“OD值”这个概念想必做实验的各位小伙伴们都不陌生,从判断提取核酸的质量及浓度,到BCA蛋白定量进行蛋白定量,又或者是ELISA实验检测目的蛋白含量,这些常用的基础实验都需要检测样品的“OD值”,但是,“OD值”到底是个什么东西,我们在测量“OD值”的时候又有哪些需要注意的问题,今天就让小编给小伙伴们好好说道说道。 什么是“OD”值? OD全称optical density,也就是光密度,也可以称为吸光度。吸光度指的是利用物质特有的吸收光谱,来鉴别物质或者测定物质的含量,也就是将一束特定波长的光通过被检测物,被检测物可以将光吸收掉一部分,通过吸光度计算被检测物的浓度。一般被检测物浓度越高,吸光度的值就会越高。实验中也是利用“OD值”和被检测物的浓度之间的关系来根据吸光度。
最需要注意的就是测量时的光波长。上文在介绍“OD值”概念时提到,吸光度利用的是物质特有的吸收光谱,实际操作中我们需要注意的最关键的也是这一点,不同物质的吸收光谱不同,最大吸收峰的波长也不同,为了达到最好的测量效果,一般来讲,我们需要在待测物质的最大吸收波长处来检测其“OD值”。例如,核酸在260nm波长处光吸收最大,而蛋白和酚类物质则在280nm波长处光吸收最大;BCA法检测蛋白含量时,显色反应后,溶液由浅绿色变为紫色,此时在560nm处有最大光吸收值;TMB法显色的ELISA实验,在加入终止液后溶液由蓝色变为黄色,在450nm处有最大光吸收。 除了吸收波长,一些实验还需要设置校正波长,校正波长往往远离最大吸收波长,作为本底吸收,排除由于气泡、灰尘等其他系统误差造成的“OD值”偏差。根据测得的“OD值”,进行双波长校正,可以有效的减少系统误差造成的影响。
关于“OD值”本期就先分享到这,看到最后的小伙伴们还有福利,小编在这里把一款小巧的曲线拟合软件ELISA Calc分享给大家,常见的曲线拟合方式都在里面,帮助大家测好“OD值”,得到好结果。 |
货号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
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abs510002 | Human IL-1 beta ELISA kit | 96 T | 2000 |
abs510003 | Human IL-6 ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510006 | Human TNF-α ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510007 | Human IFN-gamma ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510008 | Human VEGF ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510009 | Human EGF ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510010 | Human MMP-9 ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510011 | Human IL-12/IL-23 p40 ELISA Kit | 96 T | 2000 |
abs510012 | Human IL-12 p70 ELISA Kit | 96 T | 2000 |
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