小鼠小胶质细胞的特性与应用！

                     小鼠小胶质细胞的特性与应用！

一、背景

小鼠小胶质细胞由小鼠小神经胶质细胞经逆转录病毒介导转染v-raf/v-myc获永生化。该细胞系保留有小神经胶质细胞多种形态、表征和功能特征。免疫组化结果显示细胞为MAC1,MAC2阳性，而MAC3，胶质细胞原纤维酸性蛋白，半乳糖脑苷脂为阴性。

组成中枢神经系统的细胞大部分是神经胶质细胞，包括大胶质细胞（星型胶质细胞和少突胶质细胞）和小胶质细胞。小胶质细胞是中枢神经系统的主要免疫细胞，具有提呈抗原、分泌多种细胞因子、吞噬病原体和坏死组织的作用，被认为是脑内的单核巨噬细胞。由于小胶质细胞在颅内免疫反应中的重要作用，对小胶质细胞的研究已成为热点，小胶质细胞的体外培养是小胶质细胞功能研究的重要途径。

小胶质细胞分布于整个中枢系统，是中枢神经系统最小的一种胶质细胞，约占整个胶质细胞的5-10%。作为常驻中枢神经系统的免疫效应细胞，小胶质细胞及其介导的神经炎症在中枢神经系统的损伤及疾病的转归过程中起着非常重要的作用。

二、细胞特性

1)组织来源于实验动物的正常脑组织。

2)细胞鉴定：CD68免疫荧光染色为阳性。

3)经鉴定细胞纯度高于90%。

4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。

5)细胞生长方式：圆形细胞，不规则细胞，贴壁培养。

三、应用

用于CSF1R的抑制剂Ki20227对全脑缺血小鼠小胶质细胞和神经元的影响研究：

小胶质细胞是脑内具有免疫活性的细胞,在不同的生理病理条件下具有多种多样的功能。脑中风后,小胶质细胞迅速反应,目前对脑中风后小胶质细胞的功能还有很大争议。

小胶质细胞对神经元具有两种作用:积极作用和消极作用,但在中风后,小胶质细胞的作用还不是很清楚,同时小胶质细胞增生的调控机制也尚不清楚。

探讨中风后Ki20227对小胶质细胞和神经元的影响,以及中风后小胶质细胞是否对神经元具有保护作用。

利用小胶质细胞特异性表达绿色荧光蛋白的转基因小鼠,采用药物Ki20227抑制CSF1R来干预小胶质细胞,通过建立全脑缺血脑中风模型,利用双光子活体成像技术,免疫组织化学染色,荧光显微成像分析,荧光定量PCR和行为学测试等研究方法,揭示中风后小胶质细胞对神经元的影响,初步探索小胶质细胞增生的调控机制。

结果表明,中风后BrdU染色显示小胶质细胞存在增殖现象,中风导致小胶质细胞中细胞因子表达异常;神经元数目减少;皮层和海马树突棘密度下降;行为学异常。

同时发现全脑缺血后采用药物Ki20227抑制CSF1R后,一方面导致了小胶质细胞密度下降、突起减少、相关细胞因子表达异常,同时增殖的小胶质细胞密度下降,而另一方面进一步导致了树突棘密度的下降,突触分子表达水平下降,以及行为学异常。

综上，结果揭示了小胶质细胞的形态和细胞群密度以及相关细胞因子的表达与CSF1R密切相关;小胶质细胞在全脑缺血后对神经元具有保护作用。

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