Turbo感受态细胞

Turbo感受态细胞

产品说明

NEB Turbo感受态细胞非常适合于高效转化和快速生长。基因型为F proA+B+lacIq?lacZM15/fhuA2 ?(lac-proAB)glnVgalK16 galE15R(zgb-210::Tn10)TetSendA1 thi-1 ?(hsdS-mcrB)5。  

产品特点

1.转化效率高达1-3×109cfu/μg pUC19 DNA。

2.通过 lacI q 精确控制表达，从而允许克隆潜在的毒性基因。

3.转化后最快 6.5小时后可以在琼脂糖平板得到可见菌落。

4.缺失非特异性核酸内切酶 I（endA1）活性，可用于制备高质量质粒。

5.可做蓝白斑实验。

6.携带AmpR的质粒可以5分钟完成转化实验。

7.挑取过夜培养的单菌落，培养4小时即进行DNA提取。

操作步骤

方案一：高效转化方案

1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。

2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。

3.冰浴30分钟，不要震荡。

4.42℃热击30秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置5分钟。

5.加入950μl室温的SOC培养基。

6.混匀后，置于37℃的摇床上，250rpm震荡培养60min。

7.将含有抗生素的平板加热到37℃，放置半个小时，使其表面干燥，易于均匀涂布。

8.根据实验要求，取适量转化的感受态的细胞，加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。

方案二：五分钟转化方案

1.取感受态细胞置于冰浴中，放置10分钟。

2.向感受态细胞中加入1-5μl含有1pg-100ng的质粒DNA，轻轻地敲打4-5下。

3.冰浴2分钟，不要震荡。

4.42℃热击30秒，不要震荡，迅速转移到冰浴中，放置2分钟。、

5.加入950μl室温的SOC培养基，迅速将50-100μl加到含有抗生素的固体琼脂糖培养基上（LB或SOC），用无菌棒将细胞均匀涂开，将平板置于37-42℃培养箱，倒置过夜培养（8-12h）。注意：除阿莫西林以外的抗生素需要一段时间生长才能涂布到有抗生素的固体琼脂糖培养基上。

运输和储藏

    干冰运输，收到后请置于-80℃。注意：感受态细胞应置于-80℃，-20℃会显著降低转化活性。感受态细胞处于-80℃以上，即使不融化，也会降低转化活性。

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