总胆固醇(TC)检测试剂盒

产品概述

总胆固醇检测试剂盒采用COD-PAP单试剂法，又称胆固醇氧化酶法或胆固醇氧化酶-过氧化物酶偶联法等，血液中的胆固醇约1/3为游离胆固醇，2/3为与脂肪酸结合的胆固醇酯，胆固醇酯被CEH水解为游离胆固醇，后者被胆固醇氧化酶(COD)氧化成胆甾烯酮，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色醌亚胺色素(Trinder反应)，在500~520nm处进行比色测定。 胆固醇(Cholesterol)又称胆甾醇，是一种环戊烷多氢菲的衍生物，分子式C27H46O，分子量为3860.65。胆固醇广泛存在于动物体内，其中脑、神经组织最丰富，在肾、脾、皮肤、肝和胆汁中含量也较高。总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。人群总胆固醇水平主要取决于遗传因素和生活方式。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯，肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料，也是构成细胞膜的主要成分，其血清浓度可作为脂代谢的指标。 本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的总胆固醇含量定量测定。 可以提供细胞凋亡、增殖、毒性、活性氧、细胞代谢、氧化应激、细胞膜流动性、膜通透性转换孔、细胞耗氧率、细胞内pH、细胞粘附、细胞自噬等数百种检测试剂盒产品。可以为您提供各种颜色的M系列、N系列、L系列、E系列、G系列等细胞膜、细胞质、细胞核、溶酶体、线粒体、内质网、高尔基体、骨架、微管等细胞、细胞亚结构荧光染色试剂盒产品，以及钙离子、钠离子、氩离子等各种荧光染色试剂盒产品。

保存温度

2-8℃ 避光

注意事项

开盖后组份按要求条件保存。

有效期

6个月

检测方法

微孔板，酶标仪

适用样本

血清、血浆、尿液、细胞、组织

产品应用

微孔板，酶标仪

仪器准备

1.酶标仪/半自动生化分析仪/全自动生化分析仪

试剂准备

1.蒸馏水

2.PBS 缓冲液

3.生理盐水

4.蛋白定量试剂盒

耗材准备

1.离心管

2.吸头

使用注意事项

1.试剂盒仅科研使用；

2.样品含量如超出检测范围上限时，可用生理盐水稀释后检测，检测结果乘以稀释倍数；

3.试剂中含有防腐剂和稳定剂，可能存在一定的刺激作用或毒性，请勿直接接触皮肤、眼睛。一旦接触，即用大量清水冲洗。请勿吞服；

4.试剂防止葡萄糖、胆固醇等试剂的污染；

5.试剂与样本的用量可按比例改变；

使用方法

样品处理

血清、血浆样本：

从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测；

培养液样本：

吸取培养液，1000转/分，离心10分钟，取上清测定；（一般建议细胞密度在106/ml以上）

细胞样本：

1. 取适量的细胞(一般推荐>106/ml以上)，1000转/分，离心10分钟，弃上清，留细胞沉淀。

2. 用0.1mol/L、pH7~7.4 PBS或生理盐水清洗1~2次，1000转/分，离心10分钟，弃上清，留细胞沉淀。

3. 加入200~300μl的PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W，每次3~5s，间隔30s，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。也可用裂解液裂解（TrintonX-100，1-2%,裂解30-40分钟），裂解好的液体不可离心，待用。

【注】：

破碎好的液体可显微镜观察细胞是否破碎完全。

组织样本：

准确称取适量组织样本，按质量(g)：体积(ml)=1：9的比例，加入9倍体积的匀浆介质，冰浴条件下手动或机械匀浆。2500转/分，离心10分钟，取上清待用。

【注】：

如组织样本不是高脂肪样本，匀浆介质一般用PBS或生理盐水；

如组织样本为高脂肪样本或部分高脂样本，匀浆介质统一用无水乙醇。

测定方法：

酶标仪TC测定操作:

1、 按下表依次加入试剂：

2、 充分混匀, 37℃水浴中孵育10分钟。

3、 酶标仪测定510nm吸光度。以空白孔调零，读取标准孔和各待测孔的吸光度。

全自动上机操作

计算：

血清、血浆等液体样本：

（1）酶标仪比色

TC(mmol/L)=｛(样本孔吸光度-空白孔吸光度)/(标准孔吸光度-空白孔吸光度)｝×标准品浓度（5.17mmol/L）

（2）全自动生化分析仪

TC(mmol/L)=（样本管吸光度/校准管吸光度）×标准品浓度（5.17mmol/L）

细胞、组织等样本：

（1）酶标仪比色

TC(mmol/gprot)=｛(样本孔吸光度-空白孔吸光度)/(标准孔吸光度-空白孔吸光度)｝×标准品浓度（5.17mmol/L）÷待测样本浓度(gprot/L)

（2）全自动生化分析仪

TC(mmol/gprot)= （样本管吸光度/校准管吸光度）×标准品浓度（5.17mmol/L）

÷待测样本浓度(gprot/L)

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！