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大学实验:黏蛋白染色液(天青A异染法)实验方法

古朵生物

2022/11/01 12:11

阅读:9

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中文名称:黏蛋白染色液(天青A异染法)
产品规格:100mL
用途:黏蛋白染色
注意事项:酸性黏蛋白和蛋白多糖呈紫色至红色,背景呈蓝色。
储存条件:4℃,避光,12个月

产品说明:黏液物质染色有多种方法,如AB-PAS染色、黏液HID-AB染色、标准阿利新蓝染色等。以上方法大多是利用阿利新蓝(Alcian)属于阳离子染料可与酸性基团结合,也即阿尔辛蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物这一原理。黏蛋白染色液(天青A异染法)是利用天青的异染性这一特性,染色后组织或组织成分着染的颜色与染料复合物的原有颜色明显不同而且可形成鲜明的对比。染色后,切片处理对异染染色的稳定性非常重要,宜采用乙醇保存。

自备材料:系列乙醇、蒸馏水、去离子水

操作步骤:
1,切片脱蜡至水;
2,黏蛋白异染染色液(天青A法)染色,去离子水冲洗5min;
3,梯度乙醇脱水,二甲苯透明,混合封片剂封片。
 
注意事项:
1、涂片厚薄适宜,固定后方可染色,并且切片脱蜡应尽量干净,否则影响染色效果。
2、所加染液以覆盖涂片为宜,不能过少,以免蒸发而染料沉淀。
3、所有试剂,溶液以及样品的包装上必须要有标签;标签要完整,清晰,表明试剂的名称,规格,质量。
4、溶液除了表明品名外,还应表明浓度、配置日期等,万一标签脱落,应照原样贴牢,决定不允许在容器内装入与标签不相符的物品。
5、无标签的试剂必须取小样检定后才可使用;不能使用的化学试剂要慎重处理,不能随意乱倒;为了保证试剂不受污染,应当用清洁的牛角勺或不锈钢小勺从试剂瓶中取出试剂,绝不可以用手抓取;若试剂结块,可用洁净的玻璃棒或瓷药铲将其捣碎后取出。
6、液体试剂可用洗干净的量筒到取,不要用吸管伸入原试剂中吸取液体;从试剂瓶中取出的,没有用完的声誉药品,不可再倒回原瓶。
7、固定液应定期更换,以免固定不充分导致着色不佳。
8、染色液应定期更换,以免影响染色效果。


染色结果:
酸性黏蛋白和蛋白多糖    红色至紫色
背景    蓝色

注意事项:为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


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