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选择培养箱的秘诀就在这里,杭州聚同手把手教你

2021-03-31 09:54

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众所周知,培养箱在实验室应用很广泛,其种类繁多,功能各异,有时候甚至让使用者很难分辨,更别说以高性价比选择到适合所需实验的款式。杭州聚同电子有限公司作为实验室仪器集成商,本文将站在使用者的立场考虑,选择适合用户各自所需的不同产品,告诉您选择的诀窍。 目前市场上培养箱可分为以下几类:电热恒温培养箱、隔水式培养箱、生化培养箱、霉菌培养箱、恒温恒湿培养箱、二氧化碳培养箱、厌氧培养箱、光照培养箱、人工气候箱。以下杭州聚同电子有限公司将通过各自的特点及相互之间的区别联系来作对比。 1、 电热恒温培养箱 电热恒温培养箱是通过电加热转化为热能,通过内部循环风机使箱体内温度均匀,该款培养箱不带制冷,控温温度是室温RT+5度~60度 2、生化培养箱 生化培养箱具有电热恒温培养箱的所有功能外还具有制冷功能,生化培养箱的温度范围比电热恒温培养箱广,可达到0度~70度 3、霉菌培养箱:具有加热、制冷、加湿、消毒功能的高精度实验室设备。它比生化培养箱多一个消毒功能,一般都是带紫外杀菌灯,可以作为生化培养箱使用。也有部分霉菌培养箱在恒温、杀菌基础上增加了湿度控制,带湿度控制的霉菌培养箱也可以当做恒温恒湿培养箱使用。 4、恒温恒湿培养箱:具有恒温、恒湿功能的高精度实验室设备。 5、二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。一般有气套式加热和水套式加热两种方式;其中水套式加热是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的。
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在100倍显微镜下,移动计数板将视野对准计数板的中央大方块,该方块四周有一圈3条平行线包围,中间有密集的网格。中央方块区差不多刚好可以填满整个视野 使用手持式计数器记录计数池四个角以及中央方块内的细胞数(1-5号位置,经典的current-protocol推荐每个方块细胞数应不大于20-50),并重复记录另一侧计数池中的细胞数,总计十个方块。计数的方法是只计算上边和左边压线的细胞,而右边和下边压线的细胞不予计算(下图,总体原则是“计上不计下,计左不计右",判断标准为是否接触三条边线的中间线)。如果有多个细胞没有吹散成团存在,此时只可记为一个细胞。如果团块很多,则可能需要重新吹打甚至消化直至绝大多数细胞为单个细胞

细胞培养技术中,细胞计数是一项基本功,对于标准化培养条件以及需要定量的实验来说都关键。这里介绍使用血细胞计数器对细胞进行计数的经典方法以及中间一些需要注意的细节。 制备细胞悬液: 对于贴壁生长的细胞,我们需要使用胰酶消化的方法使细胞从培养皿表面脱落 根据需要加入合适体积的培养基,将细胞进行中和及稀释,以得到均质的细胞悬液。要求尽可能将细胞吹打散开,不要残留任何细胞团 准备血细胞计数器: 使用70%乙醇将盖玻片和血细胞计数器清洁干净 将将盖玻片润湿(使用水或呼一口气,目的是使盖玻片与血细胞计数器接触更紧密,易于粘连),并覆盖至血细胞计数器上 台盼兰染色(可选): 如果需要计算细胞的活力,则需要将细胞悬液和0.4%台盼兰等体积混合 室温孵育3-5分钟,使台盼兰进入死细胞,使死细胞着蓝色 血细胞计数器加样: 使用吸管将细胞悬液或细胞/台盼兰混合液滴加到血细胞计数器计数池的边缘。此时液滴将在虹吸的作用下进入盖玻片下方的计数池 以同样的方式在另一侧的计数池中也加入细胞悬液 将计数板放置几分钟使细胞扩散,同时用吸水纸吸除多余的液体 细胞计数:

6、解冻完成后,依次将血浆解冻袋取出,将血浆去掉解冻袋后放置室温下待用; 7、如果解冻后的血浆温度已经恢复到室温仍未发出,应该将血浆转移到4℃储血冰箱内待用。 八、注意事项 1、解冻箱应使用独立的三芯插座; 2、解冻箱上水时务必连接好排水管,防止加水过量后溢水。 3、发现有破损血浆时需立即换水,并进行清洗。 4、要避免血袋标签等物品落入水箱内,以免堵塞水管,致使水循环系统瘫痪; 5、解冻箱长期不用时,应将解冻箱内的水排尽。 九、保养与维护 1、解冻箱应每周做清洗保养,清洗内外表面; 2、温度校正:每年由计量部门对解冻箱进行温度检测,如发现实测温度与显示温度相差0.5℃以上,应对解冻箱进行校正。

操作规程 一.目的 建立循环水浴箱解冻新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀标准操作规程,规范冰冻血液成分解冻操作流程,血液质量安全。 二. 职责 本科室工作人员应用此操作规程,为临床提供安全的血浆。 三.原理 冰冻血浆融化箱采用电气控制原理,新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀等需要在 37 一 40℃稳定温度条件下,解冻防止蛋白成分析出 ,循环水溶箱可以维持稳定温度的水浴条件,快速、批量解冻冰冻血液制品,解冻速度和血液质量。 四.适用范围 适用于循环水浴箱解冻新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆及冷沉淀操作。 五、器材与试剂 器材:血库融浆机,血浆解冻袋 六、环境条件 温度:20-27℃,湿度≤80% 七、操作程序: 1、连接进水管,排水管,接通电源; 2、打开电源开关,按“启动"键,提示“缺水"状态,拧开水龙头开始加水,直至进水完成,“预温"灯亮; 3、设定解冻温度(一般设定为38℃)及解冻时间(根据解冻血浆数量确定,一般设定在16分钟以上); 4、待预温完成后,水箱水位上升到工作状态; 5、将血浆或冷沉淀从低温冰箱中取出,去掉包装盒,套上解冻袋,放入解冻槽中,盖好解冻箱盖;

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