热带假丝酵母的检查方法与快速鉴定！

               热带假丝酵母的检查方法与快速鉴定！

热带假丝酵母（Candida tropicalis）即热带念珠菌，是常见的假丝酵母。迄今为止，已发现有270余种念珠菌，其中引起人类致病的念珠菌主要有白色念珠菌(C.albicans)、热带念珠菌(C.tropical)、假热带念珠菌(C.pseudotropicalis)、近平滑念珠菌(C.parapsilosis)、克柔念珠菌(C.kruseii)、星形念珠菌(C.stellatoidea)、光滑念珠菌(C.glabrata)、高里念珠菌(C.guilliermondii)，均为条件致病菌，其中以白色念珠菌毒力最强，也最常见。念珠菌在普通培养基上生长较快，为椭圆形芽生细胞，在特殊培养基上形成菌丝。菌种的鉴别需依靠生化试验。

一、菌种简介

平台编号：bio-51954

规格：冻干物

拉丁属名：Candida tropicalis (Castellani) Berkhout

菌株名称：热带假丝酵母

别  称：热带念珠菌 

界：真菌界 

门：子囊菌门 

亚  门：酵母亚门 

纲：酵母纲

其它编号：AS2.637

培养基编号：13

培养温度：25-28℃

培养时间：48h

用途：饲料酵母

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

二、生存环境

热带念珠菌是一种腐物寄生菌，广泛存在于自然界，可从水果、蔬菜、乳制品、土壤中分离出。也可存在于健康人体的皮肤、阴道、口腔和消化道等部位。约10%的健康妇女和30%的孕妇可无任何临床症状而阴道内带有念珠菌。当机体抵抗力降低或阴道局部环境发生改变时，热带念珠菌就大量繁殖，产生病变。所以，热带念珠菌是一种条件致病菌。 10%～20%非孕妇女及30%孕妇阴道中有此菌寄生但菌量极少鵻，呈酵母相，并不引起症状。热带念珠菌生长最适宜的pH值为5.5，阴道的弱酸性环境能保持阴道的自洁功能，正常人为3.7-4.5，但阴道的弱酸性改变为pH5.5后，热带念珠菌大量繁殖，并转变为菌丝相鵻，才引发阴道炎症状。

三、系统位置

真菌界 　半知菌亚门 　芽孢菌纲 　隐球酵母目 　隐球酵母科 　念珠菌属 　热带念珠菌

四、菌株形态

是一种双相型单细胞酵母菌，热带念珠菌(C.tropicalis)是生殖器念珠菌病的第二病原菌。为芽生，有假菌丝，有厚壁孢子、无子囊。一般情况下呈卵圆形 的单壁细胞。大小为2μm X 6μm，成群分布，尚可见分隔的假菌丝，革兰染色阳性。热带念珠菌在人体中可见到不同期表现，无症状时为酵母型，呈圆形或椭圆形；在侵犯黏膜组织致病时，常表现为菌丝型，为长条型的假菌丝。

五、检查方法

念珠菌显色培养基根据酶底物法，通过显色来区别不同念珠菌，25-28℃培养48小时后，白色念球菌蓝绿色，热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色，光滑念珠菌显紫色，克柔假丝酵母显粉色，其它念珠菌显白色，细菌被抑制。 　

用法：称取本品9.6g（可按4.8g/100ml的比例扩大或缩小），加入200ml蒸馏水或纯化水中，加热溶解并不停搅拌，煮沸不要超过1分钟。将加热后的培养基水浴冷却至45-50℃，轻轻地摇匀，倾入无菌平皿（9cm的15ml/皿，7cm的10ml/皿），琼脂完全凝固后，在36℃±1℃的培养箱中倒置放置0.5-1小时，备用。 　

操作步骤：1、按国家标准、SN标准、FDA标准或其它方法制备样品液； 　

2、取样品液涂布或划线接种于平板上； 　

3、25-28℃培养48h。白色念珠菌典型特征为蓝绿色，热带念珠菌显蓝灰色或铁蓝色，光滑念珠菌显紫色，克柔假丝酵母显粉色，其它念珠菌显白色,细菌被抑制。 　

4、对可疑白色念珠菌菌落可划线接种到PDA琼脂平板上，25-28℃培养24-48小时，挑取单菌落做镜检和生化试验。

六、培养方法

在葡萄糖—酵母汁—蛋白胨液体培养基中培养，25℃，3天，细胞呈球形或卵球，其中大小为4~8×6~11µm。在麦芽汁琼脂上菌落为白色到奶油色，无光泽或稍有光泽。软而平滑或部分有皱纹。培养时间长时，菌落变硬。在加盖玻片的玉米粉琼脂培养基上培养，可看到大量的假菌丝和芽生孢子。

热带假丝酵母氧化烃类的能力强，在230~290℃石油馏分的培养基中，经22h后，可得到相当于烃类重量92%的菌体。所以，是生产石油蛋白质的重要菌种。用农副产品和工业废弃物也可培养热带假丝酵母。如用生产味精的废液培养热带假丝酵母作饲料，既扩大了饲料来源，又减少了工业废水对环境的污染。

七、快速鉴定

以传统发酵法检测光滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌发酵海藻糖情况。采用4%海藻糖液孵育各试验株3小时后用尿糖试纸检测。E－test法测试光滑念珠菌对氟康唑、伊曲康唑的敏感性。结果：光滑念珠菌与热带念珠菌皆可发酵海藻糖，尿糖试纸呈阳性反应，但后者菌落在科玛嘉色原培基为蓝色，在米粉吐温琼脂有假菌丝。结论：采用海藻糖法配合米粉吐温琼脂或科玛嘉色原培养基可以快速简便鉴定光滑念珠菌和热带念珠菌。

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