Bio-115385 己酸菌属

                            Bio-115385 己酸菌属 百欧博伟生物

己酸菌是浓香型白酒生产中非常重要的产酸微生物，由它代谢产生的己酸与大曲发酵产生的酒精生成己酸乙酯，是浓香型大曲酒的主体香成分。己酸菌培养液可广泛应用于浓香型大曲酒的灌窖、窖池保养、人工窖泥培养、酯化液的制作等，以改善和提高浓香型大曲酒的质量。

一、菌种简介

平台编号：Bio-115385

规格：冻干物

拉丁属名：Caproicibacterium Amylolyticum

中文名称：己酸菌属

拉丁名称：Caproicibacterium amylolyticum

来源历史：江南大学

收藏时间：2020-09-16 00:00:00.0

原始编号：LBM18003

原产国：中国

模式菌株：是

生物安全级别：一级

其它保藏中心编号：JCM 33783

培养基编号：177

培养温度：37℃

培养时间：24-48h

需氧类型：专性厌氧

分离基物：发酵污泥

采集地：中国

保存方法：冷冻干燥管保藏

用途：研究

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

二、培养基

培养基： 1268 CAPROICIBACTERIUM MEDIUM(见附件)

三、纯化

由于己酸菌为能生成芽孢的梭状芽孢杆菌,己酸菌孢子有耐热性,而其营养细胞是不耐热的,可采用热处理法淘汰较弱的芽孢,并同时杀灭营养细胞和其它杂菌,使己酸菌株得以纯化。因此,可将分离培养7d后的己酸菌液在85℃恒温处理10min,冷却后再接入新的培养液中培养,以达到纯化己酸菌的目的。

四、产酸鉴定

对分离纯化后的菌种要进行显微镜观察及发酵产物的定量检测,以鉴别是否属于己酸菌。通过多次分离、纯化、检测,从中选取菌体健壮、活跃,并且芽孢杆菌占优势、产己酸高的优质菌,作为实验菌种。

五、培养

1、接种培养

将不加琼脂的分离培养基于0.1Mpa高压灭菌20min,冷却后加入碳酸钙和乙醇,按15%接种量加入己酸菌种子液。为保证实验数据的准确可靠,平行培养12个250mL的小三角瓶和一个2000mL的大三角瓶,同时置34℃恒温培养箱中培养12d。

2、取样方法

对培养的己酸菌液每天观察产气变化,并进行取样分析。取样方法为每天取一个小三角瓶的培养液分析,间隔两天再从大三角瓶中取20mL样品分析比较,以纠正偶然性因素所带来的分析偏差。

六、保藏条件

培养物和冻干菌种应在 2-8°C 保存，请勿长期置于室温；

七、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用无菌吸管吸取 0.3ml 的培养液（即以上建议的培养基配方，不加琼脂）或者无菌水，滴入冻干管中，轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液，接种在培养基上（建议不超过 2 支平板，操作完毕后尽快置于厌氧环境下恒温培养；若需接种液体培养基，制作培养液时，应使用厌氧螺口试管，并利用高纯氮气去除试管和培养液中的氧气）； 经过冷冻干燥保藏，菌种处于休眠状态，复苏培养时可能会延迟生长，这时需较长的培养时间； 若您收到的是已复苏的培养物（非冻干菌），则可以直接用于您的实验，或根据需要转接培养；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

6）如若有菌种复苏不活或者污染等情况，请在收到后 2 个月内联系，逾期不予受理；

7）打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行，生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作，打管时冻干管应远离面部，保护眼睛。

8）西林瓶开封：用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部，在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖，注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞，用 75%酒精棉消毒瓶口部分，使用无菌吸管注入0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。

9）安瓿瓶开封：用浸过 75％酒精的脱脂棉擦净安瓿管，用火焰加热其顶端，滴少量（2-3滴）无菌水至加热顶端使之破裂，用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍，并保持在火焰旁操作。

10）甘油管使用：使用本甘油菌时可以不用完全融解，在甘油菌表面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数的增加，细菌的活力会逐渐下降。

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