介绍:
产业界与学术界的合作使更有针对性和成本效益的药物发现方法成为可能。通过这种高度的合作,全世界的学术机构已经可以访问包含数十万化合物的化合物库。有限的预算和高度可变的项目使人们更加需要具有成本效益和易于使用的工具,以促进高效的测定开发和筛选。此外,由于这些项目需要按照工业标准运行,因此高通量筛选的自动化需要具有可重复性,以保持这种药物发现过程的可行性。
本应用说明重点介绍了 TEMPEST® 的使用方法,它是一种多功能微流体试剂分液器,旨在以小型化分析体积执行测定开发和高通量筛选,将测定试剂的成本降低 60%,同时生成高质量的筛选数据。 UCL的药物发现小组证明,当使用 TEMPEST 液体处理器进行自动化处理时,只需 1.6 µL 的总反应体积即可测定 12000 条hit确证量效关系曲线,与过去的液体处理方法相比,检测试剂的成本降低了 26000 英镑 。
材料:
• Labcyte Echo 液体处理器
• FORMULATRIX® TEMPEST® 液体处理器
• Hidex Sense 读板机
• 375x 384孔板
图 1. FORMUATRIX® TEMPEST® 液体处理器
方法:
使用 TEMPEST® 液体处理器,反应体积从 4 µl 缩小到 1.6 µl。这意味着所需的检测试剂体积从 12 µl 减少到 4.8 µl,但是误差没有增加,检测窗口也没有减少。使用激活肽的量效关系曲线来确定测定的保真度。在 Hidex Sense 读板机上读取数据并使用 Graphpad Prism 和 Genedata Screener 进行分析。
结果:
减少分配体积的主要目的是为了减少筛选的检测试剂成本。对于在量效关系曲线上12000个化合物的筛选,检测试剂的体积能够减少近1/3,意味着节省了26000英镑。预计检测保真度不会降低,而且,使用TEMPEST®液体处理器减少了检测中的误差,并将robust Z`从试点研究的0.3提高到375板筛选的0.66。
图 2. 阳性对照化合物浓度反应
总结:
学术与产业的合作使学者能够访问获得了大型化合物库,而这些化合物库需要成本效益高、易于使用的液体处理器来进行筛选。通过使用TEMPEST®液体处理器,我们将hit确证筛选的体积减少了1/3,从而为375板筛选节省了26000英镑。此外,筛查中的数据质量也得到了改善,通过筛查的robust Z`为0.66。最后,该系统的易用性使其成为多用户实验室和对自动化液体处理解决方案经验有限的科学家的理想选择。
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