Caspase 3/7活性检测试剂盒

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产品描述：

产品名称：Caspase 3/7活性检测试剂盒

描述:

Caspase 3/7 活性检测试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3/7酶活性或纯化的caspase 3/7酶活性的试剂盒。Caspase 是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily)，是凋亡过程中最主要的终末蛋白酶，也是研究最多的caspase；激活pro-caspase-2,6,7,9，特异水解多种关键凋亡蛋白如PARP，介导染色质固缩、凋亡小体生成、核DNA断裂。Caspase 3和Caspase 7都可以剪切DEVD肽段序列，因此本试剂盒可以检测caspase3/7。

别名: CPP32；Yama；apopain；caspase-3；caspase 3

使用方法: 测定pNA标准曲线： 1. 用反应缓冲液稀释10mM pNA标准品为200, 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.125μM。设置不加pNA的零管。 2. 每一浓度取100 μl加入96孔板或100μl比色杯，测定405nm吸光度OD值。 3. 每一浓度标准管OD405值为x轴，对应的pNA浓度为y轴，用Excel制作pNA浓度对OD405值的标准曲线。 Caspase 3/7酶活性的检测： 1.取出适量的Ac-DEVD-pNA (2mM)，置于冰浴上备用。 2.按照100ul反应体系： 空白对照组：检测缓冲液40μl、待测样品0μl、裂解液50μl、Ac-DEVD-pNA (2mM)10μl； 样品组：检测缓冲液40μl、待测样品50μl、裂解液0μl、Ac-DEVD-pNA (2mM)10μl; 3.加入Ac-DEVD-pNA (2mM)后混匀，注意避免在混匀时产生气泡。37oC孵育60-120分钟。发现颜色变化比较明显时即可测定A405。如果颜色变化不明显，可以适当延长孵育时间，甚至可以孵育过夜。 4.样品的A405扣除空白对照的A405，即为样品中caspase 3/7催化产生的pNA产生的吸光度。通过同步骤1中获得的标准曲线对比就可以计算出样品中催化产生了多少量的pNA。

储存/保存方法: -20℃保存，Ac-DEVD-pNA和pNA需要避光保存。

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