铜蓝蛋白(Cp)活性检测试剂盒说明书
微量法
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
溶液的配制:
1、 试剂三:使用前 37℃预热。
产品说明:
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在 645nm 处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板和蒸馏水。
操作步骤:
一、测定步骤
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm,蒸馏水调零。
2、 操作表:
二、计算公式
A、按微量比色皿计算
单位定义:37℃、1mL 反应体系条件下, 每分钟每 mL 样本与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×(V 反总÷1)÷0.01÷T÷V 样=ΔA÷0.03
B、按 96 孔板计算
单位定义:37℃、1mL 反应体系条件下, 每分钟每 mL 样本与底物作用吸光度升高 0.006 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×(V 反总÷1)÷0.006÷T÷V 样=ΔA÷0.018
T:反应时间,30min;V 样:加入样本体积,0.03mL;V 反总:反应总体积,0.3mL;1:1mL 反应体系条件。
注意事项:
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!