平台编号:Bio-133905
(CCC-SMC-2细胞)兔主动脉平滑肌细胞
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:多角
细胞数量:1×106个细胞数
细胞传代:1:3传代3~4天1次
细胞特性:利用2月龄大耳白兔胸腹主动脉去除内皮剥离外膜进行原代培养经aSMA鉴定纯度连续培养可传代16次以上
细胞纯度:95%
细胞活力:87%(ViabilitybyTrypanBlueExclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(基础培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1Vial)或活细胞运输(T-25flasks)
细胞用途:只可用于科研不可用于临床诊断和治疗
(CCC-SMC-2细胞)兔主动脉平滑肌细胞培养条件:
1、培养基:RPMI-1640培养基(不含Hepes)+ 10%胎牛血清+ 1%双抗+800ng/ml Taxol
2、温度:37.0°C
3、气体:空气 95%,CO2 5%
(CCC-SMC-2细胞)兔主动脉平滑肌细胞培养方法:
收到细胞后,在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况:
如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,留10ml培养液继续培养。
如果细胞已长满(达80-90%)。即可进行传代,具体步骤如下:
a,弃去培养液,用PBS洗1-2次。
b,向瓶内加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,吸取胰蛋白酶,加含有6ml 含10%血清的培养液,轻轻吹打细胞。
c,加入等量的的培养液,轻轻吹打混匀后吸出一半,分到新的培养
d,传代比例:1:2-1:3
温馨提示:培养瓶里面的培养液是加入*高药物浓度的,为800ng/ml。我们采取缓慢增加药物的梯度的方法。具体步骤是,首先加含200ng/mlTaxol药物的培养液,放入培养箱,这段时间会有小部分细胞悬浮起来,属于正常情况,通过换液可以去掉,等细胞待长满就可以消化传代了,这时可以一直用含药物培养液来消化培养细胞,一两代之后就可以将药物浓度提高到500ng/ml,两代后可以将药物浓度提高至*高水平800ng/ml,含药物培养液用于细胞培养都没有问题,冻存的时候就不要在冻存液里加药物了。
(CCC-SMC-2细胞)兔主动脉平滑肌细胞保存和应用:
客户可以根据自己的需求选择新鲜或者冻存的原代细胞,如是新鲜原代细胞,客户收到细胞后应立即将其放入CO2细胞培养箱内静置后2-3h,再进行后续的实验操作。如是冻存细胞,客户收到细胞后应立即将其放入液氮、-80℃冰箱或立即进行复苏。
(CCC-SMC-2细胞)兔主动脉平滑肌细胞复苏的原则:
在实际操作中,冻存细胞要进行复苏,再培养传代。复苏细胞一般采用快速融化法。以保证细胞外结晶快速融化,以避免慢速融化水分渗入细胞内,再次形成胞内结晶损伤细胞。
企业名称
北京百欧博伟生物技术有限公司
企业信息已认证
企业类型
个企
信用代码
110108015577306
成立日期
2013-01-24
注册资本
500
经营范围
技术开发、技术推广、技术转让、技术咨询、技术服务;销售机械设备、电子产品、计算机、软件及辅助设备、五金交电(不得从事实体店铺经营)、通讯设备、建筑材料(不得从事实体店铺经营)、医疗器械(限一类)、化工产品(不含危险化学品)。(企业依法自主选择经营项目,开展经营活动;依法须经批准的项目,经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动;不得从事本市产业政策禁止和限制类项目的经营活动。)
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