CEO。 对话记录 见出以知入，观往而知来Q：如何用一句话来形容层浪生物呢？A：层浪生物专注于流式领域，进行技术的钻研创新、仪器产品的设计开发及生产销售。在较早时间推出国产首台两光8色、三光及三光以上配置的流式仪器，并和国内一线的试剂公司、全球知名的药物企业达成了战略合作伙伴关系。我们希望自身可以走在国内流式技术的前沿，并为之努力着，希望在未来可以推出更多引领国内流式行业的先锋产品。Q：您是什么样的契机进入的流式领域，有什么故事可以分享下呢？A：我07年在清华硕士毕业后，从事了一年的汽车电子，08年加入迈瑞医疗，之后十数年，都一直在从事流式技术相关的研究开发。先是两年的血球仪开发工作，血球仪就是使用流式技术在特定场景下进行血常规检测，算是流式技术里一个专用机型。在此期间，还申请了许多以“流式细胞术”、“粒子分析仪”等为名的专利。正式做流式细胞仪是在2010年，10年9月立预研项；12年9月，设立产品项，开启正式的研发；又过了两年，在14年7月，上市了国内首台临床型流式细胞仪。我本人呢，是带队系统组进行了整机的需求分解、方案设计，以及后期的系统联调，确保了系统关键性能参数的实现，比如绝对计数、多倍体测量、减少测量中断等。Q：对于目前市场上，有二十多家国产流式公司的局面，您是如何看待的呢？A：我觉得是开放信息带来的一个必然结果。就是市场信息的一个开放、流通，带来了行业内人员的认知水平和资源的增长累积。就像任正非说的“反对自主创新”，那在我看来，其实是不要闭门造车，避免陷入一个低水平或者狭隘的状态；而应该去开放，利用所有的资源把事情做到最好，要在全球范围内去寻找最佳的资源配置，做好高水平的交流，才能促进整体的提升进步。Q：是否会经常遇到客户对国产品牌不放心的情况？那面对这样的情况又会如何去应对呢？A：和同等配置的国外品牌相比呢，国产品牌确实都比较新，也没有获得很广泛的市场认可。但我觉得这个是很正常的，任何一个品牌的发展都会经历这样的阶段，而口碑的建立都是要一步一步来的，所以国产品牌目前要做的就是稳住自己，做好产品、服务的提升，优化改进仪器的稳定性和可靠性，并且不断推陈出新，来满足客户那些没有被普罗市场重视、满足的一些需求。比如说，层浪的反应速度、与客户的交流反馈，以及对客户的重视程度都是我们的优势所在。当客户提出一些我们暂时还没有的新需求时，销售会直接反馈到研发这边，那我们就可以用很快的速度来做出响应，进行改进，然后去满足客户的需求。Q：参加全球流式盛宴CYTO，有什么感想呢？A：感觉就是全球流式行业一个大的技术研发party，在现场呢，聊销售的少，都是在聊技术。还见到了全球大厂一些资深的研发人员，以及分选那边很资深的前辈，在积极地做一些创新，采用了非常简洁的技术方案，很快速地搭出了一个分选设备，这个仪器里面甚至没有控制软件，而是直接通过pc端的分析来进行。国内最早进行流式研发的，可能就是像我一样，有着十四五年的经验，那国外呢，普遍都是四五十年起步，这其实也代表了国内和全球的技术人才差距。但非常乐观的是，我们国内的资深从业者，也已经积累了多年的经验，并且还处于一个中青年的上升阶段，可以给国产流式行业带来更高的价值，未来可期。Q：我们公司就国际化这个方向，目前有做哪些努力呢？A：我们肯定和大多数出海企业一样，走“农村包围城市”的一个路线，在发展中国家地区开始，往外铺开。众所周知，made in China已经畅销全球，那接下来就是R&D in China的发力时间了。国产流式的国际化，主要还看两方面，一个是国家品牌的壮大。另一个方面就是国产水平的不断提升，并且还是全行业的整体提升。国产大部分的从业者都在卷，我一直说的就是“卷出中国、卷向世界”，那这其实也是逐步产生世界品牌的一个过程。“世界走向中国、中国走向世界”，之前是世界资本走进中国的一个过程，比如流式的global五大公司，可能有三家都在中国有着研发中心和生产中心。这个趋势会极大地促进中国的人才培养和人才锻炼，为接下来中国走向世界打好一个技术基础。对于未来发展，刘总也有自己的规划。他说：“就我个人而言，也有个小目标，就是有朝一日，能够实现我们公司的愿景，成为世界一流的生物医学技术公司。但其实着眼于国内，能在国产流式公司中脱颖而出，这个目标就已经基本实现了”——END——

第十一届北京亦庄（京津冀）生物医药产业大会精彩回顾REVIEW//6.13-6.14，盛夏带来的炎炎热气，在北京亦庄生物医药园区升腾，化作人头攒动的热情现场气氛，第十一届北京亦庄（京津冀）生物医药产业大会在这样充满希望的画面中圆满落幕。层浪生物作为国产流式的中流砥柱，带着创新技术和先进仪器受邀参与其中，同生物医药各领域内中坚力量进行了友好的交流和思想的碰撞，收获颇丰。01展位亮点REVIEW🔽滑动查看更多照片为期两天的会议行程，层浪生物展台已然成为一道亮丽的风景线。全新升级的FongCyteTM科研型流式细胞仪，搭载561nm激光器，以其精巧的外观和优异的性能，赢得了众多与会人员的关注和赞赏。大家驻足于2F-A19展台，感受到了创新和科技的完美融合，见证了层浪生物不懈追求卓越的强大决心。02互动时刻REVIEW🔽滑动查看更多照片为了让更多参会者感受到我们的热情，层浪生物还特别策划了刮刮乐抽奖活动。现场与会人员热情参与其中，不仅收获了各式各样丰厚的礼品，还感受到了层浪亲切的服务意识和温暖的人文关怀。通过这样的方式，我们也有幸与大家建立了更深的联系，传递了来自层浪的诚挚祝福。03总结与展望REVIEW俯仰之间，第十一届生物医药产业大会已落下帷幕。正如本次大会主题“破局新时代，共创生物医药新篇章”所言，这不仅是层浪生物在业内的一次精彩亮相，更是我们秉持“卓越、奋斗、协作、共赢”核心价值观的又一个凭证。未来，层浪生物将以更加坚定的步伐，走出技术创新突破和产品升级拓展的新道路，为行业发展贡献更多力量。

层浪流式笔记的开篇，由《细胞周期的制备和检测》拉开序幕。不忘初心，方得始终。栏目全新启航，我们选择依然续写流式与细胞周期的故事。本期为大家带来的是：细胞周期的数据质量评估和常见应用场景。周期数据质量分析工欲善其事，必先利其器。漂亮的细胞周期数据离不开性能优异的仪器，因此，首先需要通过《中华人民共和国医药行业标准YY/T 0588-2017》[1]来评估流式细胞仪的性能。本文中使用BD的DNA质量控制试剂盒，对层浪流式细胞仪检测到的DNA数据进行质量评估。DNA质量控制试剂盒内容：🔶 小鸡红细胞核（CEN）：用于建立测试条件。CEN试剂经过特殊处理，内含单个核、双联体核、三联体核和更大的聚集体，用来检测仪器的线性度和分辨率。经PI染色后，由于细胞核聚集程度的不同，在PI的直方图中会出现至少4个峰，前4个峰分别代表单个核、双联体核、三联体核和四联体核。若染色正常，仪器线性度良好，则四个峰所在道数的平均比值接近1:2:3:4。🔶 小牛胸腺细胞核（CTN）：具有一个完整的细胞周期，且具有细胞周期的各个时期，大部分核处于G0/G1期，小部分处于S期和G2/M期。还可作为细胞周期统计分析的质控。🔶 2μm的荧光微球：作为一种稳定的非生物标准品来确认仪器的CV（细胞离散度），要求仪器CV＜2.3%。🔶核酸染料碘化丙啶（PI）图1：DNA QC试剂盒数据数据评估结果：01出现明显7峰，且检测CEN结果为（图1A）PK1:PK2:PK3:PK4:PK5:PK6:PK7 = 1.00:2.00:2.99:3.97:4.94:5.93:6.87 (≈1:2:3:4:5:6:7)。【行业要求CEN结果满足至少出现4个峰，且前四个峰的比值接近1:2:3:4】02CTN检测结果为周期拟合G2/G1=2.01（图1B）。【行业要求G2/M与G0/G1的平均荧光强度比值在1.95-2.05之间】032μm微球结果CV=1.75%（图1C）。【行业要求CV＜2.3%】综上可得，层浪流式细胞仪在DNA检测中表现良好，QC数据均远超行业标准，满足临床/科研实验需求，是流式分析细胞周期的卓越选择。细胞周期应用场景1、细胞系细胞系是周期实验研究常用的样本，如图2分别依次为A图：MCF-7乳腺癌细胞系、B图：MDA-MB-231乳腺癌细胞系、C图：HL-7702[L-02;LO2]肝细胞系。不同细胞系周期检测及拟合结果如下图所示：图2：常见细胞系自动周期拟合数据分析与解读1三种细胞系检测到的CVG1值分别为：MCF7-1.63%、231-2.09%、LO2-2.93%。【正常二倍体的CVG1应＜8%】注G0/G1峰的CV（CVG1）显著影响S期计算的准确性，然而在实际应用中，由于肿瘤样本会存在多个亚群，其CVG1值可能会偏高，影响结果。建议将CVG1＜8%的肿瘤样本用于有用的S期测定。2检测到的RCS（限制性立方样条回归，用来反映样本的拟合程度）分别为：3.55、2.78、3.70。【RCS＜3.0，表示拟合良好；RCS在3.0-5.0，被认为是基本拟合；RCS＞5.0，表明拟合匹配度差】2、生殖细胞在生殖相关研究中，生殖细胞不同时期百分比的变化一直是研究的重点。以C57BL/6小鼠精囊为例，可以检测到不同时期的细胞数量百分比：亚倍体（sub1N）细长精子细胞；单倍体（1N）圆形精子细胞；二倍体（2N）精原细胞；四倍体（4N）精原细胞G2M期。使用层浪流式细胞仪PI检测精细胞周期结果如图3所示：图3：C57BL/6小鼠精囊周期检测数据分析与解读亚倍体（sub1N）和单倍体（1N）百分比为64.66%、二倍体（2N）百分比为7.52%、四倍体（4N）的百分比为20.84%，与文献报道中正常C57BL/6生殖细胞占比一致。[2]3、植物细胞植物细胞的多倍化对于研究个体生长发育具有重要的生物学意义。流式细胞仪检测植物倍体具有简单、快速、准确、直观等优点，在植物学中有着越来越广泛的应用价值。模式生物拟南芥是植物倍体研究的经典角色，用层浪流式细胞仪对其叶片倍体进行检测和分析，得到图4结果：图4：拟南芥叶片周期检测数据分析与解读1PK1:PK2=1:1.9，接近1:2。注植物周期检测一般不用周期拟合软件拟合，根据标准品确定样本有单倍体、二倍体、四倍体，或者多倍体。植物可以检测的样本有：根、茎、叶、种子、花等。 总结：一键拟合功能示意层浪流式细胞仪对DNA QC试剂盒（CEN/CTN/微球）的各项检测结果均表现优异，表明仪器的性能不仅满足各类样本细胞周期检测的需求，其检测结果更是远优于行业检测标准的要求，特别是CEN检测，可以检测出多个峰值，且符合倍比关系。除此之外，层浪流式细胞仪分析软件ModelFlower内置细胞周期分析功能，可以对周期数据进行一键拟合，并有批量分析与批量数据导出的功能。注意事项Q:周期数据对于细胞收集量有什么要求？A:除去碎片之外，建议可供分析的目的细胞在1万以上，虽然细胞数据过大会影响到分析的速度，但不会对细胞各个时期的百分比检测产生影响，拟合效果反而更好，因此在条件允许的情况下，收集量多多益善。Q:周期拟合不准确可以自行调整吗？A:可以的。且自动拟合之后如不满意结果，也可以通过手动调整的方式，改变G1和G2门的位置，还可以批量应用到其他样本中以保持一致性。Q:周期检测可能会受到哪些因素的影响？A:首先，不同细胞系的拟合效果存在差异。其次，影响周期拟合效果的因素还有：试剂盒差异、细胞固定方式的影响、收集细胞量的差异、人为操作影响等。因此，为了尽量减少差异，操作标准要规范，最大程度上避免操作误差。参考文献[1]中华人民共和国医药行业标准YY/T 0588-2017,流式细胞仪.国家食品药品监督管理局.2017.[2]R.B. Struijk,1 C.M. De Winter-Korver,1 S, Simultaneous Purifification of Round and Elongated Spermatids from Testis Tissue Using a FACS-Based DNA Ploidy Assay，International Society for Advancement of Cytometry.

2024年5月4日至8日，第37届国际流式年会CYTO2024在英国爱丁堡盛大召开。现场涌现着科技创新的热情，充分彰显了流式细胞领域的蓬勃活力。层浪生物携自研产品和最新技术亮相07号展台。关于CYTO在全球细胞学研究领域，CYTO以其权威性和专业性，成为了连接科研创新和实践应用的桥梁。作为国际流式协会（International Society for Advancement of Cytometry）主办的年度盛会，CYTO2024以“研究、创新和发现”为主题，聚焦流式分析、分选、成像、纳米、单细胞分析、AI分析等技术最新突破和前沿研究。还汇聚了全球顶尖的科学家、研究机构和各大生物技术公司，共同探讨流式细胞学研究的最新进展和未来趋势。初次惊艳亮相，共话行业未来在这场流式技术盛宴中，层浪生物携自研产品FongCyte™3激光14色初次登场CYTO。在现场众多国际品牌中，层浪产品凭借其优异的产品性能、卓越技术和精致小巧的外观设计，不断吸引海内外流式业内专家和大咖的驻足关注，展位前人流络绎不绝。层浪团队人员与来自世界各地的业内专家、学者及企业代表等进行了一系列热烈而深入的交流。他们借鉴国际经验，讨论技术革新、研发动态及行业发展趋势。此次参会不仅提升了层浪生物的品牌影响力，加深了与全球同行的联系，更为其提供了一个深化全球化战略布局的国际平台。未来，层浪生物将持续探索流式细胞技术的创新，携手国际同行，共同推动生物技术领域的进步，开启生命科学新纪元。  浪花朵朵，点亮星辰大海！！     

  速报    ✚      ●○CGCS 2024（第五届）国际细胞与基因治疗中国峰会暨展览会，将于2024年5月22-24日，在南京扬子江国际会议中心召开。01展会介绍作为细胞基因治疗、核酸药以及类器官领域规格最高的年度会议，CGCS2024涵盖细胞基因治疗法规解读、细胞治疗临床&；研发&；生产、CAR-T商业化、新型细胞治疗开发（CAR-NK，TCR-T，TIL……）、AAV基因治疗、干细胞药物开发、类器官与3D细胞培养、溶瘤病毒开发、mRNA疗法、小核酸药物开发、肿瘤新抗原疫苗等最新最全内容。展会时间5月23日-24日展会地点南京扬子江国际会议中心02诚挚邀请层浪生物聚焦流式细胞领域，专注于IVD诊断仪器、试剂以及生物医疗科研仪器的研发、生产和销售，为全球近500家客户提供临床诊断、生物治疗、生物医药基础研究、药物研发、环境材料、食品毒性检测等解决方案。届时，层浪也将携产品、技术及各种精美礼品，在会场的B3-04展位恭候各位专家与学者的光临，我们南京见。——END——

    ——"浪花虽小，层层堆叠，亦能掀起滔天巨浪"于2016年开启层浪流式的正式研发，于2022年相继发布了国内首台三激光流式LongCyteTM（临床型）和FongCyteTM（科研型）。截止到2024年4月，近十年的技术沉淀搭载新兴企业平台，层浪流式细胞仪共助推了8篇国际期刊文章的发表，其中4篇IF值≥10，最高达15.82，展现出层浪流式受到非同凡响的国际权威认可，以及其如阪上走丸般的学术论文转化率。 论文集锦IF=15.82引用产品：FongCyteTM标题：Hepatic-Accumulated Obeticholic Acid and Atorvastatin Self-Assembled Nanocrystals Potentiate Ameliorative Effects in TreaUnravelling Immune-Inflammatory Responses and Lysosomal Adaptation: Insights from Two-Photon Excited Delayed Fluorescence Imagingtment of Metabolic-Associated Fatty Liver Disease期刊：Advanced Science时间：2024年3月11日领域：医学/消化系统疾病单位：吉林农业大学中药材学院；吉林大学医学院；华南理工大学生物医学科学与工程学院摘要：奥贝胆酸(OCA)是一种选择性法内甾体X受体激动剂，可改善多种肝脏疾病的损伤和炎症。但其临床应用仍然受溶解度差、生物利用度低和潜在副作用的限制。这篇文章创造了一种由OCA和降胆固醇的阿托伐他汀(AHT)组成的肝靶向纳米药物，其活性药物成分(API)含量理想，用于口服MAFLD的联合治疗。这种无载体纳米晶体(OCAHTs)是自组装的，不仅提高了胃肠道环境中的稳定性，而且通过胆汁酸转运蛋白介导的肠肝循环过程实现了肝脏蓄积。口服OCAHT在改善对乙酰氨基酚挑战小鼠和高脂肪诱导的MAFLD小鼠的肝损伤和炎症方面优于OCA和AHT的简单组合，且系统毒性较小。重要的是，OCAHT对MAFLD相关的分子通路具有深远的反向作用，包括损害脂质代谢、减少炎症和增强抗氧化反应。这项工作不仅为肝脏靶向药物递送提供了一种基于胆汁酸转运体的便捷策略，而且还提供了一种高效、安全的全API纳米晶体，从而促进了纳米药物针对MAFLD的实际转化。IF=14引用产品：FongCyteTM标题：Bioactive mesoporous silica nanoparticle-functionalized titanium implants with controllable antimicrobial peptide release potentiate the regulation of inflammation and osseointegration期刊：Biomaterials时间：2024年3月5日领域：生物医学工程单位：华南理工大学组织修复与重建国家工程研究中心；华南理工大广东省生物医学工程国家重点实验室摘要：细菌感染和骨整合延迟是钛基骨科植入物的两大挑战。在本研究中，我们通过将抗菌肽(AMP)负载的二硒化物桥接介孔二氧化硅纳米颗粒(MSNs)固定在表面，开发了一种功能化的钛植入物Ti-M@A,显示出良好的长期和机械稳定性。功能化植入物对4种临床细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和MRSA)的抑菌活性超过95.71%，这是由于其具有破坏细菌膜的能力。此外，Ti-M@A可以有效抑制细菌的生物膜形成。由于骨髓间充质干细胞(mBMSCs)中硒的存在，功能化的植入物还能显著促进小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSCs)的成骨分化。值得注意的是，它可以通过清除LPS激活的巨噬细胞中的ROS，在体外触发巨噬细胞走向M2极化。因此，感染和非感染骨缺损模型的体内试验表明，这种生物活性植入物不仅可以杀死超过98.82%的金黄色葡萄球菌，还可以促进骨整合，为解决钛植入物细菌感染和延迟骨整合提供了一种联合策略。IF=10.2引用产品：FongCyteTM标题：Self-polymerized platinum (II)-Polydopamine nanomedicines for photo-chemotherapy of bladder Cancer favoring antitumor immune responses期刊：Journal of Nanobiotechnolog时间：2023年7月22日领域：医学/肿瘤学单位：内蒙古人民医院泌尿外科；广东省生物医学工程重点实验室教育部生物医学材料与工程重点实验室华南理工大学摘要：由于铂类药物在晚期膀胱癌(BC)的肿瘤蓄积较低，且化疗药物释放不受控制，因此全身给药具有明显的局限性。迫切需要先进的策略来克服目前铂类药物化疗的局限性，以达到最大的治疗效果和减少副作用。在这项研究中，自聚合铂(Ⅱ)聚多巴胺纳米复合物(PtPDs)被专门用于BC的有效化学光免疫治疗。高Pt负载含量(11.3%)的PtPDs在还原性肿瘤微环境和近红外(NIR)光照射的联合作用下可降解，从而控制Pt离子的释放，实现高效化疗。此外，聚多巴胺促进了更强的光热效应，以补充铂类化疗。因此，PtPDs在体外和体内为MB49 BC提供了有效的化学光热治疗，增强了免疫原性细胞死亡(ICD)效应和强大的抗肿瘤免疫应答。当与PD-1检查点阻断联合使用时，基于PtPDs的光化学疗法引起全身免疫反应，完全抑制原发和远处肿瘤的生长，且不会诱导全身毒性。本篇文章为金属-多巴胺自聚合提供了一种高度通用的方法，用于金属基化疗药物的精确递送，并可能作为一种有前途的纳米药物，用于有效和安全的铂类BC化疗。标题：Unravelling Immune-Inflammatory Responses and Lysosomal Adaptation: Insights from Two-Photon Excited Delayed Fluorescence Imaging期刊：Advanced Healthcare Material时间：2024年2月26日领域：生物化学IF=10引用产品：LongCyteTM单位：生物活性物质与天然药物作用国家重点实验室；中国医学科学院药物研究所北京活性物质发现与可药用性评价重点实验室摘要：具有近红外(NIR)发射的双光子激发(TPE)显微镜已成为一种很有前途的深部组织光学成像技术。近年来，长寿命发射探针荧光寿命成像技术的发展进一步提高了荧光成像的空间分辨率和精度，特别是在具有短寿命背景信号的复杂系统中。在这项研究中，介绍了两种创新的溶酶体靶向探针，Cz-NA和tCz-NA。这些探针具有多种优势，包括TPE (λex =880 nm)，近红外发射(λem=650 nm)。热激活延迟荧光(TADF)寿命长(分别为1.05 μs和1.71 μs)。这些特点显著提高了深组织成像的分辨率和信噪比。通过将声光调制器(AOM)装置与TPE显微镜相结合，作者成功地将Cz-NA应用于双光子激发延迟荧光(TPEDF)成像中，以跟踪小鼠对炎症的溶酶体适应和免疫反应。这项研究揭示了溶酶体微管、先天免疫反应和体内炎症之间的关系，为未来开发无自发荧光的分子探针提供了有价值的见解。IF=9.7引用产品：FongCyteTM标题：Engineering a biomimetic system for hepatocyte-specific RNAi treatment of non-alcoholic fatty liver disease期刊：Acta Biomaterialia时间：2024年1月15日领域：医学/生物医学工程单位：南方医科大学第三附属医院广东省骨关节退行性疾病重点实验室骨科；华南理工大学组织修复与重建国家工程研究中心；华南理工大学医学院摘要：RNA干扰(RNAi)对难治性肝病具有巨大的潜力。然而，建立针对肝细胞的特异性、高效和安全的递送系统仍然是一个巨大的挑战。文章描述了一种很有前途的肝细胞靶向系统，通过将三触角N-乙酰半乳糖胺(GalNAc)工程细胞膜与可生物降解的介孔二氧化硅纳米颗粒相结合，高效、安全地将siRNA递送至肝细胞并沉默靶PCSK9基因表达，用于治疗非酒精性脂肪性肝病。在优化了GalNA工程策略、插入顺序和细胞膜来源后，我们获得了性能最佳的alNAc制剂，与基于阳离子脂质的GalNAc制剂相比，具有强大的肝细胞特异性内化，减少了Kupffer细胞捕获，从而实现了强大的基因沉默和更低的肝毒性。因此，通过在高脂肪饮食喂养的小鼠中全身施用靶向PCSK9的siRNA,实现了脂质积累和损伤的持久减少，同时显示出理想的安全性。总而言之，这种GalNAc工程仿生物代表了肝细胞特异性基因治疗和预防代谢疾病的多功能、高效和安全的载体。IF=5.5引用产品：LongCyteTM标题：Synthesis and Biological Evaluation of Benzo [4,5]- and Naphtho[2′,1′:4,5]imidazo[1,2-c]pyrimidinone Derivatives期刊：Biomolecules时间：2023年11月20日领域：化学单位：俄罗斯科学院生物有机化学研究所摘要：氮杂咔唑因其抗致病性和抗肿瘤活性等特性而受到广泛关注。本研究合成了一系列结构相关的三环苯并[4,5]-和三环萘[2'，1':4,5]咪唑[1,2-c]嘧啶酮衍生物，并对其具有一个或两个带正电的系链进行了抗增殖活性评价。带两个带氨基臂的铅四环衍生物5b对A549肺腺癌细胞的代谢活性有抑制作用，CC50值为3.6 μM，对VA13永生化成纤维细胞具有显著的选择性(SI =17.3)。细胞周期测定显示5b触发G2/M阻滞，无凋亡迹象。一项对其与多种DNA G4s和双链相互作用的研究，以及随后的双荧光素酶和插入物置换试验表明，插入物而不是G4调节的癌基因表达，可能有助于观察到的活性。最后，在浓度高达20mg /kg的72小时后，5b的水溶性盐被证明不会引起急性毒性作用、小鼠行为的改变、或体重的任何减少。因此，5b在体内研究中是潜力候选者；然而，还需要进一步的研究来阐明其分子靶点。IF=4.6引用产品：FongCyteTM标题：Imidazolium-Based Main-Chain Copolymers With Alternating Sequences for Broad-Spectrum Bactericidal Activity and Eradication of Bacterial Biofilms期刊：Macromolecular Bioscience时间：2024年1月23日领域：基础医学单位：中山大学深圳校区生物医学工程学院；广东省传感器技术与生物医学仪器重点实验室摘要：为了应对不断升级的细菌耐药性挑战，对抗浮游细胞增殖和消除根深蒂固的生物膜的必要性强调了阳离子聚合物抗菌剂的必要性。然而，有限的疗效和细胞毒性对其实际应用提出了挑战。本文介绍了以咪唑(Plm+)为阳离子组分的新型咪唑基主链共聚物。通过调节前体分子，对每个单元的疏水性和阳离子密度进行微调，从而对临床相关病原体产生广谱杀菌活性。Plm+1因其强大的抗菌性能而脱颖而出，对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的最小抑菌浓度为32ug mL-1，显著减少金黄色葡萄球菌(S.aureus)和大肠杆菌(E.coli)的生物膜。杀菌机制包括破坏外膜和细胞质膜，使细胞质膜去极化，并触发细胞内活性氧(ROS)的产生。总的来说，这项研究假设了基于咪唑的主链共聚物的潜力，系统地定制了它们的序列，可以作为对抗耐药细菌感染的潜力候选者。IF=2.899引用产品：MateCyteTM标题：Study on the correlation between IL-12p70, IL-17A and migraine in children期刊：Frontiers in Neurology时间：2024年1月31日领域：医学/神经单位：河北省石家庄市儿童医院小儿神经内科摘要：头痛是儿童最常见的神经系统症状之一，偏头痛是最常见的原发性头痛，是一种发病率高且呈逐年上升趋势的脑功能障碍。然而，目前这种疾病复杂的病理生理机制尚未得到充分解释，在诊断和治疗方面存在局限性。既往研究表明，炎症反应在成人偏头痛或动物模型的发生发展中起一定作用，其中最主要的是促炎反应，如细胞因子IL-1ß、IL-6、TNF-α、CGRP等展开。随着科学技术的进步，细胞因子检测在临床诊断和治疗中得到了广泛的应用，但其在儿童偏头痛诊断中的应用价值还有待进一步探索。本研究基于目前临床应用的IL-12P70、IL-17A等12种细胞因子检测方法，主要探讨与儿童偏头痛存在相关的细胞因子及其水平。

近日，北京层浪生物科技有限公司（以下简称“层浪生物”）完成了由荷塘创投领投、毅达资本跟投、跃为资本担任独家融资顾问的近亿元B轮融资。此轮融资将为公司的发展注入强大动力，促进层浪生物在流式技术高端化、常规化方向上大踏步迈进，取得更加丰硕的成果。‍‍‍‍专业深耕，聚焦流式层浪生物起步于2016年，总部位于北京市中关村大兴生物医药产业基地，在北京海淀区留学人员创业园设有研发基地。公司核心团队在流式领域有近20年经验，以研发创新为驱动，以产品质量为保障，以客户服务为中心，专注于实现流式技术系统化、自动化、智能化，为客户提供值得信赖的流式产品和服务。凭借其卓越的技术实力和优良的产品质量，公司获得了国内一线行业伙伴、试剂公司、以及全球一线流式厂家的青睐，形成战略合作，服务广大医疗客户。公司2022年完成由IDG资本投资的A轮融资，助力公司产品研发和市场拓展进度，在科研、工业领域，持续扩大品牌影响力，赢得了众多科学家和研究者的认可。自主创新，追求卓越‍‍‍‍层浪创始人刘铁夫2007年硕士毕业于清华大学，在校期间即从事检测技术领域研究课题。2008年加入国内最大的生物医疗技术公司之一，开始研究流式检测技术，参与主导了中国最早的“中高端荧光五分类”血液分析仪、中国第一台“临床型流式细胞仪”，是中国最早的流式技术领域系统工程师之一。创办层浪以后，近十年专业深耕，不断引领国内流式技术领域的前沿发展，先后推出了国产品牌首台“2光8色”流式细胞仪MateCyte（2023年成为全球知名厂商的贴牌产品）、国产品牌首台“3光14色”流式细胞仪LongCyte™（临床型） 和FongCyte™（科研型） 系列。2023年，公司率先推出配置561nm激光器的国产3激光流式，为众多工业客户提供了研发利器。2024年，层浪将继续推出一系列重量级产品。面向科研市场，将推出4激光配置的流式细胞仪。面向临床领域，将推出淋巴亚群样本制备仪、流式荧光检测仪等新产品。为行业发展注入新的活力。多元模式，互利共赢层浪还创新商业模式，赋能行业伙伴，在行业内开创了“以客户为中心、深度技术服务”的商业模式，通过“核心部件提供、技术服务指导”等方式，帮助行业伙伴促进业务发展、实现商业理想。促成了如今流式技术的星火燎原之势，为行业发展、技术落地贡献了绵薄之力。目前层浪生物产品的质量口碑和出货数量，都处于行业前列。以“战略合作+定制化服务+渠道营销”的多元化商业模式为基石，层浪不断拓宽业务领域，实现持续稳健的发展赢得了市场。层浪始终坚持开放共赢的理念，积极寻求行业战略合作，已与多家企业建立了稳固的合作关系，实现资源共享，互利共赢。层浪深知仪器与试剂犹如腾飞之鸟的双翼，缺一不可，相辅相成。我们高度重视与业内试剂企业的深度合作，与多家业界伙伴建立了稳固的合作关系。通过深度挖掘客户需求，我们提供个性化的解决方案，不仅满足了客户的实际需求，更实现了与客户的共赢，共同推动了流式技术的蓬勃发展。‍‍‍展望未来，乘浪起航‍‍‍本轮融资的领投方荷塘创投表示：荷塘创投对层浪生物在流式细胞技术领域的发展潜力充满信心。国产高端生命科学工具一直是我们重点关注的投资领域之一，其中流式技术是生命科学领域的必备刚需产品。层浪生物在流式技术方面的深厚积累、卓越创新能力和优秀业绩，不但让我们看到了国产流式技术在临床市场日益主导的地位，也让我们看到了国产流式技术进军高端平台尤其是高端科研蓝海市场的希望与潜力。我们期待层浪生物成为流式技术领域的“国货之光”和“创新引擎”，也期待以投资为纽带，为层浪生物注入更多元化资源，实现共赢，共同推动国产生命科学工具行业的发展壮大。跟投方毅达资本表示：流式细胞技术是现代生命科学研究中不可或缺的工具，随着生物学和医学研究的进展，其应用领域在不断拓宽。层浪的创业团队专注在流式细胞领域深耕细作，凭借着优秀的产品品质，迅速打开临床和科研市场，国际化战略也初见成效。生命科学领域一直是毅达资本重点投资方向，我们期待携手层浪并肩前行，在高端流式国产之路上“激起千层浪”。层浪生物创始人刘铁夫表示：此次融资将为公司加速在流式细胞技术领域的研发和市场推广提供有力支持，进一步推动层浪推出更多、更好的产品和服务。层浪生物将继续坚持以客户为中心，不断提升产品质量和服务水平，为中国流式技术事业的繁荣做出更多贡献。

展会介绍：展会介绍：2024年5月4日-8日，在国际上享誉盛名的“流式盛宴“——CYTO 2024（The International Social for the Advancement of Cytometry, CYTO 2024），将于英国爱丁堡召开。过去36届以来，CYTO年会始终聚焦基础细胞计量学的前沿性研究。以“研究、创新和发现”为主题的CYTO2024，不仅将给大家带来最先进的细胞计量学技术，以及成像和单细胞分析等生物应用的新进展；更有来自分子和细胞生物学、生物物理学和光子学领域领导者的世界级演讲。展会时间：2024年5月4日-8日展会地点：苏格兰 · 爱丁堡国家会议中心展位号：07号诚挚邀请：躬逢其盛，与有荣焉。层浪作为流式领域的积极推动者，以FongCyteTM S 4激光13色开启国产流式新篇章，也有幸受邀参加此次会议。在此，层浪也诚挚欢迎各位专家与学者莅临07号展台进行交流，共述流式产品、技术和应用的新发展。

近日，北京层浪生物科技有限公司（以下简称“层浪生物”）完成了由荷塘创投领投、毅达资本跟投、跃为资本担任独家融资顾问的近亿元B轮融资。此轮融资将促进层浪生物在流式技术高端化、常规化方向上大踏步迈进。回顾层浪生物的重要时刻：2023年10月，层浪生物荣获北京“专精特新”企业认证。2023年7月，层浪生物与流式头部企业碧迪医疗就MateCyte双激光流式细胞仪签订中国独家代理销售合作！2023年2月，三激光流式细胞仪LongCyte获得二类医疗器械注册证（京械注准20222220495）2022年11月，层浪生物获得北京高新技术企业认定。2022年7月，层浪生物就完成了A轮融资，由IDG资本投资。2021年1月，2激光8色流式细胞仪 MateCyte 获得二类医疗注册证（湘械注准20212220172）。......据相关市场研究机构统计，2023年全球流式细胞仪市场收入为47亿美元，预计到2028年将达到70亿美元。2023年至2028年复合增长率为8.3%。公司创始人兼总经理刘铁夫本科与硕士均就读于清华大学机械工程学院，2007年毕业后加入迈瑞北京研究院，作为迈瑞流式BriCyte E6的系统工程师，从立项开始全程参与了中国第一台临床流式细胞仪的诞生，并见证了中国流式细胞仪从无到有，从萌芽到火热的全过程。公司核心团队均在流式技术有10余年经验，‘十年如一日’专注流式技术研究，致力于研发生产稳定、可靠、性能优异的产品。2激光8色流式细胞仪已在市场上广有应用，仪器稳定性获得客户的高度认可，未来销量可观，最新研发的3激光14色流式细胞仪已在科研市场有一定的销量，其优异的性能和智能化的表现得到了客户的一致好评，这给我们很大的信心，也让我们对其在临床上的表现充满了希望。在市场表现和技术领先性上，层浪生物都走在了前列。关于北京层浪生物科技有限公司北京层浪生物科技有限公司成立于 2020 年 3 月，注册地址位于北京市大兴区生物医药产业基地，在大兴和昌平均有研发办公场地，另外在湖南成立了全资子公司。公司主要从事 IVD 诊断仪器试剂以及生物医疗科研仪器的研发生产销售，层浪聚焦流式细胞领域，致力于实现流式技术系统化、自动化、智能化，在临床领域推动流式技术的进一步普及，在科研领域助力国产流式产品迈向国际前沿行列。目前产品主要涵盖LongCyte™ 和FongCyte™ 两大流式产品系列及配套诊断试剂和全自动流式样本前处理仪，已通过ISO9001及ISO13485体系认证；临床型产品3激光14色流式细胞仪LongCyte™ 26种型号均获得CE认证。层浪正在为全球近500家客户，提供临床诊断、生物治疗、生物医学基础研究、药物研发、环境材料、食品毒性监测等解决方案。公司核心团队均在流式技术领域拥有10余年技术研究经验，致力于研发生产稳定、可靠、性能优异的流式产品。层浪未来将推出更多产品，为中国流式技术发展尽绵薄之力，争做流式技术的行业普及者和值得客户信赖的合作伙伴，助飞中国流式技术临床和科研事业发展。

 会议介绍BIOCHINA2024（EBC）第九届易贸生物产业展览再次刷新高度，以“展览-大会-活动”三大体系为核心，汇聚了30,000名专业人士和550家展商。在多方合作机构和内容伙伴的联合策划推动下，我们将致力于深耕创新技术与产品开发，积极寻求海内外项目合作与业务拓展，以期推动中国生物医药企业与全球伙伴之间的深入交流与合作。在政策的鼓励下，创新成为我们坚定不移的发展方向。而在市场驱动的迭代发展中，合作则是我们不可或缺的选择。届时，层浪生物将携带层浪高品质流式产品亮相展会。层浪生物诚挚地邀请您莅临F3馆-SF014展台参观交流。我们热切期待与您相聚，共同交流和探讨行业问题，携手助力生物医药领域的快速发展。苏州之约，期待您的光临！诚挚邀请 

展会介绍2024年3月16日至18日，第二十一届中国国际检验医学暨输血仪器试剂博览会（CACLP）和第四届中国国际IVD上游原材料制造暨流通供应链博览会（CISCE）将在重庆国际博览中心盛大开幕。展会将展出包括血液、体液、免疫、生化、微生物、分子、病理、输血检验以及上游原材料和供应链等方面的新技术和产品，为业内人士提供一个交流、学习和合作的平台。层浪生物此次将携层浪流式产品亮相本次展会，诚邀您共襄盛举，共话体外诊断行业的未来发展！展会信息01 展会时间：2024 年 3 月 16 日（星期六）08:30 - 17:00 2024 年 3 月 17 日（星期日）08:30 - 17:00 2024 年 3 月 18 日（星期一）08:30 - 13:3002 展会地址：重庆国际博览中心03 展位号：N1-191204 现场活动：《国产流式的进阶之路--层浪生物产品介绍》时间：3月16日 15：00-17：00LongCyte™系列临床流式细胞仪，灵活的配置适用于多种应用场景。FongCyte™系列流式细胞仪的黄绿激光器全新问世，将国产流式技术推向新高峰。开创国内定制化流式细胞仪的先行，支持特殊激光器及光学模块定制。请各位莅临层浪生物展台，让我们一起从流式的发展现状浅谈国产流式发展趋势，从产品角度浅谈应用开发。

01 关于 MedlabMedlab展会自1984年创立以来，已逐渐跻身全球最大的实验室专项展会之列，不仅在中东地区具有广泛影响力，更受到了美国科学仪器设备与实验室家具国际协会(SEFA)的全球推荐。作为中东地区的医疗健康先锋，阿联酋携手迪拜这一“一带一路”上的璀璨明珠，于2024年2月5日在迪拜世贸中心隆重举办了Medlab Middle East 2024阿拉伯国际医疗实验室仪器及设备展览会。此次展览汇聚了全球的创新领袖和医疗健康专业人士，共同探索医学实验室和检测设备领域的新发展，各种前沿的医疗设备和技术在此亮相，不同区域的专业领域理念在此碰撞，为参会者提供了交流与学习的机会。02  层浪扬帆，展科技锋芒层浪生物携其高品质的流式细胞仪LongCyteTM，首次亮相此次Medlab展会，以其闪耀的科技蓝为展会增添了一抹璀璨的大国科技之光。在展会期间，层浪生物的参展团队热情接待了来自世界各地的众多潜在客户，深入细致地展示了我们的产品特性。对于每位客户提出的疑问，我们都给予了详尽的解答，得到了客户的广泛认可和高度赞赏。不仅如此，我们还成功吸引了众多参观者表达了对我们产品的采购意愿和合作意向。03  展望未来2024年海外首展圆满落幕，标志着层浪生物全球商业化布局的重要一步。展望未来，我们将继续深化在全球关键区域的战略布局，并依托前沿科技创新，为世界健康事业贡献更多力量。 

2024年1月，北京层浪生物科技有限公司在仪器信息网发布层浪生物FongCyte™流式细胞仪搭载561nm激光器新品。查看报价参数主要创新点如下：1.检测光通过光纤传导至三个独立的树杈形检测器阵列，降低了模块之间的耦合，提高光路系统稳定性。专利的检测器及激光器双恒温控制（准确控温在25℃±0.3），光路系统，无惧环境温度波动，输出结果稳定可靠。 2．两种进样模式，定量吸入模式，高精度柱塞泵正压进样非蠕动泵驱动或者负压上样，可免微球绝对计数；持续上吸模式，负压持续吸样，适用于稀有细胞检测。 3.每台仪器内嵌自动进样器，单管及高通量模式可选。高通量模式包括孔板进样模式及管式进样模式，兼容96孔板，40孔流式管，40孔EP管，软件一键式切换，无需等待。具有软件一键式通道排堵功能。智能自动清洗系统携带污染率＜0.05%。 4．AI智能数据分析：有周期拟合，淋巴亚群等AI算法。561 nm 激光应用意义RFP红色荧光蛋白及水果系列荧光蛋白的最佳激发波长，488 nm不可取代；PE及PE耦合染料的最佳激发波长，带来更好的信噪比；空间独立激发，使用561 nm激发PE及其耦合染料，与488 nm激发的FITC染料配合，大大减少补偿值，甚至可以实现免调。如下图所示:488 nm激光，mCherry激发效率为0.8%，PE激发效率为53%。561nm激光，mCherry激发效率为64%，PE激发效率为95%。搭载561 nm激光器的流式细胞仪可提高 PE、PE家族染料及mCherry 等水果系列荧光蛋白的检测灵敏度和分辨率，扩展了荧光染料选择范围，满足特殊应用的需求。488 nm激光器PE/mCherry激发效率561 nm激光器PE/mCherry激发效率(图源:https://www.fpbase.org/spectra/) 日常新品申报入口 ↓↓↓https://www.instrument.com.cn/Members/NewProduct/NewProduct

火树银花迎新岁，笑语欢声映月圆。龙腾四海迎新春，凤舞九天展宏图。1. 总结过去，展望未来时光如梭，一年的工作转瞬已成为历史。新的一年意味着新的起点、新的机遇和挑战。2024年1月12日下午14:00层浪生物全体员工大会正式开始，首先总经理刘铁夫对公司2023年的发展情况进行了全面、客观的评价，也提出了当前存在的一些问题与不足，并对2024年工作计划进行部署。希望在新的一年里，大家能以今天的总结为鞭策，发扬优势，改进不足，不断进取，在各自的岗位上贡献应有的力量!2. 细节决定成败，态度决定高度工作可以平凡，但工作态度不能平庸。平淡的工作在你们的担当下，变得丰富与生动。层浪生物秉承“卓越、奋斗、协作、共赢”的价值观，对评选出的工作态度表现优异的员工进行表彰，他们勇于担当积极向上，面对困难毫不退缩，敢于出手，用优异的表现为公司交上满意的答卷。公司领导为获奖者颁发荣誉证书及奖杯，并请获奖者发表获奖感言。3. 树立目标，再创佳绩目标是我们前进的方向，激励我们勇往直前。各业务部门上台签署目标责任状，有了目标才有了奋斗的方向，希望2024年层浪生物在目标责任的指引下能够乘风破浪，再创佳绩！4. 推杯换盏，精彩不断荧光灿烂，是新年绚丽的色彩；歌声嘹亮，是新年动人的旋律！唱歌、小品、演奏、舞蹈，层浪的舞台上，这里一个不少。各部门的小伙伴们各施其能，各尽所长，为大家带来了精彩的节目。极大的调动了员工们的热情，将晚会的气氛推向又一个高潮。大家携手共进、把酒言欢、回首2023奋斗路、展望未来新征程！5. 花落谁家，幸运传递晚宴必备的抽奖环节也是大家最期待的时刻。同时也将整个年会晚宴氛围推向了高潮。在紧张刺激的抽奖环节中，获奖者号码陆续揭晓，福利与幸运纷纷降临，让层浪的家人们倍感温暖，收获了开年的惊喜。6. 团结一心，其利断金伴随着大家的欢呼，层浪生物年终运动会拉开序幕，本次运动会的项目有：拔河、袋鼠跳、一圈到底等，不仅考验我们的身体素质和反应速度，也考验着大家的团队协作能力。绘成锦绣展旧岁,揄扬风雅待新年！2023年，层浪生物已交出了一张完美的答卷，但逐梦的脚步从未停歇。新的一年我们将乘梦飞翔开拓未来，砥砺奋进筑梦前行！

层浪秉承着自主创新、自主研发精神，在逆境中成长，持续为我国高端生命科学仪器研发贡献力量；FongCyte™流式细胞仪，搭载561 nm激光器全新上市，揭示着层浪人经过不懈努力，开拓国产品牌自主创新之路，开启了我司定制化科研型高端流式细胞仪产品新篇章。从老产品的品质改良到新产品的开发，我们拥有的不只是20余项自主知识产权，更是那不服输的仪器人精神。我们的研发团队用坚韧和毅力攻克了一个个技术难关；我们的销售团队用无比的耐心和专注的精神持续开拓国内外仪器市场；我们的生产及质量团队用高质量体系严于律己保证客户收到稳定优良的产品。坚信在未来的岁月长河中，我司会更加努力、推陈出新、致力于成为全球领军的流式细胞技术单细胞整体解决方案供应商，让科研工作者用上品质优良、配置充分的好产品！“山高水远脚下路，岁月光阴掌中磨！长风破浪会有时，直挂云帆济沧海！”层浪生物生产研发基地作为全国定制化流式细胞仪的领军企业，我司持续使用前沿技术设计解决客户实际需求。FongCyte™ 561流式细胞仪以高通量流式细胞仪为载体，结合GMP-磁吸进样罩的封闭设计，为细胞治疗领域，药物靶点筛选和类器官鉴定等提供了下一代GMP级别的多参数分析系统，结果稳定可靠，效率提升。Model Flower分析系统具有简单的操作体验，配合审计追踪功能，助力新型疗法的开发，为生命健康贡献力量。下面就来看看我司根据某做抗体药物开发客户需求反馈、快速响应立项研发而全新上市的这一款流式产品：What’s New in it？561 nm 激光器 inside图1定制化高功率固体激光器，自由空间输出，光斑呈椭圆形，高斯分布，亮度均匀。图2室温测试8小时，光功率变化0.1%，输出功率稳定。更灵活的机器配置更灵活的机器配置华丽升级的FongCyte™系列流式细胞仪，可根据科研需求实现561 nm激光器与蓝、红、紫三种激光器的自由灵活选配，从1激光5色到3激光14色多达19种配置可选，并接受整机定制，亦可根据实验需求定制激光器(如 532 nm，355 nm，375 nm 激光器）及光学模块（滤光片带宽，OD值等）。※具体参数规格请询问当地销售代表更优异的检测性能561 nm激光器通道，八峰测试结果分群明显，灵敏度更高。CV测试结果更强大的分析软件搭载ModelFlower For RUO 全新的周期拟合模块，无需第三方软件繁冗的操作，一键式周期拟合分析，拟合结果包括 RCS、Mean、CV等，G2/G1比值结果清晰直观，方便查看拟合效果及调整圈门，导出方式方便快捷，轻松助力肿瘤药物研究。用户管理模式，保证不同实验需求的保密性及级别。全面的审计追踪功能，符合21CFRPart 11，保障开发过程可溯源性，确保电子数据的有效性和可靠性。更多样的上样方式支持两种上样模式定量吸入模式:高精度柱塞泵，不易堵塞，免微球绝对计数。持续上吸式:适用稀有细胞检测，做到一滴不留。内嵌自动进样器支持单管、 40 孔流式管/EP管以及96 孔板(U 及 V底，深孔等)上样，方式多样，可软件一键式切换，智能识别，无需等待。更强大的染料兼容性561 nm 激光应用意义1. RFP红色荧光蛋白及水果系列荧光蛋白的最佳激发波长，488 nm不可取代；2. PE及PE耦合染料的最佳激发波长，带来更好的信噪比；3. 空间独立激发，使用561 nm激发PE及其耦合染料，与488 nm激发的FITC染料配合，大大减少补偿值，甚至可以实现免调。如下图所示:488 nm激光，mCherry激发效率为0.8%，PE激发效率为53%。561nm激光，mCherry激发效率为64%，PE激发效率为95%。搭载561 nm激光器的流式细胞仪可提高 PE、PE家族染料及mCherry 等水果系列荧光蛋白的检测灵敏度和分辨率，扩展了荧光染料选择范围，满足特殊应用的需求。488 nm激光器PE/mCherry激发效率561 nm激光器PE/mCherry激发效率(图源:https://www.fpbase.org/spectra/)A New Modle Flow Cytometer, for more new trys!2023年Q3季度至今，我司561产品在科研及工业领域多面开花结果，收到客户的一致好评，如您有561机型的实验需求，可填写二维码表单，申请试用，我司将按填表顺序优先安排试用! 

引言：随着2023年的落幕，回望这一年，那些挑战与机遇、汗水与笑容都化作成长的足迹，我们以不屈的精神和坚定的信念，书写了一段又一段辉煌的篇章。在这份总结报告中，让我们一同回顾2023年这一年里层浪生物在各个方面的成绩与进步，让我们共同见证层浪生物的成长之路！ 一  荣誉与资质——驱动未来的双翼自2020年成立以来，公司始终坚定地追求卓越，不断探索创新。在充满挑战与机遇的2023年，层浪生物凭借其卓越的技术实力和不懈的努力，荣获了一系列令人瞩目的荣誉和奖项，为公司的发展历程书写了辉煌的一页。这些荣誉不仅是对层浪人一年来辛勤付出的肯定，更是对未来发展的鼓舞和激励。1. LongcyteTM系列流式细胞仪从1激光4色至3激光14色26个型号配置均获得二类医疗器械注册证2. 荣获北京市2023年度“专精特新”中小企业称号 3. 荣获2023年度北京市新技术新产品(服务)证书 4. 获得质量体系认证：ISO9001；ISO13485二  与碧迪医疗（BD）达成战略合作加入BD质量体系三  提升市场占有率过去一年，我们公司在激烈的市场竞争中，积极开拓新业务领域，不断扩大市场份额。我们以优质的产品和服务为基础，不仅在临床医疗领域取得显著成就，更在科研和工业市场创造了新的销售记录。在国际市场上，我们成功地建立了销售渠道，为公司的全球化战略注入了新的活力。通过全体员工的共同努力，我们实现了业绩的稳步增长，市场占有率也得到了进一步提升。这充分展现了我们的竞争优势和未来的发展潜力。1. 9场国内临床/科研/工业展会第十五届全国免疫学学术大会第十一届陆道培医疗流式细胞术临床应用及新进展学习班CACLP等国内行业权威展会 2. 多场国际展会与讲座四  产品创新与技术突破层浪生物坚信创新是企业发展的核心动力，因此始终保持对研发的高投入，不断推动产品和技术的革新。层浪成功研发了具有独特专利的两种进样模式的流式细胞仪。此外，还推出了新机型，配备了4激光选配561nm激光器，进一步提升了公司的技术实力和市场竞争力。 1. 独特专利的两种进样模式 2. FongCyteTM系列流式细胞仪搭载561激光器全新问世配有488nm，638nm，405nm，561nm 4种激光器可选，可以为研究者配置3激光，提供多达14色参数分析，支持原机升级配置，支持特殊激光器定制，作为具有创新性的流式技术平台，将国产流式技术推向新高峰。搭载561nm激光器可提高PE、PE家族染料及mCherry等水果系列荧光蛋白的检测灵敏度和分辨率。3. 客户应用之声层浪生物收集装机后客户端的应用实例，如淋巴亚群检测、精子检测、植物倍体检测、凋亡检测、细菌检测等多篇来自客户的案例分享，为新用户的使用提供详细的参考。 4. 现场培训/装机更多现场培训/装机 五  团队建设与人才培养——以人为本，共创未来层浪生物始终秉持人文关怀的理念，致力于为员工打造一个既舒适又充满活力的环境。不仅关注办公设施的完善，更重视团队文化的建设；通过组织各类团队活动，加强内部沟通与合作，形成了一个富有凝聚力与创造力的团队。同时，我们重视人才培养与发展，为员工提供广阔的学习与晋升空间。在新的一年里，我们将迎接新的挑战，拥抱无限的可能。我们将以创新的精神继续奋进，用实际行动书写属于层浪生物的辉煌篇章。在2024年的征途上，让我们携手共进，共创美好未来！

  在微生物研究，尤其是细菌学中，对菌体计数是一项最基本的需求。常规的计数方法主要是国家标准推荐的平板计数法和显微镜计数法，但它们耗时长、误差大，且平板法只能计数活菌。近年来，随着荧光染料、结构光学和流式细胞仪技术的不断发展，流式细胞术检测细菌等微生物成为可能。与传统检测方法相比，其具有灵敏、快速、高效、精确的优势，流式细胞术已经成为微生物研究中的一个重要工具，在单细胞层面对细菌结构和功能的多项参数进行更深层的分析，以研究细菌的异质性和鉴定细菌种属。本方案以大肠杆菌为例，介绍层浪流式细胞仪如何评估活菌比例和计数。——实验背景——膜的完整性评估是细菌活力的重要评价手段，通常使用膜渗透性和非渗透性荧光染料来进行活力测试，目前比较常见的染料是SYTO 9/PI。SYTO 9 作为一种可渗透的绿色荧光核酸染料，被动扩散进入细胞内，既可以进入细胞膜完整的细菌中，也可以进入细胞膜受损的细菌中，与核酸染料结合。而红色荧光核酸染料PI只能进入不完整细胞膜的细菌中。当SYTO 9和PI同时加的时候，PI染料进入膜内，会导致SYTO 9荧光染料的降低。因此，具有完整细胞膜的细菌呈现绿色，而膜不完整的细菌呈现红色。图1：SYTO 9/PI细菌活力测定法原理示意图——样本处理——1. 收集对数生长期的大肠杆菌，10000g，5min，离心洗涤，取细胞沉淀重悬于0.22um过滤的无菌PBS中；2.进行细菌计数，为后续染色做准备；3. 取4个流式管，标记为空白组，SYTO 9和PI单染组，样本组。每个试管加100ul细菌悬液，保证细菌数在106-107左右。——样本染色——1. 根据厂家试剂盒建议，单染组分别加1ul SYTO 9或1ul PI，样本组加1ul SYTO 9和1ul PI，加PBS至988ul。涡旋，室温避光孵育15min；2. 充分涡旋微球，每管分别加10ul，每份样本中体系为1000ul；3. 设置参数，用层浪FongCyte流式细胞仪采集信号，SYTO 9（Max Ex/Em=485/498nm）用FITC通道检测，PI（Max Ex/Em=535/617nm）用PerCP通道检测，两个通道光谱重叠小，补偿易调节。——数据分析——1. 细菌比较小，选择对数模式分析。设置合适的电压，使细菌群信号在流式图中间清晰地呈现。设置合适的阈值，很大程度减少背景噪音。此实验中，设置的是FSC和FITC双阈值；2. 根据FSC和SSC，圈出主细菌，右上角的一群是微球（图2）；3. 从主细菌中，选择SYTO 9和PI，红光区域的代表死菌，绿光区域的代表活菌（图3）。——总结——1. 原核生物平均直径在1um左右，需要挑选合适的流式细胞仪。层浪的流式细胞仪检测直径在0.1-50um，除大肠杆菌外，还可以检测葡萄球菌、酵母、浮游生物、益生菌等；2. 层浪流式细胞仪可以获得体积法绝对计数，跟微球法结果有较高的一致性，节约实验经费；3. 细菌活力染色实验对管路的洁净度要求高，层浪流式细胞仪每管样本间采样针自动清洗，携带污染率为0.05%，能够获得更加准确的结果。数据来源 : 广州某实验室层浪：  您好，可以采访下您近期使用层浪流式细胞仪的感受吗？客户：  可以的。层浪：  在层浪的仪器上，您们日常都做哪些样本？客户：  我们实验室开展多种流式实验，在微生物方面，除了细菌，还做酵母、益生菌检测等。层浪：  您对于层浪的仪器，有哪些使用感受和反馈吗？客户：  我们之前用平板法培养细菌进行计数，这种方式只能培养活菌，通常耗时3天左右，而流式细胞术对活菌和死菌都可以计数，比平板法的计数结果会高一些，更准确一些，而且灵敏、检测速度快、时间短，极大地提高了我们出数据的效率，我们现在逐渐用流式替代平板法了。层浪：  确实，现在流式细胞仪在微生物研究中的作用越来越广泛了。客户：  我们实验室之前有一款进口的流式细胞仪，现在使用贵司的仪器，非常喜欢您们的软件！中文的界面，功能键直观，而且操作简单。细菌实验对仪器的清洁度要求高，还要避免管路之间的交叉污染，之前我们是上完一个样本，再上一管水，进行反冲。而您们的仪器每个样本之间能够进行采样针清洗，免去了我们每管样本手动清洗的麻烦。做普通清洗和深度清洗也很方便，使用的清洗液用量也不大。层浪：  非常感谢您的反馈。层浪会继续努力，用心服务每一位客户。图4：层浪生物FongCyte™3光14色流式细胞仪参考文献：1、刘新星,霍转转.流式细胞术在细菌快速检测中的应用；微生物学通报。DOI:10.13344/j.microbiol.China.130041.2、邓颖,基于流式细胞术的SYTO 9/PI细菌活性判定方法优化及其机理;暨南大学硕士学位论文.3、Philipp Stiefel, Sabrina Schmidt-Emrich,Critical aspects of using bacterial cell viability assays with the fluorophores SYTO9 and propidium iodide.DOI 10.1186/s12866-015-0376-x.4、S M Stocks,Mechanism and use of the commercially available viability stain, BacLight.doi: 10.1002/cyto.a.20069.5、Martin G. Wilkinson,Flow cytometry as a potential method of measuring bacterial viability in probiotic products: A review.//doi.org/10.1016/j.tifs.2018.05.006.