细胞详述
气管以软骨、肌肉、结缔组织和黏膜构成。软骨为"C"字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。在近端下呼吸道的上皮表面,主要是纤毛上皮细胞,它与基底细胞及杯状细胞一起构成假复层上皮,到达气管腔表面的大部分细胞为纤毛上皮细胞,基底细胞与基底膜相连,通过半桥粒固定于上皮,在远端下呼吸道中,Clara细胞和基底细胞占优势,纤毛细胞已不存在,杯状细胞数量减少,上皮形态更象柱状,整个上皮存在于一薄层基底膜上,通过间质结缔组织组成的网状层相互支撑,上皮下存在其它的结缔组织和纤维细胞。
该细胞通过慢病毒转染的方式携带SV40基因。
注意事项: 收到细胞后第一次传代建议1:2传代,充液培养基是维持培养基,不能用来培养细胞。
细胞特性
1) 组织来源于实验动物的正常气管黏膜组织。
2) 细胞鉴定:广谱角蛋白(PCK)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:铺路石状细胞,不规则细胞,贴壁培养。
推荐培养基
我们推荐使用原代上皮细胞培养体系作为体外培养原代气管上皮细胞的培养基。
名称 体积 浓度 保存条件
原代上皮细胞基础培养基 500ml 1× 4℃、避光
原代上皮细胞培养添加剂 5ml 100× -20℃、避光
胎牛血清(FBS) 10ml 终浓度2% -20℃、避光
双抗(青霉素/链霉素,P/S) 5ml 100× -20℃、避光
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
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