1.解冻细胞步骤
①细胞保存在-196℃的液氮罐中,需取出后在37℃水浴锅中摇晃解冻融化或者用法细胞复苏仪解冻。
②将解冻好的细胞转移到生物安全柜内,用移液器吸出,转移至离心管中在离心机中离心。
③将离心好的的细胞在生物安全柜内用移液器弃掉上清液,加入合适的培养基,接种在培养皿内放在二氧化碳培养箱中培养。
2.传代冻存步骤
①将在二氧化碳培养箱中的细胞取出在显微镜下观察,然后进行消化。
②用移液器吸掉上清,加入清洗液清洗后,转移至离心管中离心。
③取20ul加入冷冻液的细胞悬液用细胞计数器计数得出细胞总量
④将离心后的细胞取出加入冷冻液冻存后用程序降温仪转移至-80超低温冰箱24h后再转移至液氮罐中存储。
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