Bio-132546 小鼠视网膜微血管周细胞 百欧博伟生物
一、细胞简介
平台编号:Bio-132546
规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶
细胞信息:原代细胞
细胞名称:小鼠视网膜微血管周细胞
细胞用途:研究
注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)
二、细胞详述
视网膜微血管周细胞是视网膜微血管的重要组成部分,与内皮细胞及基底膜共同构成微血管壁。
周细胞是一种具有部分平滑肌特性的细胞,分布于微血管内皮和基底膜之间,周细胞具有多种功能并与视网膜病变的发生发展息息相关。周细胞对糖尿病状态下机体内各种代谢产物的浓度变化高度敏感,周细胞的凋亡增多会破坏毛细血管的完整性和稳定性,进一步引起微动脉瘤,出血。
三、细胞特性
1)组织来源于实验动物的正常眼睛组织。
2)细胞鉴定:PDGFR-β免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
四、产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于 1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存 1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过 85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
五、产品使用
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
六、细胞培养操作
换液周期2-3天
培养基体积T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
传代比例1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定)
传代方法
1、尽量吸干净T25瓶原培养基;
2、加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s,吸走润洗的PBS;
3、T25瓶加1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层;
4、将培养瓶放入37度培养箱消化;
5、消化到细胞间隙变大,但未*脱落时加2-3ml*培养基终止胰酶消化;
6、混匀细胞,900rpm离心3-5min,弃上清;
7、加新的*培养基轻轻重悬细胞,均匀分到新的培养瓶里;
8、补足*培养基,将培养瓶放回培养箱静置培养;
注意事项:不同品牌胰酶消化时间差别较大,注意严格控制消化时间
消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔,不要产生过多气泡以免影响细胞状态。
七、细胞冻存操作
冻存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推荐)或92%*培养基+8%DMSO(高手推荐);
冻存规格200-300万/ml,1ml每管
冻存方法
1、消化并离心获得细胞沉淀后,加配置好的冻存液轻轻重悬细胞;
2、将细胞悬液尽快移入已经做好标记的冻存管;
3、将冻存管转入程序冻存盒,放入-80度冰箱过夜,第二天转入液氮保存;没有程序冻存盒的实验室,加入细胞后可以将冻存管放在泡沫盒中4度静置5-10min,再-20度静置2h后转入-80度过夜,第二天转入液氮保存。
注意事项:冻存细胞转入液氮后及时复苏一管检查细胞冻存活性,若有异常,及时调整实验方案。
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