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微生物常见检测方法的优缺点与工作原理及应用范围!

               微生物常见检测方法的优缺点与工作原理及应用范围! 百欧博伟生物:微生物的检测,无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义。常见的检测方法有:生长量测定法、微生物计数法、生理指标法和商业化快速微生物检测等,本文主要介绍常用的检测方法的的原理,应用范围和优缺点。 微生物生长意味着原生质含量的增加,所以测定的方法也都直接或间接的以次为根据,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量,可以从其重量,体积,密度,浓度,做指标来进行衡量。 一、生长量测定法 1、体积测量法:又称测菌丝浓度法。 原理:通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。 菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有一定偏差。 2、称干重法: 原理:利用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。 3、比浊法: 原理:微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。 4、菌丝长度测量法: 方法:对于丝状真菌和一些放线菌,可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度。 二、微生物计数法 1、血球计数板法: 这种方法简便,直观,快捷,但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数,并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。 2、染色计数法: 为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数,而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足,人们发明了染色计数法。 3、比例计数法: 将已知颗粒(如霉菌孢子或红细胞)浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合,在显微镜视野中数出各自的数目,即可得未知菌液的细胞浓度。 4、液体稀释法: 对未知菌样做连续十倍系列稀释,根据估计数,从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5毫升试样,接种1毫升到3组共15只装培养液的试管中,经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数,然后查最大或然数表MPN(most probably number)得出菌样的含菌数,根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测,例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。 5、平板菌落计数法: 这是一种最常用的活菌计数法。但方法比较麻烦,操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数,而且同时将菌液中的细菌进行了一次分离培养,获得了单克隆。 6、试剂纸法: 在平板计数法的基础上,发展了小型商品化产品以供快速计数用。试剂纸法计数快捷准确,相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。 7、膜过滤法: 用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品,经丫叮橙染色,在紫外显微镜下观察细胞的荧光,活细胞会发橙色荧光,而死细胞则发绿色荧光。 三、生理指标法 微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化,例如酸碱度,发酵液中的含氮量,含糖量,产气量等,与生长量相平行的生理指标很多,它们可作为生长测定的相对值。 1、测定含氮量: 大多数细菌的含氮量为干重的12.5%,酵母为7.5%,霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25,即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多,如用硫酸,过氯酸,碘酸,磷酸等消化法和Dumas测氮气法。 2、测定含碳量: 将少量(干重0.2-2.0 mg)生物材料混入1毫升水或无机缓冲液中,用2毫升2%的K2Cr2O7溶液在100 0C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升,在580nm的波长下读取吸光光度值,即可推算出生长量。需用试剂做空白对照,用标准样品做标准曲线。 3、还原糖测定法: 还原糖通常是指单糖或寡糖,可以被微生物直接利用,通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况,常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。 4、氨基氮的测定: 方法是,离心发酵液,取上清液,加入甲基红和盐酸作指示剂,加入0.02N的NaOH调色至颜色刚刚褪去,加入底物18%的中性甲醛,反应数刻,加入0.02N的使之变色,根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量,可间接反映微生物的生长状况。 5、其他生理物质的测定: P,DNA,RNA,ATP,NAM(乙酰胞壁酸)等含量以及产酸,产气,产CO2(用标记葡萄糖做基质),耗氧,黏度,产热等指标, 都可用于生长量的测定。也可以根据反应前后的基质浓度变化,最终产气量,微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。 四、商业化快速微生物检测法 微生物的检测,其发展方向是快速,准确,简便,自动化,当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理,结合不同的检测方法,设计了形式各异的微生物检测仪器设备,正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。例如: 1、抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术 2、BACTOMETER 全自动各类总菌数及快速细菌检测系统 这些仪器和设备的生产厂家很多,产品各异,在此不做一一介绍,具体可查看各公司的产品说明。 在微生物检验操作过程中,要保证检测环境(如超净台、检测室)以及所用工器具的洁净程度,同时保证人员各种操作的规范性,尽量保证其无菌性,防止因人为原因操作失误而出现误差结果,同时在适宜温度进行培养,为合理决策和指导生产提供依据。为保证检测结果的准确性,我们应做好以下几个方面。 五、培养基的灭菌及使用 1、每次配制时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。 2、培养基配制时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。 3、一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。 4、灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效的灭菌时间。 5、灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。 6、在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水浴温度(先化好的可从水浴取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。 7、做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。 8、每瓶培养基均要做空白。 9、尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。 10、培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。 六、检测环境的维持 1、大环境(检测室) (1)检测时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。 (2)如果在原来的原料微生物检测室进行检测,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。 2、小环境(超净工作台) (1)定期清洁初效过滤器,要及时更换。 (2)检测前,将超净台内部进行清洁,用 75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。 (3)关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。 (4)每次检测后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用 75%酒精进行擦拭消毒。 (5)紫外灯根据其使用寿命要及时更换。 (6)检测同时,要做上相应菌落检测的环境空白。 (7)检测区域的选择: a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作; b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。 七、工器具的洁净度 1、玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。 2、检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。 3、接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌,但要注意检测时要先将接种针(环)进行冷却。 八、样品的采集及检测 1、保证采样器具的无菌性 (1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,容易导致玻璃器皿易裂纹而报废)。 (2)取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。 (3)取样勺:要保证其清洁消毒,清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。 (4)取样袋:可先用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。 (5)电子称表面用 75%酒精消毒。 2、人员操作 (1)保证手部的清洗、消毒:取样前及检测前都要先洗手再消毒。 (2)取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。 (3)取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。 (4)在要求的检测区域进行操作。 (5)检测前,要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。 (6)往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。 (7)样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品从管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。 (8)盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,会将部分微生物烫死;也不能温度太低,不能将样品溶解完全。 (9)进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。 (10)倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右为宜。 (11)做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。 (12)接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况,导致无法判断、确认。 (13)检测完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。 九、微生物的培养 1、在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。 2、要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。 十、思考与讨论 微生物的生长不同于其他生物的生长,微生物的个体生长在科研上有一定困难,通常情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的,因此,微生物的生长通常指群体的扩增。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

操作维护

2024.07.12

淡紫拟青霉与淡紫紫孢菌的区别及作用与使用介绍!

                淡紫拟青霉与淡紫紫孢菌的区别及作用与使用介绍! 淡紫拟青霉(原名淡紫紫孢菌)是一种微生物天敌,可减轻作物线虫病危害。生产工艺包括液态深层发酵和液固两相发酵,可制成纯微生物活孢子制剂。适用于多种作物,如番茄、柑橘等,可通过喷洒、拌种等方式使用。其效果受环境条件影响,需按说明书使用。未发现对环境或人体有害。 一、淡紫拟青霉与淡紫紫孢菌区别 淡紫拟青霉和淡紫紫孢菌是同一种产品,只是名字不同而已。淡紫紫孢菌原名是淡紫拟青霉菌,是高科技生物技术研制开发而成的微生物,属于内寄生性真菌,是一些植物寄生线虫的重要天敌,能够寄生于卵,也能侵染幼虫和雌虫,可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫等植物线虫病的危害。 二、淡紫拟青霉的生产工艺 淡紫拟青霉的生产工艺包括液态深层发酵法、液固两相发酵法等,其具体步骤如下: 1、将淡紫拟青霉菌株接种到灭菌后的液体培养基中进行种子培养得到液体种子。 2、将液体种子接种到以玉米芯粉为主要原料的固体培养基中进行固态发酵,固体培养基经灭菌处理,接种量为 1%-15%,得到发酵产物。 3、将发酵产物采用低温烘干后磨料制粉。 三、淡紫拟青霉的作用 淡紫拟青霉是一种新型纯微生物活孢子制剂,在控制植物病原线虫方面功效卓著,与化学农药相比,具有安全、无毒、无残留、无毒副作用等优势。该菌广泛分布于世界各地,具有功效高、寄主广、易培养等优点,特别在控制植物病原线虫方面功效卓著。半个多世纪以来,国内外许多专家学者对此菌进行了广泛而深入的研究,在生物学、生态学、大量培养、控害效能与田间应用等方面取得了一系列研究成果。 四、淡紫拟青霉的适宜作物 淡紫拟青霉适应的作物包括番茄、柑橘、茄子、黄瓜、西瓜、大豆等。经试验证明,在植物根系周围施用淡紫拟青霉菌剂不仅能明显抑制线虫侵染,而且能促进植物根系及植株营养器官的生长,如播种前拌种,定植时穴施,对种子的萌发与幼苗生长具有促进作用,可实现苗全、苗绿、苗壮,一般可使作物增产 15%以上。 五、淡紫拟青霉的使用方法 淡紫拟青霉可用于线虫的生物防治产品,适应作物包括番茄、柑橘、茄子、黄瓜、西瓜、大豆等。其使用方法有:直接喷洒、拌种、肥料添加等。需要注意的是,淡紫拟青霉的防治效果受到环境温度、湿度、光照等因素的影响,因此在不同的气候条件下需要调整使用方法。 六、淡紫拟青霉对环境、对人是否有危害 目前尚未发现淡紫拟青霉对环境和人有危害的相关报道。但在使用淡紫拟青霉或任何其他农业生物制剂时,应仔细阅读并遵循产品说明书上的使用方法和剂量建议,以确保最佳的使用效果。 七、结论 淡紫拟青霉是一种新型纯微生物活孢子制剂,是一些植物寄生线虫的重要天敌,能够寄生于卵,也能侵染幼虫和雌虫,可明显减轻多种作物根结线虫、胞囊线虫等植物线虫病的危害。该菌可用于线虫的生物防治产品,适应作物包括番茄、柑橘、茄子、黄瓜、西瓜、大豆等。其使用方法有:直接喷洒、拌种、肥料添加等。需要注意的是,淡紫拟青霉的防治效果受到环境温度、湿度、光照等因素的影响,因此在不同的气候条件下需要调整使用方法。目前尚未发现淡紫拟青霉对环境和人有危害的相关报道。但在使用淡紫拟青霉或任何其他农业生物制剂时,应仔细阅读并遵循产品说明书上的使用方法和剂量建议,以确保最佳的使用效果。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

应用实例

2024.07.12

疣孢漆斑菌的保存条件与使用范围及培养方法!

                  疣孢漆斑菌的保存条件与使用范围及培养方法! 疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)属于真菌界非模式菌株。圆形扁平菌落,边缘整齐,黄色,光滑不透明,无迁移性。主要用于土壤微生物资源调查及分类学研究。 一、菌种简介平台编号:Bio-85406 规格:冻干物拉丁属名:Myrothecium Verrucaria 中文名称:疣孢漆斑菌拉丁名称:Myrothecium verrucaria来源历史:←分离收藏时间:2014/9/9原始编号:73原产国:中国资源归类编码:15151916104模式菌株:非模式菌株主要用途:研究生物危害程度:四类 培养基名称:马铃薯、葡萄糖琼脂培养基(PDA)培养基成分:马铃薯提取液 1.0L,葡萄糖 20.0g,琼脂 15.0g,pH自然。[注] 马铃薯提取液:取去皮马铃薯200g,切成小块,加水1.0L煮沸30min,滤去马铃薯块,将滤液补足至1.0L。培养温度:25℃需氧类型:好氧分离基物:空气采集地:北京市朝阳区保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享 用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、菌种的培养1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 三、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。  四、保藏条件斜面菌种和安瓿瓶冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶请置于-20°C 保存。甘油管请置于-80°C 保存;请勿长期置于室温。  五、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支斜面或平板;或直接接种液体培养基,以不超过 5ml 为宜);2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;二次接种量要多,固体斜面培养基水分要少才能让菌体长得比较明显,液体培养要静止培养;3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系;7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;8)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛;9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作;10)甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.12

小鼠BV2小胶质细胞的处理方法与培养步骤及注意事项!

               小鼠BV2小胶质细胞的处理方法与培养步骤及注意事项! 一、细胞介绍 小鼠BV2小胶质细胞来源于德国DSMZ(German collection of microorganisms and cell cultures),源于C57BL/6小鼠小胶质细胞,表达核v-myc、染色体v-raf癌基因,表面表达envgp70抗原,在形态学、表型及功能上有吞噬细胞的特征。 二、细胞特性 1、来源:小鼠脑 2、形态:上皮细胞样 松散贴壁,悬浮和贴壁细胞混合生长 3、含量:>1x106 细胞数 4、规格:T25瓶或者1mL冻存管包装 5、用途:仅供科研使用。 三、细胞的运输和保存 干冰运输及复苏好存活细胞:(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。 四、细胞接收后的处理方法 1、收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。 2、请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。 3、半贴细胞和贴壁不牢(悬浮)细胞:T25瓶置于37℃培养箱中约2-3h,显微镜下观察细胞的情况,若细胞密度在60%以下,客户需收集T25瓶中的悬浮细胞离心后用完全培养基重悬后打回到原培养瓶中继续培养,若细胞生长70%-90%对细胞进行传代,传代时需要收集培养基中悬浮的细胞离心后回收。 4、备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代。 五、细胞培养步骤 (一)培养基及培养冻存条件准备: 1、准备DMEM 基础培养基 87% 优质胎牛血清 10% GlutaMAX-1谷氨酰胺 1% HEPES 1M Buffer solution 1% P/S青霉素-链霉素 1%. 2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度。 3、冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。 (二)细胞处理: 1、冻存细胞的复苏: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。 2、细胞传代:如果细胞密度达70%-90%,即可进行传代培养。 该细胞为悬浮和轻微的贴壁细胞,传代可以参考以下方法: 1、收集:将培养瓶中的悬浮的细胞收集到离心管中。用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。由于细胞贴壁不牢PBS润洗后细胞会脱落所以PBS也要回收到离心管中。 2、加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培养瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL)置于37℃培养箱中消化1-2分钟(难消化的细胞可以适当延长消化时间),然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml含10%FBS的培养基来终止消化。 3、将收集到的悬浮细胞、pbs清洗液中的细胞和消化下来的贴壁细胞以1000rpml离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。 3)细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。 下面T25瓶为例; 1、细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×106~1×107个活细胞/ml. 2、1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×106~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。 3、将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。 六、注意事项 1、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 2、建议在复苏冻存细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意:冻存管浸没在液氮中会泄漏,并会慢慢充满液氮。解冻时,液氮转化成气相可能导致容器爆炸或用危险力吹掉其盖子,从而产生飞扬的碎屑造成人员伤害。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.12

基因编辑和实验技术:科技进步有望深化与细菌的和谐关系!

         基因编辑和实验技术:科技进步有望深化与细菌的和谐关系! 细菌虽无复杂思维和语言,但科技使我们可解读其基因和行为。通过基因编辑和实验技术,我们可了解细菌功能特性,预测其行为。日常中,我们通过卫生习惯等与细菌交流。未来,科技进步有望深化与细菌的和谐关系。 在浩瀚的宇宙之中,地球是一个充满生命奇迹的蓝色星球。在这颗星球上,除了人类和其他动植物,还居住着数以万亿计的微小生命——细菌。它们无处不在,存在于空气、土壤、水源,甚至我们的身体内。一直以来,我们对细菌的认知大多停留在它们是疾病传播的源头,或是生态系统中的重要组成部分。然而,随着科技的进步,我们不禁要问:我们能跟细菌“聊天”吗? 首先,我们需要明确一点,细菌并非像人类一样拥有复杂的思维能力和语言系统。它们没有像人类那样的神经系统和大脑,无法产生主观意识和情感。因此,从字面意义上来说,我们无法与细菌进行直接的“对话”。但是,这并不意味着我们无法与细菌进行交流。 近年来,随着基因编辑技术和微生物学的发展,我们已经能够深入了解细菌的基因组结构、代谢途径以及它们与宿主之间的相互作用。通过解析细菌的基因序列,我们可以了解到它们的功能和特性,甚至可以预测它们在某些环境下的行为。这就像是我们在阅读一本关于细菌的“书籍”,通过解读这本书,我们能够了解它们的“想法”和“行为”。 此外,科学家们还开发出了各种先进的实验技术,如荧光标记、单细胞测序等,这些技术使得我们能够实时监测细菌在体内的活动情况,从而揭示它们在疾病发生、发展过程中的作用机制。通过这些实验数据,我们可以对细菌进行“询问”,了解它们在特定条件下的生理状态和反应。 当然,与细菌的交流并不仅限于科学实验室。在我们的日常生活中,我们也在与细菌进行着一种特殊的“交流”。比如,我们通过保持卫生习惯、接种疫苗等方式来减少有害细菌对我们的侵害;同时,我们也通过摄入益生菌、使用抗生素等方法来调节体内菌群平衡,促进健康。这些行为实际上是在与细菌进行一种无声的“对话”,试图在两者之间找到一种平衡和和谐。 然而,尽管我们已经取得了许多关于细菌的研究成果,但我们仍然面临着许多挑战和未知。细菌的种类繁多,且它们之间以及它们与宿主之间的相互作用关系复杂多样。目前,我们仍然无法完全理解所有细菌的功能和特性,也无法预测它们在所有情况下的行为。因此,与细菌的“交流”仍然是一个漫长而充满挑战的过程。 不过,随着科技的不断发展,我们有望在未来实现更加深入和全面的与细菌的“交流”。比如,通过开发更先进的基因编辑技术和实验方法,我们可以更加精确地操控细菌的基因组和行为;同时,通过大数据分析和人工智能技术的应用,我们可以对海量的微生物数据进行挖掘和分析,从而揭示细菌与宿主之间更加复杂的相互作用关系。 总之,虽然我们不能直接与细菌进行语言上的交流,但我们可以通过科学的方法和手段来解读它们的“语言”和“行为”。这种特殊的“交流”方式不仅有助于我们更好地了解细菌本身,还有助于我们更好地应对由细菌引起的各种挑战和问题。在未来,随着科技的进步和我们对微生物世界的深入了解,我们有望与细菌建立更加和谐、共赢的关系,共同创造一个更加美好的世界。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2024.07.12

微生物基本知识:细胞学技术的一般环节及操作方法!

                微生物基本知识:细胞学技术的一般环节及操作方法! 一、纺锤体阻断剂(Spindle inhibitor) 在有丝分裂过程中,随着纺锤丝的形成,染色体被牵引到一起难以观察其形态。纺锤体的形成在于细胞质和纺锤体成分的粘度之间的平衡,因此,改变细胞质的粘度,即可破坏纺锤体形成,从而使得染色体均匀散开,且染色体缢痕区更为清楚。 在培养中使用的纺锤体阻断剂为秋水仙素,在终止培养前加入适量秋水仙素,使正在分裂的细胞停留在中期,以获得大量分裂相供分析之用。秋水仙素的浓度范围比较宽,一般使用浓度0.05—0.8微克/毫升,在终止培养前处理2—4小时。但在实际工作中需要借助浓度和处理时间来控制染色体的收缩程度。秋水仙素作用时间越长,被阻断的中期分裂相越多,但是染色体也越凝聚和收缩,所以还视各实验室经验而定。 二、低渗液(hypotonic solution) 低渗液是指渗透压和离子强度均低于正常细胞生理条件的溶液,例如水、低渗的柠檬酸钠或氯化钠、甘油磷酸钾(0.65M)、氯化钾(0.075M)等。低渗效果取决于低渗液的化学组成、低渗的温度和处理时间。低渗处理是凭借反渗透作用使细胞膨胀染色体铺展,同时可使粘附于染色体的核仁物质散开,以便能在一个平面上观察所有染色体形态。 实验室中一般选用0.075M KCl为低渗液(具体情况取决于实际操作,鉴于实验的连续性和稳定性,本实验室采用0.35%KCl),其优点有:①染色体轮廓清楚,可染色性强,染色时间短,②用于显带染色时能充分显示带型特点。 低渗处理为37℃,15-25分钟,以预实验条件为准。 三、固定液 固定液的重要特性是能迅速穿透细胞,将其固定并维持染色体结构的完整性,还要能够增强染色体的嗜碱性,达到优良染色效果。 单纯的固定液一般难以达到这些要求,因此在实验中使用两种混和的固定液。由于Carnoy首先使用的甲醇和冰乙酸混合液而称的卡诺氏固定液是效果良好的固定液。Carnoy固定液(甲醇:冰乙酸=3:l)每次使用前需临时配制,长时间放置影响固定效果,固定时间15分钟至24小时,冰箱、室温均可。必要时可改变甲醇和冰乙酸的比例,冰乙酸比例增加,利于细胞膨胀、染色体铺展,但易导致细胞破裂、染色体散失。 四、滴片 滴片使细胞悬液从一定高处落在载玻片上,淋巴母细胞膜破裂,染色体分散开。载玻片可用冰片和干片,效果均好。滴片后需空气干燥。 五、Giemsa染色 Giemsa染料不是一种单一染料,而是天青、伊红、甘油和甲醇的混合物,配制后原液储存。在常规染色中,并不比其他染料优越,但在显带技术中,却是无可比拟的。 Giemsa工作液在使用前临时配制,浓度可在2.5-10%之间(原液2份加pH7.4磷酸缓冲液10-40份)。染色后,染色质呈红色,细胞核是蓝色。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

操作维护

2024.07.12

鲁氏不动杆菌的使用范围及培养方法与实验内容!

                 鲁氏不动杆菌的使用范围及培养方法与实验内容! 鲁氏不动杆菌,具有反硝化能力。具体用于分类、研究,具有处理养殖废水潜力。 一、菌种简介平台编号:Bio-33626 规格:培养物 拉丁属名:Acinetobacter Lwoffii 中文名称:鲁氏不动杆菌拉丁属名:Acinetobacter种名加词:lwoffii Bouvet and Grimont收藏时间*:2006-3-28来源历史:森防总站        原产国:中国资源归类编码:15131114102模式菌株:非模式菌株主要用途:研究;教学具体用途:具耐贫瘠基因,可做基因工程出发菌生物危害程度:四类致病对象:无分离基物:空气采集地区:湖北武汉采集具体地点:南湖培养基信息:培养基编号: 141 培养基名称: BP琼脂培养温度:28资源保护类型:培养物保藏方法:定期移植法共享方式:资源交换性共享提供形式:斜面培养物实物状态:有实物用途:具耐贫瘠基因,可做基因工程出发菌 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 三、实验内容1、称量→溶化→调ph→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 四、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。  五、保存方法1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。2、悬液保存法:①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。3、载体保存法:土壤保存法;砂土保存法;硅胶保存法;磁珠保存法;麸皮保存法;纸片(滤纸)保存法。4、常用的冷冻保存法:①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。 六、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 支斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.12

小鼠肾小管平滑肌细胞的使用方法与注意事项!

                   小鼠肾小管平滑肌细胞的使用方法与注意事项! 一、细胞简介小鼠肾小管平滑肌细胞分离自肾组织;肾小管是与肾小囊壁层相连的细长上皮性小管,具有重吸收和排泌功能,在排泄代谢产物、维持机体体液平衡及酸碱平衡方面起关键作用。肾小管按不同的形态结构、分布位置和功能,主要分为近曲小管、髓袢和远曲小管三部分。小鼠肾小管平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。 二、产品信息平台编号:Bio-73823 规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶 细胞信息:原代细胞 细胞名称:小鼠肾小管平滑肌细胞培养条件:原代细胞取组织现分培养基:MCM基础培养基,FBS,Penicillin,Streptomycin等;换液频率:每2-3天换液一次生长特性:贴壁细胞形态:呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形传代特性:可3-5代消化液:0.25%胰蛋白酶培养条件:气相:空气,95%;CO2,5%用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 三、使用方法小鼠肾小管平滑肌细胞是一种贴壁细胞,细胞形态呈呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形,在澳睿赛技术部标准操作流程下,可传3-5代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。1、取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。2、贴壁细胞消化1)吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;3)用吸管轻轻吹打混匀,按传代比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基。          3、细胞收货脱落1)收集所有细胞悬液,1000rpm,离心5min,保留沉淀;2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至离心管中,重悬沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱静置5-7min);消化完向离心管内加入5ml完全培养基终止消化;3)经1000rpm,离心5min,丢弃上清,用5ml完全培养基(补加1%FBS,促进贴壁)重悬沉淀,接种于新的培养瓶内;4)待细胞完全贴壁后,培养观察;之后按照换液频率更换新鲜的完全培养基(37℃预热)。4、细胞实验因原代细胞贴壁特殊性,贴壁的原代细胞在消化后转移至其他实验器皿(如玻璃爬片、培养板、共聚焦培养皿等)时,需要对实验器皿进行包被,以增强细胞贴壁性,避免细胞因没贴好影响实验;包被条件常选用鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚赖氨酸PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%),依据细胞种类而定。悬浮/半悬浮细胞无需包被。 四、注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。5、客户在细胞培养过程中,有任何技术问题可以拨打技术售后服务电话,我们随时给予解答。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.11

ATCC 29544 阪崎氏年轻泰坦杆菌阪崎克罗诺杆菌

                ATCC 29544 阪崎氏年轻泰坦杆菌阪崎克罗诺杆菌 一、菌种简介平台编号:Bio-85085 规格:冻干物拉丁属名:Cronobacter Sakazakii 中文名称:阪崎氏年轻泰坦杆菌(阪崎克罗诺杆菌)拉丁名称:Cronobacter sakazakii其它保藏中心编号:=DSM 4485=ATCC 29544=NCTC 11467=WDCM 00214来源历史:←DSMZ←ATCC收藏时间:2016/6/15原始编号:CDC 4562-70原产国:美国资源归类编码:1513112105模式菌株:模式菌株主要用途:分类;研究特征特性:革兰氏阴性杆菌;双倍乳糖胆盐培养基中44.5℃培养生长,产气不产酸;靛基质实验阴性。在伊红美蓝琼脂培养基上的菌落西瓜红色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润。DNA 杂交参照菌株。具体用途:分类学研究。生物危害程度:四类培养基编号:CM0002培养基名称:营养肉汁琼脂培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。培养温度:30℃需氧类型:好氧分离基物:小孩喉咙处保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:分类学研究。 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、储存条件冻干菌种和试管斜面请置于 2-8冷藏。西林瓶菌种请置于-20冷冻。 三、培养条件1、培养基编号:CM0002 营养肉汁琼脂2、培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入 5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。推荐使用商品化成品培养基。3、需氧类型:好氧4、培养温度:36 四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。 五、打管说明书1、西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖,注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入 0.2ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。2、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲破裂处。菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要转接至 2-3 代恢复活力。4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。5、暂不启开的安瓿管应于 4中保藏(特殊除外)。冻干管打开后需一次用完,不能留存。6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。7、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。8、如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理。9、甘油管使用:使用本甘油菌时可以不用完全融解,在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用,但随着冻融次数的增加,细菌的活力会逐渐下降。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.11

食品微生物学检验的基本原则和要求及操作方法!

                  食品微生物学检验的基本原则和要求及操作方法! 一、范围 本标准规定了食品微生物学检验基本原则和要求。 本标准适用于食品微生物学检验。 二、实验室基本要求 1、检验人员  2、环境与设施 3、实验设备 4、检验用品 5、培养基和试剂 6、质控菌株 三、实验室基本要求 1、检验人员 应具有相应的微生物专业教育或培训经历,具备相应的资质,能够理解并正确实施检验。 应掌握实验室生物安全操作和消毒知识。 应在检验过程中保持个人整洁与卫生,防止人为污染样品 应在检验过程中遵守相关安全措施的规定,确保自身安全 有颜色视觉障碍的人员不能从事涉及辨色的实验。 2、环境与设施 ①实验室环境不应影响检验结果的准确性。 ②实验区域应与办公区域明显分开。 ③实验室工作面积和总体布局应能满足从事检验工作的需要,实验室布局宜采用单方向工作程,避免交叉污染。 ④实验室内环境的温度、湿度、洁净度及照度、噪声等应符合工作要求。 ⑤食品样品检验应在洁净区域进行,洁净区域应有明显标示。 ⑥病原微生物分离鉴定工作应在二级或以上生物安全实验室进行。 3、实验设备 实验设备应满足检验工作的需要,常用设备见A.1。 实验设备应放置于适宜的环境条件下,便于维护清洁、消毒与校准,并保持整洁与良好的工作状态。 实验设备应定期进行检查和/或检定(加贴标识)维护和保养,以确保工作性能和操作安全。 实验设备应有日常监控记录或使用记录。 4、检验用品 检验用品应满足微生物检验工作的需求,常用检验用品见A.2 检验用品在使用前应保持清洁和/或无菌。 需要灭菌的检验用品应放置在特定容器内或用合适的材料(如专用包装纸、铝箔纸等)包裹或加塞,应保证灭菌效果。 检验用品的储存环境应保持干燥和清洁,已灭菌与未灭菌的用品应分开存放并明确标识。 灭菌检验用品应记录灭菌的温度与持续时间及有效使用期限。 5、培养基和试剂 培养基和试剂的制备和质量要求按照GB4789.28的规定执行。 6、质控菌株 实验室应保存能满足实验需要的标准菌株。 应使用微生物菌种保藏专门机构或专业权威机构保存的、可溯源的标准菌株。 标准菌株的保存、传代按照GB4789.28的规定执行。 对实验室分离菌株(野生菌株),经过鉴定后,可作为实验室内部质量控制的菌株 四、样品的采集 1、采样原则: 样品的采集应遵循随机性、代表性的原则。 采样过程遵循无菌操作程序,防止一切可能的外来污染。 2、采样方案 2.1根据检验自的、食品特点、批量、检验方法、微生物的危害程度等确定采样方案 2.2采样类型 二级采样方案设有n、c和m值 三级采样方案设有n、C、m和M值 n:同一批次产品应采集的样品件数 c:最大可允许超出m值的样品数。 m:微生物指标可接受水平的限量值(三级采样方案)或最高安全限值(三级采样方案) M:微生物指标的最高安全限量值 注1:二级采样方案在n个样品中 允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值大于m值 注2:三级采样方案在n个样品中 允许全部样品中相应微生物指标检验值小于或等于m值; 允许有≤c个样品其相应微生物指标检验值在m值和M值之间; 不允许有样品相应微生物指标检验值大于M值。 按采样方案的结果判定 按三级采样方案设定的指标:n=5,c=2,m= 100CFU/g,,M= 1000CFU/g 若5个样品的检验结果均小于或等于m值(≤100CFU/g)  √ 若≤2个样品位于m和M之间(100CFU/g 若3个及以上样品的检验结果位于m值和M值之间   X 若有任一样品的检验结果大于M值(> 1000CFU/g )  X 2.3各类食品的采样方案按食品安全相关标准的规定执行。 2.4食品安全事故中食品样品的采集: a)由批量生产加.工的食品污染导致的食品安全事故,食品样品的采集和判定原则按第2条和第3条执行,重点采集同批次食品样品。 b)由餐饮单位或家庭烹调加工的食品导致的食品安全事故重点采集现场剩余食品样品,以满足食品安全事故病因判定和病原确证的要求。 3、各类食品的采样方法 ①预包装食品 应采集相同批次、独立包装、适量件数的食品样品,每件样品的采样量应满足微生物指标检验的要求。 独立包装小于、等于1000g的固态食品或小于、等于1000mL的液态食品,取相同批次的包装。 独立包装大于1000mL的液态食品,应在采样前摇动或用无菌棒搅拌液体,使其达到均质后采集适量样品,放入同一个无菌采样容器内作为一件食品样品;大于1000g的固态食品,应用无菌采样器从同一包装的不同部位分别采取适量样品,放入同一个无菌采样容器内作为一件食品样品。 ②散装食品或现场制作食品: 用无菌采样工具从n个不同部位现场采集样品,放入n个无菌采样容器内作为n件食品样品。每件样品的采样量应满足微生物指标检验单位的要求。  4、采集样品的标记  应对采集的样品进行及时、准确的记录和标记,内容包括采样人、采样地点、时间、样品名称、来源、 批号、数量、保存条件等信息。  5、采集样品的贮存和运输 应尽快将样品送往实验室检验。 应在运输过程中保持样品完整。 应在接近原有贮存温度条件下贮存样品,或采取必要措施防止样品中微生物数量的变化。  五、检验 1、样品处理  1.1 实验室接到送检样品后应认真核对登记,确保样品的相关信息完整并符合检验要求。  1.2 实验室应按要求尽快检验。若不能及时检验,应采取必要的措施,防止样品中原有微生物因客 观条件的干扰而发生变化。  1.3 各类食品样品处理应按相关食品安全标准检验方法的规定执行。 2、样品检验  按食品安全相关标准的规定进行检验。  六、生物安全与质量控制  1、实验室生物安全要求  应符合 GB19489的规定。 2、质量控制  实验室应根据需要设置阳性对照、阴性对照和空白对照,定期对检验过程进行质量控制。 实验室应定期对实验人员进行技术考核。  七、记录与报告  1、记录  检验过程中应即时、客观地记录观察到的现象、结果和数据等信息。  2、报告  实验室应按照检验方法中规定的要求,准确、客观地报告检验结果。  八、检验后样品的处理  检验结果报告后,被检样品方能处理。  检出致病菌的样品要经过无害化处理。 检验结果报告后,剩余样品和同批产品不进行微生物项目的复检。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

参数原理

2024.07.11

践行大食物观:微生物蛋白引领人类食物新发展!

                  践行大食物观:微生物蛋白引领人类食物新发展! 百欧博伟生物:你能否想象,一个小小的菌株,加了葡萄糖和水,放在发酵罐里,就可以变出蛋白质来? 微生物因其独特的生物学特性而备受瞩目,也逐渐成为高效蛋白质生产的理想选择。全球植物蛋白和动物蛋白的人均需求量和年需求量都在显著增长。针对日益增长的蛋白需求,传统蛋白质生产方式压力渐增,“向植物动物微生物要热量、要蛋白”的“大食物观”正在不断被实践,利用微生物构建“蛋白工厂”来生产各类功能性蛋白质,已成为当前生命科学研究的热点。包括微生物蛋白在内的替代蛋白产业,正迎来高速发展期。 究竟什么是微生物蛋白?发展微生物蛋白产业的意义是什么?行业发展中还面临哪些挑战?在日前举办的首届全国微生物蛋白技术创新及产业发展大会上,多位专家、学者给出了权威的解答。 微生物蛋白脱颖而出 在健康消费趋势的推动下,近几年,全球营养健康食品行业逐渐向更多元化的营养维度发展。其中,微生物蛋白成为全球营养健康的重要趋势之一,其不仅含有较动物蛋白、植物蛋白更高的蛋白含量,还具有低糖、低脂肪、低胆固醇等特点。 “我们通过微生物发酵来产出蛋白,主要原料是葡萄糖。它打破了传统的从牛肉、鸡肉、大豆等获取蛋白的方式。我们常开玩笑说:‘把鸡养到了罐子里,这个鸡就长得更快了’。”富祥药业董事长包建华告诉上海证券报记者,随着合成生物学的发展,现已催生出前沿的蛋白质生产模式——微生物“蛋白工厂”。原来养鸡三四十天获得的鸡肉蛋白含量,现在五个小时就能“养好”。 除了人群健康观念的提高和科学技术的突破,发展微生物蛋白产业背后还有更为深远的战略意义。 记者了解到,全球人口持续增长,预计到2050年将突破100亿大关,届时粮食供应将呈供不应求态势。另外,肉类养殖对于环境的影响也是替代蛋白发展的主要推动因素,更多的企业选择低碳、可持续的蛋白生产方式。波士顿咨询公司发布的市场数据显示,预计2035年,替代蛋白市场规模将达2900亿美元。 “2022年我国肉类缺口已超过500万吨。大豆进口量和进口金额占整个粮食进口的62%和74%。” 中国工程院院士 、江南大学教授陈坚表示,目前,我国动物蛋白缺口较大,优质蛋白质自给率不足。而微生物蛋白能显著提高着蛋白制造效率。 陈坚表示,与大豆种植生产蛋白相比,二氧化碳发酵微生物蛋白产量可提升13.6倍,同时将显著提升人类健康水平,改进地球生态质量。如果到2050年用微生物蛋白替代全球20%的牛肉消费,每年能减少56%的森林砍伐和与之相关的碳排放量。“它能更好地满足人类日益增长的蛋白需求,进一步满足国家战略需求,保障食物供给安全。”陈坚说。 中国农业科学院质量标准与检测技术研究所研究员金芬介绍,目前,很多国家开始对替代蛋白产业进行积极政策鼓励,包括监管审核合作辅助与资金赞助等。我国已开始积极扶持替代蛋白产业发展。 市场空间巨大 在产业上,替代蛋白在安全性、营养适配性、价格等方面朝着甩开传统产品束缚和替代的方向奔跑。来自Future Market insights的数据显示,全球替代蛋白质市场预计稳健增长,在未来十年将以19%的复合年增长率达到4230亿美元规模。 华福证券所长助理、大消费首席分析师刘畅认为,作为替代蛋白,当微生物蛋白产品在环保、高价值的基础上,具备了价格上的关键优势,必将激发消费者的热情,市场会迅速扩大。尽管微生物蛋白在供应链和技术端还有成本下降的空间,但目前来看已具备一定优势。从相对价格而言,以酵母蛋白(归属于微生物蛋白)为例,虽然其相较传统蛋白价格高10%至15%,但其营养和风味更佳,性价比更高,消费者接受度明显较高。 近几年,国际上通过糖源、有机废弃物、废弃二氧化碳等原料开发微生物蛋白的企业,在产业化进展、融资和战略合作、科研突破等方面新闻不断。一些全球领先企业的产品,在消费者测试后也收获了良好的反馈。 国内企业早已开始行动,积极布局。华创证券研究所所长董广阳介绍,目前中国布局发酵蛋白的企业中,依托酵母、菌丝体、微藻或利用生物质发酵、精密发酵技术,衍生出不同的技术路径,其中安琪酵母、富祥药业依托生物质发酵,商业化进程领先。就下游应用而言,依托真菌的生物质发酵产物可用于肉制品制作,或作为添加剂加入食品饮料中以增加营养,用途较为广泛。 除了食品领域,微生物蛋白的产业发展还有更大的想象空间。刘畅介绍,在医药领域,由于微生物蛋白的可编辑性,或将成为药物载体、生物材料和生物仿制药等的成分,也可配合成为特医食品。在化工领域,得益于微生物的代谢能力和对环境条件的适应能力,或可用于生物燃料、生物传感器、生物修复等领域。而受益于微生物蛋白的生物活性,其在皮肤护理、个护产品等方面均有可能打造新爆款。 落实大食物观 仍需各界合力护航 微生物蛋白质生产的迅猛发展不仅是一种趋势,更是传统蛋白质生产模式的转变。通过利用快速繁殖和基因多样性进行高效、可控的合成,推动医疗和科技领域的突破与创新,为生命科学和工程技术带来更多可能性。“微生物蛋白作为生物发酵新的赛道和新的业态,它的健康发展对于加快发展新质生产力、打造生物发酵新的增长引擎具有重要意义。”中国生物发酵产业协会理事长于学军表示。 “其中,企业是第一责任人,产品安全性以及功能性等要搞清楚。”国家食品安全风险评估中心主任、中国食品科学技术学会副理事长李宁表示,从政府、研究机构来讲,要加强食品安全风险评估的关键技术研究,评估技术要跟上产业的发展。 李宁介绍,目前,我国批准了以小麦低聚肽、食叶草在内的植物蛋白,以酵母单位为代表的微生物蛋白、藻类蛋白,以及昆虫蛋白在内的多种替代蛋白。在替代蛋白安全性评估的技术储备方面,国家食品安全风险评估中心也积极跟踪替代蛋白的全球发展动态和前沿技术,梳理我国替代蛋白的研发情况、详细生产技术路线和工艺参数,研究采集基础数据,研究安全性评估关键技术,研究标准和政策保障体系等等。 在李宁看来,落实大食物观,发展新质生产力,需要各界合力为替代蛋白产业发展保驾护航,例如国家相关政策有待进一步完善,产业仍需加强技术创新和产品质量保证、加强安全性评估关键技术研发、加强科普宣教以及加强国内外合作交流。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2024.07.11

绵皮卧孔菌的形态特征与生态习性及经济用途!

                  绵皮卧孔菌的形态特征与生态习性及经济用途! 绵皮卧孔菌,多孔菌科卧孔菌属真菌。多孔菌科、卧孔菌属。子实体薄,膜状近革质,平伏生于基物表而不易剥离,一般向四周扩展,形态不规则。 一、菌种简介平台编号:Bio-32939 规格:培养物 拉丁属名:Postia Placenta 中文名称:绵皮卧孔菌拉丁属名:Postia种名加词:placenta (Fr.) M.J. Larsen & Lombard收藏时间*:2005-3-1来源历史:Forintek Canada Corp.原产国:加拿大资源归类编码:15151700000模式菌株:非模式菌株主要用途:研究;教学具体用途:用于木材防腐试验生物危害程度:四类致病对象:无培养基信息:培养基编号: 14 培养基名称: PDA培养温度:24资源保护类型:培养物保藏方法:定期移植法共享方式:资源交换性共享提供形式:斜面培养物实物状态:有实物用途:用于木材防腐试验 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、形态特征子实体薄,膜状近革质,平伏生于基物表而不易剥离,一般向四周扩展,形态不规则。基层白色,厚约1mm,似棉絮状菌丝侵入树皮及木质部的皮层。子实体边缘薄而无子实层。菌管长0.5-2mm,新鲜时乳白色,干后变为木材白色至淡褐色,常有不规则的线状龟裂,从而露出基层棉絮状菌丝。管口与菌管同色,圆形或多角或成波状菌丝。管口与菌管同色,圆形成多角形或成波曲的多角形,每毫米有2-4个管孔,管口全缘或稍有齿裂。担子棒状,具4小梗。孢子卵圆形,有内含物。 三、生态习性生于针叶树枯木、倒木、原木和建筑木上。 四、分布地区吉林、广东、华北等。 五、经济用途属重要木腐菌,腐朽力很强,引起树木、原木、建筑木材及铁路枕木褐色腐朽。可产生葡萄糖酸[D-gluconic acid,CH2OH(CHOH)4COOH]。 六、微生物菌种的培养1、孢子制备⑴ 放线菌孢子的制备一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于放线菌孢子的形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。放线菌斜面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。⑵ 霉菌孢子的制备霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。2、种子制备⑴ 摇瓶种子制备摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和完全,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。⑵ 种子罐种子制备种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。 七、实验内容1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 八、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2024.07.11

小鼠骨骼肌卫星细胞的实验室分离方法与质量检测!

                小鼠骨骼肌卫星细胞的实验室分离方法与质量检测! 小鼠骨骼肌卫星细胞(skeletalmusclesatellitecell)是位于肌细胞膜和基膜之间的具有增殖和分化潜力的生肌干细胞,这些细胞对于出生后骨骼肌的生长和再生具有重要的意义。骨骼肌卫星细胞(通常以静息状态存在于肌纤维肌膜与基底膜之间,在一定条件下可以被激活,发生增殖和分化,形成骨骼肌细胞。 一、菌种简介平台编号:Bio-105909 规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶细胞信息:原代细胞 产品名称:小鼠骨骼肌卫星细胞组织来源:骨骼肌组织产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、细胞简介小鼠骨骼肌卫星细胞分离自四肢肌肉组织;骨骼肌又称横纹肌,肌肉中的一种,约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞,肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌,横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官,有丰富的血管、淋巴分布,在躯体神经支配下收缩或舒张,进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状,不分支,有明显横纹,核很多,且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带(Ⅰ带)及暗带(A带)。明带染色较浅,而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间,有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段,叫做一个肌节。肌卫星细胞指骨骼肌中除骨骼肌纤维(肌细胞)外的一种扁平、有突起的细胞。着于肌纤维(肌细胞)表面;当肌纤维(肌细胞)受损后,肌卫星细胞可增殖分化,参与肌纤维(肌细胞)的修复,因此具有干细胞性质。 三、方法简介实验室分离的小鼠骨骼肌卫星细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合多次差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。 四、质量检测实验室分离的小鼠骨骼肌卫星细胞经Desmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 五、培养信息包被条件 PLL(0.1mg/ml) 培养基 含FBS、马血清、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 换液频率 每2-3天换液一次 生长特性 贴壁 细胞形态 成纤维细胞样 传代特性 可传1-3代左右 消化液 0.25%胰蛋白酶 培养条件 气相:空气,95%;CO2,5% 小鼠骨骼肌卫星细胞体外培养周期有限;建议使用专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2024.07.11

哈茨木霉菌与枯草芽孢杆菌的区别与功能及作用!

                  哈茨木霉菌与枯草芽孢杆菌的区别与功能及作用! 哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌是农业中常用的微生物,在分类、特征和作用方面存在差异,但都可用于生物防治、促进植物生长和改良土壤。它们可结合使用,提高防治效果和土壤质量。使用时需遵循科学方法和剂量,根据具体情况选择。 哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌都是在农业生产中广泛应用的微生物,但它们在很多方面存在差异。 生物学分类:哈茨木霉菌属于真菌界,而枯草芽孢杆菌属于细菌界。 形态特征:哈茨木霉菌的菌丝体较为发达,可以形成分生孢子梗和分生孢子。枯草芽孢杆菌则是一种革兰氏阳性的芽孢杆菌,通常以芽孢的形式存在。 生长条件:哈茨木霉菌对环境的要求相对较高,喜欢温暖潮湿的环境,而枯草芽孢杆菌的适应性更强,能够在多种环境条件下生长。 作用方式:哈茨木霉菌主要通过菌丝体的生长和蔓延,与病原菌竞争营养和空间,同时产生抗生素等物质来抑制病原菌的生长。枯草芽孢杆菌则主要通过产生芽孢、抗生素和其他生物活性物质来发挥作用。 哈茨木霉菌与枯草芽孢杆菌的功能和作用 虽然哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌在分类和特征上有所不同,但它们在农业生产中都具有重要的功能和作用。 生物防治:哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌都可以用于生物防治,抑制病原菌的生长和繁殖,减少病害的发生。它们可以降低农药的使用量,减少对环境的污染。 促进植物生长:这两种微生物可以通过释放植物生长调节剂、分解土壤中的有机质等方式,改善植物的生长环境,促进植物的生长和发育,提高作物的产量和品质。 土壤改良:它们可以增加土壤肥力,改善土壤结构,提高土壤的通气性和保水性。 提高植物的抗逆性:哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌可以增强植物对逆境的抵抗力,如干旱、盐碱等,使植物更好地适应环境变化。 综合应用 在实际应用中,哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌常常被结合使用,以发挥它们的协同作用。例如,可以将哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌制成生物菌剂,用于种子处理、土壤处理或叶面喷施等。这样的综合应用可以提高生物防治的效果,同时改善土壤质量和植物的健康状况。 需要注意的是,在使用哈茨木霉菌和枯草芽孢杆菌等微生物制剂时,要遵循科学的使用方法和剂量,以确保其有效性和安全性。此外,不同的微生物制剂在不同的作物和环境条件下可能效果会有所差异,因此需要根据具体情况进行选择和使用。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2024.07.11

生物药品实验室的安全设施与环保节能及智能化管理!

                 生物药品实验室的安全设施与环保节能及智能化管理! 百欧博伟生物:生物药品实验室设计需遵循安全第一、效率至上原则,合理布局、配置安全设施、注重环保节能及智能化管理。通过这些措施,可打造安全高效的实验室环境,促进生物药品领域创新发展。 生物药品实验室,一个充满神秘色彩的高科技领地,是众多科学家们探索生命奥秘、研发新药的重要舞台。那么,如何打造一个既安全又高效的生物药品实验室呢?今天,就让我们一起揭开生物药品实验室设计的神秘面纱,探寻其中的奥秘吧! 首先,我们要明确生物药品实验室的设计原则:安全第一,效率至上。在实验室的设计过程中,我们要充分考虑实验室的安全性和实用性,确保科研人员能够在安全、舒适的环境中开展工作。 接下来,让我们从以下几个方面来探讨生物药品实验室的设计方案: 一、合理布局 生物药品实验室的布局要合理,既要满足实验需求,又要确保实验室内的通风、采光等条件良好。实验区、准备区、仪器区、存储区等各个功能区域要划分清晰,方便科研人员快速找到所需物品,提高工作效率。 二、安全设施 生物药品实验室的安全设施至关重要。实验室应配备专业的生物安全柜、防火设备、紧急洗眼器等,确保在突发情况下能够迅速应对,保障科研人员的安全。此外,实验室的通风系统也要设计得当,避免有害气体和微生物的扩散。 三、环保节能 在生物药品实验室的设计中,我们还要注重环保节能。采用节能型设备、合理利用自然光、优化通风系统等方式,降低实验室的能耗和碳排放,为地球环保贡献一份力量。 四、智能化管理 随着科技的发展,智能化管理在生物药品实验室设计中也发挥着越来越重要的作用。通过引入智能监控、自动化控制等技术手段,实现对实验室环境的实时监控和自动调节,提高实验室的管理水平和运行效率。 总之,生物药品实验室的设计是一项复杂而精细的工作,需要充分考虑实验室的安全性、实用性、环保性和智能化管理等方面。通过合理的布局、安全设施的配置、环保节能的设计以及智能化管理的应用,我们可以打造一个既安全又高效的生物药品实验室,为科研人员提供更好的工作环境,推动生物药品领域的创新发展。 在这个充满挑战与机遇的时代,让我们一起携手努力,共同探索生物药品实验室设计的更多可能性,为人类的健康和福祉贡献更多的智慧和力量! 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统,超低温冰箱,生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下,为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。 除此之外,我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

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2024.07.10

微生物世界的小巨人:细菌的多样性与重要性!

                   微生物世界的小巨人:细菌的多样性与重要性! 细菌作为生物界中的一类单细胞微生物,具有极其广泛的分布和多样的形态。它们通常具有细胞壁、细胞膜、核糖体等基本结构,缺乏细胞核和明显的细胞器。细菌的分类依据其形态、代谢方式、遗传物质等多个方面进行,可分为球菌、杆菌、螺旋菌等多种类型。细菌的存在历史悠久,对地球的生物多样性和生态平衡有着深远的影响。下面,本文分析细菌的多样性与重要性,介绍细菌的相关知识点。 一、细菌的生态分布 细菌的生态分布极其广泛,几乎存在于地球上的每一个角落。它们可以在空气、土壤、水体、生物体内外等多种环境中生存和繁衍。在不同的生态位中,细菌扮演着不同的角色,如土壤中的固氮菌、水体中的光合细菌等。它们的存在和活动不仅影响着生态系统的结构和功能,还参与着全球的物质循环和能量流动。 二、代谢途径的多样性 细菌的代谢途径多样,可以通过多种方式进行能量获取和物质转化。例如,部分细菌可以通过光合作用将光能转化为化学能,合成有机物;部分细菌可以通过厌氧呼吸等方式,在缺氧条件下生存和繁衍。这种代谢途径的多样性使得细菌能够适应不同的环境条件和生存需求,进而在生态系统中发挥着重要的作用。 三、细菌与人类健康 细菌与人类健康的关系密切。一方面,许多细菌是人体肠道等部位的正常菌群,它们参与着人体的代谢和免疫调节,对人体健康有益。另一方面,部分细菌也是致病的病原体,能够引起多种疾病,如肺炎、痢疾、伤寒等。因此,对细菌的深入研究和有效防控对于维护人类健康具有重要意义。 四、食品安全与农业 在食品安全和农业领域,细菌也发挥着重要作用。食品在生产、加工和储存过程中可能会受到细菌的影响,如果控制不当,就可能导致食品变质和食物中毒等问题。同时,细菌也是农业生态系统中的重要组成部分,它们可以促进土壤肥力的提高和植物的生长发育等。因此,对细菌的深入研究和合理应用对于提高食品安全和农业生产效率具有重要意义。 五、环境治理与保护 在环境治理与保护方面,细菌也扮演着重要的角色。一些细菌能够分解和转化环境中的有机物和污染物,如污水处理中,活性污泥内的细菌可以有效地去除水中的有机污染物。此外,一些特殊细菌还可以用于生物修复和生物治理等领域,如利用部分细菌对重金属的吸附和转化能力进行土壤修复等。因此,对细菌的研究和应用对于环境治理和保护具有重要的作用。 六、生物技术应用 在生物技术领域,细菌也是重要的研究对象和应用工具。例如,在基因工程中,可以利用细菌作为载体来表达和生产人类所需的蛋白质药物等;在发酵工程中,可以利用细菌的代谢特性来生产酒精、乳酸、抗生素等产品。此外,在生物传感器、生物检测等领域,细菌也发挥着重要的作用。 总之,细菌作为微生物世界的小巨人,对人类本身及社会的发展具有十分重要的影响,需要不断探究与探索。无论是在食品安全与农业方面,还是在环境治理与保护以及生物技术应用方面,细菌都发挥着出色的作用。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.10

解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在农业应用上的差异!

               解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在农业应用上的差异! 解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在农业应用上具有重要地位,二者作用不同,各有优缺点。解淀粉芽孢杆菌能分解有机物,促进植物生长,但稳定性较差;枯草芽孢杆菌适应性更强,稳定性好,但作用效果较慢。根据农业生产需求和环境条件选择合适的芽孢杆菌制剂,并合理使用,可达到最佳效果。 在农业生产中,微生物制剂的应用越来越广泛。其中,解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌是两种常见的芽孢杆菌,它们在农业领域都有着重要的应用。本文将深入探讨这两种芽孢杆菌在农业应用上的差异、作用以及各自的优缺点。 一、解淀粉芽孢杆菌 1、作用 解淀粉芽孢杆菌是一种革兰氏阳性菌,具有很强的淀粉酶活性,能够分解淀粉、蛋白质和脂肪等有机物质。它在农业中的应用主要体现在以下几个方面: (1)促进植物生长:解淀粉芽孢杆菌可以产生一些植物生长调节剂,如生长素、赤霉素等,从而促进植物的生长和发育。 (2)土壤改良:这种芽孢杆菌能够分解土壤中的有机质,增加土壤肥力,改善土壤结构,提高土壤通透性。 (3)抗病抗逆:它可以产生一些抗菌物质,对多种病原菌具有抑制作用,有助于提高植物的抗病能力。 (4)环境修复:解淀粉芽孢杆菌对一些有机污染物具有降解作用,可用于农田土壤的污染修复。 2、优缺点 解淀粉芽孢杆菌的优点是作用效果明显,能快速分解土壤中的有机物,为植物提供养分。然而,它的缺点也很明显,如稳定性较差,容易受到环境因素的影响,导致效果不稳定。 二、枯草芽孢杆菌 1、作用 枯草芽孢杆菌是一种广泛存在于土壤中的芽孢杆菌,具有很强的适应性和生命力。它在农业中的应用主要包括: (1)生物防治:枯草芽孢杆菌可以产生多种抗菌素,对多种病原菌和害虫具有抑制或杀灭作用,可用于生物防治。 (2)促进肥料吸收:该菌能够分解土壤中的固定态氮、磷、钾等营养元素,提高肥料利用率,减少化肥的使用。 (3)改善土壤微生态:它可以与其他有益微生物协同作用,改善土壤微生态环境,提高土壤肥力。 (4)增强植物免疫力:枯草芽孢杆菌能诱导植物产生抗性,提高植物的免疫力,减少病害的发生。 2、优缺点 枯草芽孢杆菌的优点是适应性强,能在多种环境条件下生存和繁殖,稳定性好。然而,它的缺点是作用效果相对较慢,需要一定的时间才能发挥作用。 三、解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在农业应用上的差异 1、作用方式 解淀粉芽孢杆菌主要通过分解有机物为植物提供养分,而枯草芽孢杆菌则主要通过生物防治、促进肥料吸收和改善土壤微生态等方式发挥作用。 2、适应环境 解淀粉芽孢杆菌对环境的适应性相对较差,而枯草芽孢杆菌则具有很强的适应性,能在多种环境条件下生存和繁殖。 3、作用效果 解淀粉芽孢杆菌的作用效果较快,但稳定性较差,而枯草芽孢杆菌的作用效果相对较慢,但稳定性好。 四、结论 综上所述,真心惠农解淀粉芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌在农业应用上各有特点和优势。在实际应用中,需要根据具体的农业生产需求和环境条件,选择合适的芽孢杆菌制剂,并合理使用,以达到最佳的效果。同时,也需要不断探索和研究新的芽孢杆菌资源,开发出更多更好的微生物制剂,为农业可持续发展提供有力支持。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.10

细胞培养过程中细菌污染的来源与影响及预防措施!

                细胞培养过程中细菌污染的来源与影响及预防措施! 百欧博伟生物:细胞培养实验中,细菌污染是常见问题,源于实验室环境、人员、试剂及培养基等。污染影响细胞生长与实验结果,需采取清洁、消毒、无菌操作等预防措施。发现污染应及时停止实验并清理消毒。 在细胞培养实验中,细菌污染是一个常见且需要关注的问题。细菌污染可能源于多个环节,不仅影响了细胞的生长与实验结果,还可能导致整个实验项目的失败。因此,了解细菌污染的来源、不良影响及预防措施,对于保证细胞培养实验的成功至关重要。 细胞培养过程中细菌污染的主要来源: 1、实验室内的环境、人员、试剂及培养基等都可能成为细菌污染的潜在来源。 2、实验室空气中的细菌、操作台面的污染、实验人员的衣物和手部的细菌等都可能通过直接接触或间接传递的方式污染细胞培养物。 3、使用被细菌污染的培养基、血清或其他试剂也是细菌污染的重要来源。 细菌污染对细胞实验的不良影响: 1、细菌的生长会竞争培养基中的营养成分,导致细胞营养不足,生长缓慢或停滞。 2、细菌可能产生有毒代谢产物,直接损害细胞结构,引起细胞死亡。 3、细菌污染还会干扰细胞的正常生理功能,影响实验结果的分析和解读。 避免细菌污染的有效预防措施: 1、实验室应保持清洁、整洁,定期进行消毒处理。使用德国MB公司生产的Mycoplasma Off 不仅能预防支原体污染,也能预防细菌污染。 2、实验台面、培养箱、移液器等设备应定期清洁,确保无菌状态。 3、 实验人员应严格遵守实验室规范,穿戴专用的实验服和手套,避免直接接触细胞培养物。4、实验人员应定期进行手部清洁和消毒,以减少细菌的传播。 5、使用无菌试剂和培养基也是预防细菌污染的关键措施。在试剂和培养基使用前,应进行无菌检查,确保其未被细菌污染。 6、加强对细胞培养物的观察和检测。一旦发现细胞培养物中出现浑浊、异味或细胞形态异常等情况,应立即停止实验,并进行细菌污染的检测。常用的检测方法包括显微镜观察、细菌培养等。一旦确认存在细菌污染,应立即对污染细胞进行清理和消毒,并对实验环境进行重新评估和调整。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得最优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

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2024.07.10

NHA人星形胶质细胞的性质与用途及生产工艺!

                    NHA人星形胶质细胞的性质与用途及生产工艺! 一、细胞简介平台编号:Bio-133524 规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息:NHA 细胞名称:NHA人星形胶质细胞产品类别:人源细胞系生长特性:贴壁生长培养体系:DMEM(高糖)+10%FBS传代方法:1:2传代细胞形态:上皮细胞样冻存条件:无血清细胞冻存液保存条件:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)细胞描述:本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。 用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、细胞特性1)组织来源于人的正常脑组织。2)细胞鉴定:神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色法。3)经鉴定细胞纯度高于90%。4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5)细胞生长方式:梭形细胞,贴壁培养。 三、产品的运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 四、细胞收到后处理方法细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松) 五、细胞培养步骤1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4.按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。3)细胞冻存:1、细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;2、添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;3、用适量的冻存液(FBS:DMSO=9:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;4、先将细胞冻存管放置于-20℃1.5h,然后将其移入-80℃。 六、注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2024.07.10

胎牛血清批次间差异验证的方法与意义及结论!

                    胎牛血清批次间差异验证的方法与意义及结论! 胎牛血清在生物医药领域应用广泛,批次间差异影响实验结果。本文采用细胞培养实验、蛋白质组学分析、生化指标检测和功能性实验等方法验证差异,确保实验质量,优化培养条件,降低实验成本和风险。 胎牛血清在生物医药领域具有广泛的应用,然而,不同批次之间的差异可能会对实验结果产生影响。因此,验证胎牛血清批次间差异具有重要意义。 胎牛血清是细胞培养中常用的培养基补充剂,可提供营养物质、生长因子和激素等,支持细胞的生长和增殖。然而,胎牛血清作为一种生物制品,其成分可能因不同来源,导致不同批次之间存在差异。 一、方法 细胞培养实验:通过使用不同批次的胎牛血清进行细胞培养实验,观察细胞形态、增殖速率和表型等指标的差异。 蛋白质组学分析:利用质谱等技术比较不同批次胎牛血清中蛋白质的组成和丰度,发现差异蛋白。 生化指标检测:测定不同批次胎牛血清中的生化指标,如蛋白含量、脂质含量、生长因子浓度等。 功能性实验:进行细胞增殖、分化、凋亡等功能性实验,评估不同批次胎牛血清对细胞生物学行为的影响。 二、意义 确保实验结果的可重复性和可比性:验证胎牛血清批次间差异有助于选择稳定性更好的胎牛血清,并确保实验结果的一致性。 提高实验的准确性:了解不同批次胎牛血清的差异有助于更准确地设计实验方案和解释实验结果。 优化细胞培养条件:根据不同批次胎牛血清的特点,优化细胞培养条件,提高细胞培养效率和细胞生长质量。 降低实验成本和风险:避免使用质量不稳定的胎牛血清可能导致的实验失败和数据不可信。 三、结论 验证胎牛血清批次间差异是保证细胞培养实验质量和可靠性的重要步骤。综合运用细胞培养实验、蛋白质组学分析、生化指标检测和功能性实验等方法,可以全面评估胎牛血清不同批次之间的差异,并为选择合适的胎牛血清提供科学依据。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得最优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

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2024.07.09

益生菌在养殖业中的应用:提升水质、增效增产!

                益生菌在养殖业中的应用:提升水质、增效增产! 百欧博伟生物:随着水产养殖业的不断发展,益生菌作为一种生物制剂,在水产养殖中的应用越来越广泛。益生菌可以改善水体环境、增强养殖动物的免疫力、促进消化吸收等,对于提高养殖效益和保障水产健康起着重要作用。 1、凝结芽孢杆菌 凝结芽孢杆菌是一种常见的水产养殖益生菌,可以促进养殖动物的消化吸收,改善水质环境,降解废物和氨氮等有害物质,减少病原微生物的滋生,提高水产养殖的产量和质量。 2、乳酸菌 乳酸菌在水产养殖中被广泛应用,主要作用是调节水体的微生物群落结构,抑制有害菌的生长,促进有益微生物的繁殖,提高水质,增强养殖动物的免疫力,预防和控制水产病害。 3、酵母菌 酵母菌可以促进养殖动物的消化吸收,增强饲料的利用率,提高养殖动物的生长速度和免疫力,减少饲料的浪费,降低养殖成本,是一种理想的水产养殖益生菌。 4、双歧杆菌 双歧杆菌在水产养殖中也有一定的应用,主要作用是促进养殖动物的肠道健康,维持肠道菌群平衡,增强免疫力,降低疾病发生率,提高养殖动物的生长性能和抗逆能力。 5、枯草芽孢杆菌 枯草芽孢杆菌在水产养殖中主要用于水质改善和废物降解,能够有效降解有机废物和氨氮等有害物质,净化水体,改善养殖环境,提高养殖效益。 6、益生菌复合制剂 除了单一种类的益生菌外,还有一些益生菌复合制剂被广泛应用于水产养殖中。这些复合制剂通常包含多种益生菌,具有多种功能,如改善水质、促进动物生长、增强免疫力等。益生菌复合制剂能够综合发挥各种益生菌的优势,提高养殖效益,是目前水产养殖中常用的一种产品形式。 7、藻类益生菌 藻类益生菌是指生活在水中的微型藻类,如硅藻、绿藻等,它们具有丰富的营养价值和生物活性成分。在水产养殖中,添加适量的藻类益生菌可以改善水质、提高水产动物的免疫力和抗病能力,同时也可作为一种天然饵料,为水产动物提供丰富的营养。 8、生态菌剂 生态菌剂是一种由多种有益微生物组成的生态制剂,可以改善养殖水体的微生物结构,净化水质,降解废弃物质,提高水产养殖系统的稳定性和抗逆性。生态菌剂的应用有助于建立健康的养殖环境,降低养殖过程中的环境风险,提高养殖水产的品质和产量。 水产养殖中的益生菌种类繁多,为水产养殖业的发展带来了新的思路和方法,同时也为提高水产产品的质量、增加养殖效益、减少养殖环境污染等方面提供了有力支持。合理选择和利用这些益生菌,可以提高养殖效益,保障水产健康,实现水产养殖的可持续发展。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.09

浅黄绿假单胞菌的菌株培养与实验方法及使用范围!

                浅黄绿假单胞菌的菌株培养与实验方法及使用范围! 浅黄绿假单胞菌是Pseudomonas属的微生物,原产地为中国。TSA培养基,28℃培养24 h,菌落浅黄色,圆形,表面湿润,不透明,边缘整齐。菌体呈杆状,0.4-0.5×0.7-1.3 μm,单个或成对排列,革兰氏阴性。主要用途为研究,具体用途为发酵普洱茶中优势菌。  一、菌种简介平台编号:Bio-116106 规格:冻干物 拉丁属名:Pseudomonas Lurida 中文名称:浅黄绿假单胞菌拉丁名称:Pseudomonas lurida来源历史:←自行分离收藏时间:2017-10-16原始编号:HY1原产国:中国资源归类编码:15131134101模式菌株:非模式菌株主要用途:研究特征特性:TSA培养基,28℃培养24 h,菌落浅黄色,圆形,表面湿润,不透明,边缘整齐。菌体呈杆状,0.4-0.5×0.7-1.3 μm,单个或成对排列,革兰氏阴性。具体用途:发酵普洱茶中优势菌。生物危害程度:四类培养基编号:CM0847培养基名称:胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)(CAIQ0701)培养基成分:胰蛋白胨 15.0g,大豆胨 5.0g,氯化钠 5.0g,琼脂 13.0 g,蒸馏水 1.0L,pH7.3±0.2。推荐使用商品化成品培养基。培养温度:28℃需氧类型:好氧分离基物:普洱茶(鲜叶)采集地:云南勐海保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享提供形式:冻干物用途:发酵普洱茶中优势菌。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 三、实验内容1、称量→溶化→调ph→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 四、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。  五、保存方法1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。2、悬液保存法:①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。3、载体保存法:土壤保存法;砂土保存法;硅胶保存法;磁珠保存法;麸皮保存法;纸片(滤纸)保存法。4、常用的冷冻保存法:①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。 六、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 支斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.09

人多发性骨髓瘤细胞的复苏与传代及冻存操作说明!

                 人多发性骨髓瘤细胞的复苏与传代及冻存操作说明! 细胞简介平台编号:Bio-106085 规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶 细胞信息:OPM2/OPM-2 细胞名称:人多发性骨髓瘤细胞OPM2产品规格:T25培养瓶x1;1.5ml冻存管x2细胞数量:1x10^6;1x10^6保存温度:37℃;-198℃运输方式:常温保温运输;干冰运输安全等级:1用途限制:仅供科研3类培养体系:DMEM高糖+10%FBS+1%三抗培养温度:37℃二氧化碳浓度:5%简介:人多发性骨髓瘤细胞OPM2取自56岁女性供体。该细胞源于DSMZ。用途:细胞系 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 细胞复苏操作说明(针对冻存细胞)实验仪器:超净工作台 ,CO2 培养箱 ,倒置显微镜 ,水浴锅 ,离心机实验试剂:DMEM 培养基 ,胎牛血清 ,三抗实验材料:T25 细胞培养瓶 ,需复苏的细胞 ,移液枪 ,枪头 ,离心管实验步骤:1、从液氮罐中取出冻存管 ,直接浸入 37℃温水中 ,并不时摇动令其尽快融化。2、从 37℃水浴中取出冻存管 ,打开盖子,移液枪吸出细胞悬液 ,加到离心管并滴加 5 倍以上完全培养基并混匀。3、操作离心,调至 1000 转/分 ,时长 10 分钟4、弃去上清液,重悬离心管底部细胞沉淀,在 T25 培养瓶中加入 5-6ml 完全培养基,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养。5、次日更换一次培养液,继续培养。6、注意:冻存细胞建议三管一起复苏到一个 T25 培养瓶中。 细胞传代操作说明(贴壁细胞)实验仪器:超净工作台 ,CO2 培养箱,倒置显微镜,离心机实验试剂:DMEM 培养基,胎牛血清,0.25%胰酶 ,三抗实验材料:T25 细胞培养瓶,需传代的细胞,移液枪,枪头 ,离心管实验步骤:1、细胞于培养箱中,愈合度达到 80% ,可进行传代。2、按 T25 培养瓶计,吸出完全培养基,并 PBS 缓冲液轻冲 3 遍,添加 0.25%含 EDTA 胰酶 2ml ,消化 2min(具体时间视细胞而定),后用完全培养基将细胞冲洗下来。1000r/min 离心 10 min ,弃上清收集细胞,铺至 2 个 T25 培养瓶中培养,各添加 7ml 完全培养基。3、注意:消化时间不易过长,消化前血清成分务必去除干净,终止消化请用新鲜完全培养基,原瓶培养基不可继续使用(终止消化或传代)。  细胞传代操作说明(悬浮细胞)实验仪器:超净工作台 ,CO2 培养箱 ,倒置显微镜,离心机实验试剂:DMEM 培养基 ,胎牛血清 ,三抗实验材料:T25 细胞培养瓶,需传代的细胞 ,移液枪,枪头 ,离心管实验步骤:1、细胞于培养箱中,密度达到悬浮细胞传代标准(沉降后可铺满底面),可进行传代。2、按 T25 培养瓶计,吹打均匀,吸出完全培养基,1000r/min 离心 10 min,弃上清收集细胞,铺至 2 个T25 培养瓶中培养,各添加 7ml 完全培养基。3、注意:原瓶培养基不可继续使用(传代)。 细胞冻存操作说明实验仪器:超净工作台,CO2 培养箱,倒置显微镜,离心机实验试剂:DMEM 培养基,胎牛血清,0.25%胰酶 ,三抗 ,DMSO实验材料:T25 细胞培养瓶,需冻存的细胞,移液枪,枪头 ,离心管,冻存管,记号笔实验步骤:1、取待冻存的细胞(按 T25 计 )用 0.25EDTA 胰酶 2ml 消化 2min ,用完全培养基将细胞冲洗下来。1000r/min 离心 10min ,弃上清收集细胞。如果是悬浮生长的细胞,则可直接离心收集细胞。2、加入 1ml 冻存液(90%FBS+10%DMSO )制成细胞悬液。3、细胞悬液装入 3 支冻存管中。4、冻存管在 4℃下存放 30 min ,转放-20℃ 1.5~2 h ,再转人-70℃ 4-12 h 后即可转移到液氮内(- 196℃) ,并登记。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2024.07.09

基利恩帚枝霉的培养方法与注意事项及打管说明!

                 基利恩帚枝霉的培养方法与注意事项及打管说明! 基利恩帚枝霉是Sarocladium属的微生物,原产地为中国。子囊菌门,盘菌亚门,粪壳菌纲,肉座菌亚纲,肉座菌目。主要用途为教学,研究。  一、菌种简介平台编号:Bio-13208 规格:冻干物 拉丁属名:Sarocladium Kiliense 中文译名:基利恩帚枝霉拉丁学名:Acremonium kiliense原始编号:652菌株来源:←中国科学院微生物研究所直接来源国家:中国保藏时间:3/16/1960生物危害:四类模式菌株:非模式菌株培养温度:25-28℃培养基:0014    提供形式:冻干物用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 三、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、菌种恢复培养前,建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,如在说明建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成,有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、恢复培养厌氧菌时,在操作过程中应严格控制厌氧条件:制作培养基时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气,使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org)。 五、冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂(应避免过多水蒸气影响菌种的复苏),用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。2、用无菌吸管吸取 0.3ml(建议勿超过 0.5ml)适宜的液体培养基(不添加琼脂),滴入管内,轻轻振荡,待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状,在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中(不超过 2 支,单位所提供的培养基配方中有琼脂,请务必做成试管斜面,配方中没有琼脂,试管中液体培养基不超过 5ml),并在建议的条件下静止培养。3、冻干管打开后需一次用完,不能留存。另外,安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。6、菌种复苏时,请务必记录好菌种的编号和制备批号,否则不予售后。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2024.07.09

用于研究和生产及产脂肪酶的:浅黄色假单胞菌

                  用于研究和生产及产脂肪酶的:浅黄色假单胞菌 浅黄色假单胞菌是Pseudomonas属的微生物,原产地为中国。菌落呈浅黄色,专性需氧,革兰氏染色阴性,无芽胞,无荚膜,细胞呈杆状或略弯。具端鞭毛,能运动。适温为34℃。主要用途为分类;研究;教学。  一、菌种简介平台编号:Bio-60413 提供形式:冻干物拉丁属名:Pseudomonas Lurida 中文名称:浅黄色假单胞菌拉丁名称:Pseudomonas lurida来源历史:←天津科技大学(11174)收藏时间:2008/1/23原始编号:2008/1/16原产国:中国资源归类编码:15131134101模式菌株:非模式菌株主要用途:研究;生产特征特性:杆菌,0.7-0.8×2.3-2.8μm,以极生的丛毛运动,无芽胞,不需要有机生长因素,营养多样化。能利用一碳化合物意外的碳化合物作为唯一的碳源。能利用乳酸盐,琥珀酸盐和葡萄糖。具体用途:产脂肪酶生物危害程度:四类培养基编号:CM0033培养基名称:LB培养基(LB Medium)培养基成分:蛋白胨 10.0g,酵母粉 5.0g,NaCl 10.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。培养温度:26-30℃需氧类型:好氧分离基物:土壤采集地:天津保存方法:真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:研究;生产;产脂肪酶 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、产品特点1、菌种功能明确、品种稳定、应用;2、产品仅限用于科研本品芽孢含量高,稳定性好、耐高温和挤压;3、繁殖能力快、定植能力强、易存活、耐受低pH值环境;4、复活迅速,可在短期内成为优势种群;5、本品安全高效、无抗药性、不污染环境;6、对多数抗生素不敏感,可与低浓度抗革兰氏阴性菌抗生素同时使用。 三、产品优势1、产品质量稳定,是为科研和提供微生物菌种资源共享服务的专业平台。2、国内首创封闭管包装,冻干后的菌株使用时添加配套的复苏培养基后迅速而完全溶解。针对不同的菌株提供八种不同的培养方法,保证菌种的复苏质量。3、严格的质检程序,确保产品质量的稳定性。4、该类产品广泛使用到食品、药品、化妆品、水产品、化工等行业,疾控中心、质检局、出入境、药检局等等,得到广泛好评。 四、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 五、使用范围(1)合成培养基。合成培养基的各种成分完全是已知的各种化学物质。这种培养基的化学成分清楚,酿酒酵母菌组成成分精确,重复性强,而且微生物在这类培养基中生长较慢。如高氏一号合成培养基、察氏(Czapek)培养基等。 (2)天然培养基。由天然物质制成,如蒸熟的马铃薯和普通牛肉汤,前者用于培养霉菌,后者用于培养细菌。这类培养基的化学成分很不恒定,也难以确定,但配制方便,营养丰富,培养效果好,所以常被采用。 (3)半合成培养基。在天然有机物的基础上适当加入已知成分的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养物质的需要。 六、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.09

首届全国微生物蛋白技术创新及产业发展大会在景召开!

              首届全国微生物蛋白技术创新及产业发展大会在景召开! 百欧博伟生物:即日,首届全国微生物蛋白技术创新及产业发展大会在景德镇召开。大会由中国生物发酵产业协会主办,江西富祥药业股份有限公司与江南大学未来食品科学中心共同承办,本次会议以“推动微生物蛋白创新,加快发展新质生产力”为主题,旨在推动微生物蛋白领域的创新与发展,加速新质生产力的培育与提升。 中国工程院院士吴清平、陈坚、谢明勇,江西省发展改革委副主任李庆红、景德镇市副市长高晓云、国家食品安全风险评估中心李宁主任、江南大学副校长堵国成莅临会议。中国生物发酵产业协会理事长于学军出席了会议。企事业单位、高等院校、科研机构、地方政府、证券投资、媒体领域代表400余人参加了会议。堵国成主持大会开幕式。 高晓云在致辞中指出,景德镇是享誉世界的千年瓷都,也是蓬勃发展的产业之城。近年来,景德镇以国家陶瓷文化传承创新试验区建设为统领,坚持文化立市、工业强市、贸易兴市“三手”同向发力,大抓产业、大抓招商,构建了“陶瓷、航空、精细化工和医药”+文化旅游+其他优势产业的“3+1+X”特色产业体系。而微生物蛋白产业作为生物经济的重要组成部分,在保障国家粮食安全、促进健康消费、推动绿色发展等方面具有重要作用。景德镇将秉承开放包容、合作共赢的理念,与各位携手共进、共创未来! 江西富祥药业董事长包建华在致辞中欢迎与会的领导、专家和嘉宾,他表示富祥药业将围绕微生物蛋白生产工艺优化、技术创新和下游产品开发等方面深入研究,将继续发挥好企业创新主力军作用,与业界人士共同推动中国微生物蛋白新质生产力发展。 据介绍,近年来,我国生物制造产业自主创新力显著增强,装备水平快速提高,绿色制造大幅提升,节能减排成效显著。以生物发酵为代表的生物制造产业2023年,主要产品产值约3300亿元,同比增长约4.5%;出口量约736万吨,同比增长约12.7%。微生物蛋白作为生物发酵新的赛道和新的业态,它的健康发展对于加快发展新质生产力、打造生物发酵新的增长引擎具有重要意义。中国生物发酵产业协会将搭建好平台,促进行业交流,加快微生物蛋白的规范健康发展,不断推动我国生物发酵产业由“大国”向“强国”迈进。 南昌大学教授、中国工程院院士谢明勇主持了院士主旨报告。广东省科学院微生物研究所名誉所长、中国工程院院士吴清平在题为《中国野生食药用菌资源科学大数据库构建及其高效开发利用》的主旨报告。江南大学教授、中国工程院院士陈坚院士,合肥工业大学教授、食品与生物工程学院院长徐宝才。国家食品安全风险评估中心主任、中国食品科学技术学会副理事长李宁,中国农业科学院质量标准与检测技术研究所研究员金芬,江西富祥药业副董事长、高级工程师李惠跃,华创证券研究所所长董广阳先后发言。 此外,大会还分别就产业发展趋势、研究进展、行业技术应用创新、食品风味等方面作出报告和探讨。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2024.07.09

ATCC 11563草绿色气球菌的性质与用途及生产工艺!

               ATCC 11563草绿色气球菌的性质与用途及生产工艺! 一、菌种简介平台编号:Bio-107296 规格:冻干粉 拉丁属名:Aerococcus Viridans 中文名称:草绿色气球菌拉丁名称:Aerococcus viridans来源历史:ATCC原始编号:ATCC 11563=NCTC 8251=ICPB 4307模式菌株:否主要用途:M58797 生物安全级别:GR1培养基编号:35、114培养温度:37℃培养时间:24-48h需氧类型:需氧分离基物:空气样品采集地:**保存方法:冷冻干燥管保藏用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、培养方法1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。 三、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。 四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、菌种恢复培养前,建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,如在说明建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成,有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、恢复培养厌氧菌时,在操作过程中应严格控制厌氧条件:制作培养基时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气,使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org)。 五、冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂(应避免过多水蒸气影响菌种的复苏),用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。2、用无菌吸管吸取 0.3ml(建议勿超过 0.5ml)适宜的液体培养基(不添加琼脂),滴入管内,轻轻振荡,待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状,在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中(不超过 2 支,单位所提供的培养基配方中有琼脂,请务必做成试管斜面,配方中没有琼脂,试管中液体培养基不超过 5ml),并在建议的条件下静止培养。3、冻干管打开后需一次用完,不能留存。另外,安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。6、菌种复苏时,请务必记录好菌种的编号和制备批号,否则不予售后。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.08

小鼠巩膜成纤维细胞的运输和保存及培养操作步骤!

                小鼠巩膜成纤维细胞的运输和保存及培养操作步骤! 小鼠巩膜成纤维细胞分离自巩膜组织,巩膜是眼球壁的主要组成之一。是眼球纤维膜的后5/6部分。前方联接角膜,后方与视神经的鞘膜延续。巩膜在视神经穿出部附近厚,愈前愈薄,在肌腱附着处又复增厚。其与角膜交界处,外面有环形的角膜沟,深部有巩膜静脉窦。小儿的巩膜为浅蓝色,成年为白色,老年因脂肪沉着而带黄色。巩膜结构坚韧,有支持和保护眼内组织的作用。 一、细胞简介平台编号:Bio-132542 规格:5×10⁵Cells/T25培养瓶 细胞信息:原代细胞 细胞名称:小鼠巩膜成纤维细胞细胞用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准) 二、细胞详述巩膜是眼球外围的白色部分,眼球壁的最外一层,由致密的胶原和弹力纤维构成,其结构坚韧,不透明。巩膜前缘接角膜缘,后方与视神经的硬膜鞘相延续。巩膜组织由巩膜成纤维细胞和胶原纤维等细胞外基质构成。巩膜细胞外基质赋予巩膜一定的生物力学性能以保护眼内容物。 三、细胞特性1)组织来源于实验动物的正常眼组织。2)细胞鉴定:波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性。3)经鉴定细胞纯度高于90%。4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5)细胞生长方式:梭形,不规则细胞,贴壁培养。 四、产品的运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于  1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存 1个月。2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过 85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。 五、产品使用1)本产品仅能用于科研2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核3)本产品未通过用于活体诊断的审核 六、细胞培养操作1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。2.加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3.按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。4.将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。 下面 T25 瓶为类;1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆脱落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2、4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻存管做好标识。3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2024.07.08

细黄链霉菌的形态与性状特征及生态分布与经济用途!

              细黄链霉菌的形态与性状特征及生态分布与经济用途! 一、知识简介 细黄链霉菌是链霉菌属放线菌。其代谢产物中含有生长素、抗菌素、苯乙酸、琥珀酸及细胞分裂素等作物生长所必须的生长调节剂成分,具有转化土壤中氮、磷、钾,提高土壤肥力,减少化肥用量;抑制病菌繁殖,防病保苗;刺激细胞分裂,促进作物生根、发芽、成熟,提高作物产量;促进有效物质合成,显著提高农产品的品质等作用,达到“增产增收、保水养田、抑制病害、提高品质”四效合一的功效。 二、基本信息 中文学名:细黄链霉菌 拉丁学名:Streptomyces microflavus 界:细菌界 门:放线菌门 纲:放线菌纲 目:放线菌目 科:链霉菌科 属:链霉菌属 种:细黄连霉菌种 三、形态特征 细黄链霉菌,孢子丝直或柔曲。孢子卵圆形至杆状,表面光滑。有发育良好的分枝菌丝,菌丝无横隔,分化为营养菌丝、气生菌丝 细黄链霉菌 、65孢子丝。孢子丝再形成分生孢子。孢子丝螺旋形,螺旋数目一般1~3圈。孢子柱形,0.8×1.3~1.7微米。 四、性状特征 葡糖天冬素琼脂:气丝粉黄色,出现迟晚。甘油天冬素琼脂(ISP)、无机盐淀粉琼脂(ISP):气丝淡黄色。基丝反面灰黄色至黄褐色、橄榄褐色、褐色。无可溶色素。苹果酸钙琼脂:无气丝。基丝菌落细小,黄色。 营养琼脂:气丝出现迟晚,黄粉色。基丝黄色。酵母精麦芽精琼脂(ISP)、燕麦粉琼脂(ISP):气丝黄灰色、淡黄色。基丝灰黄色至黄褐色、橄榄褐色、褐色。无可溶色素。 马铃薯块:无气丝。基丝微黄色,粘团状。 明胶液化快。牛奶迅速凝固并胨化。淀粉水解强。纤维素上生长少。硝酸盐还原。不产生类黑色素和H2S。利用D-葡萄糖、D-木糖、D-果糖、L-鼠李糖、D-甘露醇;蔗糖利用报道不同;L-阿拉伯糖利用可疑。不利用棉子糖和肌醇。据说是产生链丝菌素(streptothricin)的一个类型,抑制革兰氏阳性和阴性细菌。  五、生态分布 生态分布:已报道的有千余种,主要分布于土壤中。 代表菌株:CBS12418=ISP5331。瓦氏的代表菌株:IMRU3332,ATCC13,231。  六、经济用途 细黄链霉菌产生纺锤菌素;产生螺旋霉素,对革兰氏阳性及阴性细菌、酵母菌、丝状真菌都有抑制作用。常用于农业上防病保苗;同时可作菌肥,能转化土壤中氮磷元素提高土壤肥力,并有刺激作物生长作用。 欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

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2024.07.08

显微镜油浸系的使用方法与操作步骤及日常维护与保养!

             显微镜油浸系的使用方法与操作步骤及日常维护与保养! 一、目的要求 1、正确掌握使用及护理显微镜的方法,特别是油浸系的使用及护理。 2、认识细菌的基本形态和构造。 二、操作步骤 1、普通光学显微镜的构造 普通光学显微镜包括机械部分和光学部分两部分。机械部分包括镜座、镜臂、镜筒、载物台、物镜转换器、粗调节螺旋、细调节螺旋、标本夹等。光学部分包括接目镜、接物镜、反光镜、光圈(虹采)、聚光镜(集光器)等。 2、油浸系的原理 浸系是在油浸镜与标本之间加1滴香柏油,调整光源检查细菌标本的方法。油浸镜是一种高倍放大的物镜,一般都刻有放大倍数,如95x、100x等。其镜头标记国产镜多用“油”字表示,国外产品则用“Oil”(Oil Immersion)或HI(homogeneous Immersion)表示。而且油镜的镜身较高倍镜和低倍镜为长,镜片最小,这也是识别的另一种标志。其使用原理是:由于香柏油与玻璃的折光率相似(香柏油为1.515,玻璃为1.52)。镜检时,滴加香柏油的作用是使光源尽可能多的进入物镜中,避免光线通过折光率低的空气(折光率为1.0)而散失,因而能提高物镜的分辨率,使物像明亮清晰。 3、使用方法 镜检者需姿势端正,一般用左眼观察,右眼用于绘图和记录,两眼同时睁开,以减少疲劳。光源用自然光线或人工光源,注意避开直射日光。用人工光源时,为了避免赤黄光线,需在集光镜下装入蓝色滤光片。 三、显微镜油浸系的原理 1、对光  将光圈完全开放,升高聚光镜与载物台同高,置标本片于载物台上,在低倍镜下对光,用手转动反光镜以调节之,至视野最亮时为止。若用天然光源宜用反光镜平面,较弱光源用凹面。检查未染色标本,光不宜太强,染色标本需强光。光线强弱可通过放大或缩小光圈、升降聚光镜、旋转反光镜调节之。 2、加油   将标本放在载物台上,染色部位正对集光器的中央,用标本夹固定好,滴加香柏油1滴,用油浸镜检查,使油镜头浸入油滴中,几乎与标本面接触为度,然后由接目镜注视镜内,同时慢慢转动粗调节螺旋提起镜筒(绝对不能下降镜筒!)至能模糊看到物像时,再转动细螺旋(细螺旋转动一般不超过一周),直至物像清晰为止。 四、显微镜的保护 1、从镜箱内取显微镜时,应以右手持镜臂以水平方向慢慢抽出,不得碰镜,再以左手托镜座,保持镜体平行,以防反光镜及接目镜滑落。 2、显微镜各镜头绝对不可用手指拭抹,应用擦镜纸或用绸布轻拭之。油镜用过后,立即用擦镜纸拭之,若油渍已干,则需用擦镜纸蘸二甲苯拭之,然后用干燥镜纸轻拭之。镜体可用软布轻拭,以保持清洁。 3、用过后应将显微镜各部复位,尤其注意不要让接物镜对集光器,同时把集光器下降,以免发生碰撞,然后置镜箱内锁好。 4、注意防潮,勿靠近热源及有腐蚀性的化学药品。显微镜各零件不要任意拆卸,尤其是光学部分,以免损坏。 五、细菌正常形态的观察 练习显微镜油浸系的使用,观察已制好的细菌染色标本,如葡萄球菌、链球菌、四联球菌、大肠杆菌、枯草杆菌、螺旋状菌及细菌的荚膜、芽胞和鞭毛,并进行绘图。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务,对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位,都有相关人士进行维护,确保您在微生物菌种查询网中获得优质服务!也正因为此,北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系!

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