HPLC一般指高效液相色谱,是一种多功能的分析方法,可对各种化合物进行分离和定量。它广泛应用于生命科学领域的应用、药物分析、食品分析、环境监测、精细化工产品分析等众多领域。HPLC的技术都具有基本原理,比如样品引入,色谱柱中样品组分的分离以及使用多种检测技术进行检测。想了解制备型HPLC要先对分析型HPLC进行初步研究,两种技术之间的基本区别是操作规模,下面将重点介绍区别:
明确分析的目标
在进行分析之前,你应该对分析目标有清楚的了解。你是希望获得有关样品成分纯度的信息然后进行定性,还是希望能快速分离、纯化产品。在一种情况下,你可以使用分析型HPLC分离。在另一种情况下,你可以使用制备型HPLC。
规模
在分析型中,样品通量很小,通常为微升水平,而在制备型中,进样量很大,是分析型的几百倍上千倍,从而可以产生毫克至克级的纯化合物。为了达到这个效果,制备型选用的是大流速的泵,粗粒径填料,粗管径的色谱柱,以提高色谱柱的载样量。
尺寸
与分析HPLC柱相比,制备型HPLC柱比较大。分析色谱柱通常直径为4.6mm。恒谱生分析HPLC色谱柱基于高纯硅胶,采用独特键合技术,具有优异的峰形,更好的选择、灵敏性和重要性。基质金属含量低,对所有类型的分析物均表现良好峰形。机械强度稳定性好,质控严格,确保优异的色谱柱性能和延长色谱柱寿命。优势在于:平衡时间短;高流速,低背压;使用寿命长;缩短分析时间,节约溶剂;高柱效,分离度佳。
而制备色谱柱的内径通常在50-200mm的范围内。恒谱生C8、C18、C4制备液相色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管用316L不锈钢制成,不锈钢柱内壁多经过抛光,提高柱效,减小管壁效应。广泛应用于医药、环境和食品等多个领域,满足从实验室分析到工业大规模制备的不同需求。
与制备色谱柱相比,分析色谱柱填充的固定相粒径范围在3-5μm之间,而制备色谱柱填充的是大于10μm的较大颗粒。这样的粒径允许更高的塔流速,较长的长度和较宽的色谱柱直径可提供较低的背压。
进样方式
运用分析色谱分析时通常涉及多种的样品进样量,因此自动进样器是首要选择的进样方式。相反,在制备分离中,样品数量很少,甚至可能只有一个样品只是进样量较大,因此可以使用大体积进样环。
探测器选择
由于分析要求,通常只将非破坏性检测器(例如UV,荧光或折射率检测器)用于制备级应用。与分析色谱分离相比制备色谱样品进样量大,因此检测器具有更大的流通池。
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