土壤速效钾含量检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/3d1a384c-d91a-4e3b-9cbf-e853c80a0235.jpg)
溶液的配制:
1、 试剂一:自备,甲醛。
2、 工作液:临用前在 1 瓶试剂三 B 中加入 2.805mL 试剂三 A,充分溶解,现配现用,用不完的试剂 2-8℃保存一周(每瓶配好的工作液可做 37 管样本测定管试验)。
3、 标准液:20 μmol/mL 钾标准液。
产品说明:
速效钾是土壤中易被植物吸收利用的钾素,是表征土壤钾素供应状况的重要指标之一。及时测定和了解土壤速效钾的含量及其变化,对耕地地力评价及对指导钾肥的施用有着重要作用。
钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的白色四苯硼钾沉淀,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比,通过检测其在 420nm 处的浊度来测定土壤速效钾的含量。
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/5adbf53c-2a7d-46ac-b657-05b8821686cb.jpg)
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、振荡器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、30-50 目筛、甲醛(不允许快递)、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样风干,过 30-50 目筛。按照土壤质量(g):蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例(建议称取约 0.2g土样,加入 1mL 提取液),振荡提取 1h,10000rpm,25℃离心 10min(若离心后上清中仍有杂质,建议将上清再次离心,至澄清),取上清液待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 420nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 临用前将 20 μmol/mL 钾标准液用提取液稀释至 1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL 的标准液待测。
3、 标准液稀释可参考下表:
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/7ee325dd-f000-42b5-95a4-ba10039965a1.jpg)
4、 在 EP 管或 96 孔板中进行以下操作(试剂一为有刺激性气味的有毒物质,建议以下试验在通风橱中操作):
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/15ce722a-3270-4f1e-a14d-07a0374e6f65.jpg)
三、速效钾含量计算
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/0d56d9d0-2822-4c6d-9cfc-0f882ef04980.jpg)
注意事项:
1、 提取液刚从低温(4℃)条件取出会有晶体析出,震荡使其溶解即可。
2、 甲醛为有刺激性气味的有毒物质,建议本试验在通风橱中操作。
3、 当 A 测定大于 1 时,建议将样本用提取液稀释后再进行测定,计算时需在公式中乘以相应稀释倍数;当 A 测定小于 0.15 时,建议适当增加土壤样本质量或减少提取液重新提取后再进行测定。
实验实例:
1、取 0.2g 土样 1 加入 1mL 提取液,振荡提取 1h,取上清按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算 ΔA 测定=A 测定-A 对照=0.218-0.062=0.156,根据标准曲线 y=0.7128x-0.0301,计算 x =0.261μmol/mL,按样本质量计算速效钾含量得:速效钾含量(mg/kg 质量)=0.039x ÷W=0.039×0.261÷0.0002=50.895 mg/kg 质量。
2、取 0.2g 土样 2 加入 1mL 提取液,振荡提取 1h,取上清后按照测定步骤操作,用 96 孔板测得计算 ΔA 测定=A测定-A 对照=0.801-0.055=0.746。根据标准曲线 y=0.7128x-0.0301,计算 x =1.089μmol/mL,按样本质量计算速效钾含量得:速效钾含量(mg/kg 质量)=0.039x ÷W=0.039×1.089÷0.0002=212.355 mg/kg 质量。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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