Bio-56343 弯曲芽孢杆菌

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弯曲芽孢杆菌是南京农业大学农业环境微生物菌种保藏中心收藏的一种非模式菌株。

一、菌种简介

平台编号：Bio-56343

提供形式：冻干物

拉丁属名：Bacillus Flexus

中文名称：弯曲芽孢杆菌

属名：Bacillus

种名加词：flexus

来源历史：←王家勤交来

收藏时间：1970.00.00

资源归类编码：15131311101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：研究

特征特性：G+，菌体链状，不运动。菌落圆形，表面光滑，凸起，边缘基本整齐，微黄色。液体培养混浊，有沉落物。不液化明胶，无色素。发酵甘露醇，不发酵葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和乳糖，产气。V.P 阴性，M.R.阴性，水解淀粉，接触酶阳性，好氧。最适生长温度30℃，最高生长温度35℃，利用硝酸盐。    

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基：牛肉膏 10.0g，蛋白胨 10.0g，葡萄糖 10.0g，NaCl 5.0g，琼脂 15.0～20.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。

培养温度：28-30℃

资源保藏类型：培养物

保存方法：真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

源数据主键：10070

用途：研究；

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用产品信息以出库为准

二、形态特征

革兰氏阳性、能运动、好氧杆菌。菌落米黄色不透明，边缘光滑，湿润且扁平。在基础盐培养基中5天降解100mg/L邻苯二酚90%。

三、主要价值

主要用途是研究；教学。

具体用途是在基础盐培养基中5天降解100mg/L邻苯二酚90%。 

四、菌种的培养

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。

五、弯曲芽孢杆菌操作流程

菌株复苏:(按三区划线法将留菌管内的原始菌株进行复苏)

1)所有菌株,显色培养基分4区,每区一株,标明菌株号、菌种名常用缩写如下:

cal:白念珠菌cgl:光滑念珠菌cpa:近平滑念珠菌ctr:热带念珠菌ckr:克柔念珠菌cne:新型隐球菌,其他菌种标记全名

2)隐球菌除传显色培养基以外,另传1/2块血平皿上述菌株统一37oC孵育48h

菌种鉴定:(48h后观察结果)

六、保藏方法

1、低温存法：

①弯曲芽孢杆菌规格简单保存法，将琼脂斜面孢子培养物、菌丝悬浮液以及由麸皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培养物置于4℃冰箱保存,保存时间不超过1～2个月，若将谷物原料制备的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蜡,以隔绝外界空气和水汽,保持时间可达3～4个月；②液氮超低温保存法，将生长稳定期的细胞悬浮在10%甘油或其他低冰点液体中，密封于安瓿管内，然后控制冷却速度，使安瓿管温度逐步下降至 -35℃时，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多数微生物如病毒、噬菌体、多种细菌、放线菌、酵母和原虫、特别是一些用冷冻干燥法有困难的微生物，都可用此法长期保存。

2、脱水存法：

①沙土保存法，能产孢子的细菌、放线菌及霉菌可采用此法保存,即将沙和土以3:2比例混合，经稀酸处理洗净过筛,装入小试管内,装置高度为1cm;灭菌2～3次，烘干后即可将在斜面培养基上生长良好的孢子，用无菌蒸馏水2～2.5ml制成孢子悬液，吸取少许加入沙土管中，经真空抽干，外观呈松散状态,于4℃冰箱保存，保存期可达5～7年。

② 冷冻干燥法,将孢子悬浮液与保护剂（一般用脱脂牛奶或血清）相混合，放在安瓿管内于-20～-30℃的乙醇浴中速冻。然后，在低温下用真空泵抽干，并用五氧化二磷或干冰使水汽结冻，熔封安瓿管，于低温下保存。保存期可达5～10年之久。

③ 石蜡油封存法，在斜面菌种培养物上,倒上灭菌后的石蜡油，高出斜面1cm，于4℃冰箱或低温干燥处保存，此法不适用于能利用石蜡油作碳源的微生物，保存期为一年以上。

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