■ 背景介绍:
肿瘤微环境(TME,tumor microenvironment)是液体、免疫细胞及包裹肿瘤的血管所组成的混合体,肿瘤细胞与TME之间的相互作用能够帮助决定肿瘤的进展和命运;因此,理解TME的组成和功能对于有效抑制癌症进展至关重要。
古朵的多色标记免疫荧光染色试剂盒针对肿瘤微环境研究,开发有包含CD8,CD4,FoxP3指标的多重荧光免疫组化染色试剂盒。
该产品为三标四色试剂盒,包含3个抗体和细胞核染料,50片/盒(以100ul/片用量计算)。
■ 检测原理:
多标记免疫荧光染色是基于抗原、抗体特异性结合的原理,选用辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗抗体,对试剂盒中的荧光染料进行活化,将信号共价结合到抗原上。借助于不同的荧光染料标记,通过多轮染色循环实现组织或细胞的原位多靶点染色。
■ 产品组成:
CD4 兔单抗、CD8 兔单抗、FoxP3 兔单抗、单色荧光染料-TSA520、单色荧光染料-TSA570、单色 荧光染料-TSA650、单色荧光染料-DAPI、信号放大反应液、鼠兔通用型 HRP 标记二抗、碱性抗原修复液-粉 末、抗体稀释液/封闭液。
■ 检测试剂及设备:
1、所需材料:1000W 以上可调功率的微波炉,至少有 5 个以上的档位,移液器、恒温干燥箱、免疫组化笔 (abs929)、修复杯、染色缸、计时器、孵育湿盒、盖玻片、通风橱、洗瓶、荧光显微镜。 3、试剂准备:
(1). TBST 洗液:25 mM TRIS-HCl (pH 7.5),150 mM NaCl,0.05% Tween®20 (v/v)
(2) 碱性抗原修复液:20X 碱性抗原修复液用灭菌去离子水按照 1:19 比例稀释(3). 抗体稀释液:可做抗体稀释和封闭使用,即用型
(4). 一抗工作液:用抗体稀释液按照下表稀释
(5). 二抗工作液:二抗工作液为即用型鼠兔双抗
(6). TSA 荧光染料染色工作液:TSA 系列单色荧光染料为 100X 母液,使用前用信号放大反应液稀释用 1:100 稀释,配好的工作液 4℃保存,仅限当天使用。
(7). DAPI 工作液:DAPI 使用无菌水按 1:100 稀释制备工作液
4、检测设备:
荧光显微镜或荧光全片扫描设备,TSA 系列荧光染料适用的激发和发射滤光片应符合下表中的建议。
古朵的多标记免疫荧光染色试剂盒,满足您的多指标免疫荧光共定位研究,您也可委托我们进行染色服务哦!