人T淋巴瘤细胞系的建立和鉴定！

                      人T淋巴瘤细胞系的建立和鉴定！

产品概述

平台编号：bio-53605

拉丁属名： Hut-12

细胞名称：人T淋巴瘤细胞；HUT102  

形态特性：淋巴母细胞样  

生长特性：悬浮生长  

特征特性：HUT102是一株T细胞淋巴瘤细胞系。该细胞具有成熟T细胞系的特征，细胞表面呈现IL-2活性，E花环阳性，表面免疫球蛋白、EBV核抗原和TdT（Terminaldeoxyribonucleotidyl-transferase）反应阴性。该细胞系还可释放与T细胞淋巴瘤相关的单一C型逆转病毒（retrovirus），即HTLVI病毒。  

培养条件：RPMI1640(w/oHepes)10%FBS  

传代方法：1:3传代,2-3天传一代  

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

一、建系过程

将一男性盆腔琳巴瘤患者腹水中的肿瘤细胞首先接种于裸小鼠背部皮下，65天后见肿瘤形成，79天时达到直径1 cm。取移植瘤组织进行传代接种，现已传至23代，成瘤率100%， 将第8代移植瘤组织转至体外培养(1640培养液加20%小牛血清在CO2孵籍中),传代成功，现已传至130代。肿瘤细胞在裸小鼠腹腔内形成腹水瘤，在塑料瓶中培养呈半悬浮半贴壁生长。

二、病理形态

裸小鼠皮下移植瘤呈弥漫浸润生长，间质很少。瘸细胞约为小淋巴细胞的2倍大小，胞浆少，核圆，无明显的曲折或裂沟，可见1~ 2个偏位的核仁。透射电镜见细胞间无联接结构。按细胞形态，此例符合1982年国际工作分类的非曲核型淋巴母细胞琳巴瘤。

三、细胞表面免疫学标记

用流式细胞仪和CD系列单抗进行细胞表面抗原分析。结果示全T细胞标记CD3- , CD7+ (阳性细胞69%);T细胞亚型标记CD4-，CD8-; NK细胞标记CD16-; B细胞标记CD19-。本细胞系缺乏正常T淋巴细胞分化标记，而CD7却呈阳性，符合文献中报告的人类淋巴母细胞性淋巴瘤80%来源于T细胞，且几乎全都具有CD7+表型。

四、细胞增殖及生长因子

在裸小鼠皮下移植10代后肿瘤生长迅速，移植45天后肿瘤长径超过4.5cm。人T淋巴瘤细胞在体外培养每次传代保留原培养上清液1/8~1/2则生长良好，群体倍增时间为22.5小时，分裂指数在第3天高达56‰，4天传代1次。如缺乏上清液则细胞生长缓馒，可见人T淋巴瘤细胞能自泌生长因子。人T淋巴瘤细胞培养上清液对正常人外周血淋巴细胞在体外培养中亦有促增殖作用。用流式细胞仪和碘化丙啶荧光探针,对该细胞系DNA含量和细胞周期进行分析，结果表明人T淋巴瘤细胞为DNA异倍体细胞，DNA指数为1.18。细胞增殖周期各时相细胞相对数分别为: G0/G1 期26,3%，S期61.5%， G2+M期18.1%。

五、染色体分析

人T淋巴瘤细胞染色体形态属人类,染色体数范围46-53，众数为47。核型分析见众多的异常染色体。

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