fluidot蠕动泵分液器在生活饮用水大肠埃希氏菌检测中的应用（多管发酵法）

fluidot蠕动泵分液器在生活饮用水大肠埃希氏菌检测中的应用（多管发酵法）

方案摘要：根据国家标准,生活饮用水中不应含有病原微生物； 生活饮用水应对微生物的几个指标总大肠菌群、大肠埃希氏菌、菌落总数。本方案利用多管发酵法，快速达到检测出生活饮用水中大肠埃希氏菌的数量。

方案详情：

1、 实验原理

将总大肠菌群多管发酵法在初发酵时阳性的培养物,接种在含有荧光底物的培养基上,经培养产生β-葡萄糖醛酸酶(β-glucuronidase),分解荧光底物释放出荧光产物,在紫外光下产生特征性荧光的细菌，以此来检测水中大肠埃希氏菌的方法。

二、实验准备

1、培养基和试剂

① EC-MUG培养基

2、仪器与设备

① 紫外灯：6W，波长为366nm。

② 培养箱。

③ 电子天平。

④ 平皿：直径9CM。

⑤ 无菌试管：约15MM×160MM。

⑥ 无菌吸管：1ML，10ML。

⑦ 移液器：电动移液器：fluidot   5 mL  FDT-1-1-5000

⑧ 手动移液器：fluidot  1 mL  MSP1K

⑨ 锥形瓶：1000ML。

⑩ 小倒管。

⑪ 接种环。

⑫ fluidot蠕动泵分液器  600D

三、实验步骤

1、接种：事先用蠕动泵分液器600D分装EC-MUG培养基然后高压蒸汽灭菌，用无菌接种环货无菌棉签将总大肠菌群多管发酵法在初发酵时产酸产气的试管中液体接种到EC-MUG管中。实验室生物安全要求应依据GB 19489。

2、培养：将已接种的EC-MUG管在培养箱中44.5℃±0.5℃培养24h±2h。

4、 实验数据处理

 将培养后的EC-MUG管在暗处用紫外灯照射，如果有蓝色荧光产生则表示水样中含有大肠埃希氏菌。

 计算EC-MUG阳性的管数，查对应的MPN表得出大肠埃希氏菌的MPN值，结果以MPN/100ML报告。