适应在体外培养条件下持续传代培养的细胞称为传代细胞。幼年动物的肾、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉与肿瘤等组织的细胞较易培养,而神经细胞则较难培养。原代细胞基础上通过胰酶等物质消化后继续用于细胞培养的细胞,它与原代细胞具有相同核型。这类细胞在体外可以无限制分裂.下面小编就讲一下细胞传代的方法以及步骤:
1.【无菌环境】
在细胞实验之前要注意无菌环境的建立,紫外杀毒灭菌,酒精消毒都是十分有必要的。
2.【镜下检查】
镜下检查结果非常重要,镜检的结果非常重要,要根据你自己的观察进行细胞密度的识别,从而进行细胞传代比例的确定,进行更好的细胞数量的控制,如果实验要求比较高,需要细胞计数板计数。
3.【过火焰】
记住,所有开瓶的东西都要进行过酒精灯外焰,瞬间高温进行灰尘的固定。这样会大大减少染菌几率。
4.【移液工具】
很多人对于移液工具都有偏好,不好说什么就是正确的。但是从无菌角度。使用移液管比微量移液枪减少污染的几率要高。希望大家能用移液管。
5.【交叉污染】
混匀细胞悬液和移取培养基以及血清的工具要分开;还有就是胰酶和血清也要严格分开,否则容易造成交叉感染,使细胞增加染菌几率。
6.【消化时间】
对于贴壁细胞,我想要大家注意的是胰酶消化时间,对于常用0.25%的胰酶最好把消化时间控制在30s内,必要是最好镜检看一下是否脱壁。但是这是一个经验活,要多积累经验。
7.【细胞混匀】
细胞的混匀要轻柔,气泡的产生对细胞的状态是有影响的,希望大家注意。另外,贴壁细胞容易粘连,所以要多吹打几次。
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