Bio-02393 浅绿黄假单胞菌 百欧博伟生物
浅绿黄假单胞菌是Pseudomonas属的微生物,原产地为英国。直或微弯的杆菌,不呈螺旋状。主要用途为研究。
一、菌种简介
平台编号:Bio-02393
提供形式:冻干物
拉丁属名:Pseudomonas Viridiflava
中文译名:浅绿黄假单胞菌
拉丁学名:Pseudomonas viridiflava
原始编号:8498
菌株来源:←British Columbia Research Institute Canada←J. Tang
保藏人:周宇光
直接来源国家:加拿大
保藏时间:7/23/2002
其他保藏编号:=ATCC 43557
生物危害:四类
模式菌株:非模式菌株
培养温度:30℃
培养基:0002
分离源:西红柿
采集地点:Florida
采集国家:美国
用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
二、形态特征
直或微弯的杆菌,不呈螺旋状。许多种能积累聚β羟基丁酸盐为储藏物质。没有菌柄也没有鞘。不产芽孢。革兰氏阴性,以单极毛或数根极毛运动,罕见不运动者。有的种还具短波长的侧毛。需氧,进行严格的呼吸型代谢,以氧为最终电子受体。在某些情况下,以硝酸盐为替代的电子受体进行厌氧呼吸。
三、培养方法
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、产品仅用于科研如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
四、保存方法
1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。
2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
3、悬液保存法:
①蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
②糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
4、载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
5、常用的冷冻保存法:
①低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
②干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③液氮保存法(-196℃):是适用范围最广的微生物保存法。
五、注意事项
1、微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;
2、菌种操作在无菌条件下进行,接种完毕应该灭菌再做丢弃处理;
3、斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为 3-6 个月,应根据菌种状况及时结转;冻干粉保存时间通常是 2-25 年;甘油菌保存时间为 2-5 年;
4、冻干首-次活化,干粉要全部用完,不能保留,用0.2-0.5m1的培养液或者无菌水溶解,接种在1-2个平板上,因冻干菌种处于休眠状态,请勿接种多个平板,以免因接种量不足而导致复苏不成功。
5、如果有不明白之处,应先与我中心联系,避免不必要的损失。
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