Bio-53810 营养肉汁琼脂

                          Bio-53810 营养肉汁琼脂 百欧博伟生物

产品信息：

平台编号：Bio-53810

规格：250g

菌株名称：营养肉汁琼脂

用途：用于微生物培养

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）

成分（g/L）：

牛肉粉

5.0

氯化钠

5.0

蛋白胨

5.0

蔗糖

10.0

琼脂

15.0

pH值7.0±0.1

25℃

用法：

称取本品40.0g加热溶解1000ml蒸馏水，121℃高压灭菌15分钟，备用。

营养肉汁琼脂微生物灵敏度试验：

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置36±1℃需氧培养18-24小时。

注：回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。

营养肉汁琼脂相关菌种衰退的根本原因是有关基因的负突变。如果控制产量的基因发生负突变，则表现为产量下降；如果控制孢子生成的基因发生负突变，则产生孢子的能力下降。菌种在移种传代过程中会发生自发突变。虽然自发突变的几率很低(一般为10-6～10-9)，尤其是对于某一特定基因来说，突变频率更低。但是由于微生物具有极高的代谢繁殖能力，随着传代次数增加，衰退细胞的数目就会不断增加，在数量上逐渐占优势，最终成为一株衰退了的菌株。

此外，菌种衰退还有以下几种原因：

1、表型延迟造成菌种衰退，表型延迟现象也会造成菌种衰退。如，在诱变育种过程中，经常会发现某菌株初筛时产量较高，进行复筛时产量却下降了。

2、质粒脱落导致菌种衰退，质粒脱落导致菌种衰退的情况在抗生素生产中较多，不少抗生素的合成是受质粒控制的。当菌株细胞由于自发突变或外界条件影响(如高温)，致使控制产量的质粒脱落或者核内DNA和质粒复制不一致，即DNA复制速度超过质粒，经多次传代后，某些细胞中就不具有对产量起决定作用的质粒，这类细胞数量不断提高达到优势，则菌种表现为衰退。

3、连续传代，连续传代是加速菌种衰退的一个重要原因。一方面，传代次数越多，发生自发突变(尤其是负突变)的几率越高；另一方面，传代次数越多，群体中个别的衰退型细胞数量增加并占据优势越快，致使群体表型出现衰退。

4、不适宜的培养和保藏条件，不适宜的培养和保藏条件是加速菌种衰退的另一个重要原因。不良的培养条件如营养成分、温度、湿度、pH值、通气量等和保藏条件如营养、含水量、温度、氧气等，不仅会诱发衰退型细胞的出现，还会促进衰退细胞迅速繁殖，在数量上大大超过正常细胞，造成菌种衰退。

营养肉汁琼脂相关菌种的复苏与传代

1、以无菌操作方式开启冻干菌种管，加入适量培养液（按菌种选择培养液，如细菌选择营养肉汤、白色念珠菌选择沙堡液体培养基、分枝杆菌选择苏通综合液体培养基、黑曲霉菌选择麦芽浸膏营养肉汤培养基），吹吸数次，使菌种融化分散。取含5.0 mL～10.0 mL相应培养液的试管，滴入少许菌种悬液，在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、黑曲霉菌为30 ℃± 1℃培养42 h～48 h），此为第1代培养物。

2、用接种环取第1代培养物，或从菌种冻存管中取适量菌液/瓷珠，划线接种于相应培养基平板（按菌种选择培养基，如细菌选择营养琼脂培养基、白色念珠菌选择沙堡琼脂培养基、分枝杆菌选择改良罗氏培养基或其他商品化分枝杆菌专用复合琼脂培养基、黑曲霉菌选择麦芽浸膏琼脂培养基），在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、分枝杆菌36 ℃± 1℃培养72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培养42 h～48 h），此为第2代培养物。

3、挑取第2代培养物中典型菌落，接种于相应培养基斜面或平板（按菌种选择培养基斜面，如细菌选择营养琼脂斜面、白色念珠菌选择沙堡琼脂斜面、分枝杆菌选择改良罗氏培养基或其他商品化分枝杆菌专用复合琼脂斜面、黑曲霉菌选择麦芽浸膏琼脂培养基平板），在适宜温度下培养至规定时间（一般为36 ℃±1 ℃培养18 h～24 h、分枝杆菌36 ℃±1 ℃培养72 h、黑曲霉菌30 ℃±1 ℃培养42 h～48 h），此为第3代培养物。

4、取第3代培养物，接种于相应培养基斜面，在适宜温度下培养至规定时间，此为第4代培养物。

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