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2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒),含示踪染料
Basic LAMP Amplification Kit
产品及特点 本产品是 2×LAMP MagicMix(无色),可以用于 LAMP 等温扩
增,LAMP 即Loop-Mediated Isothermal Amplification(环介导等温扩
增),是 2000 年才出现的一种新颖的等温核酸扩增方法。它利用 4 条模板专一
的特异引物和具有链置换能力的 DNA 聚合酶,在等温条件下(63℃左右) 30-
60 分钟完成扩增。该技术在灵敏度、特异性和检测范围等指标上能媲美甚至优
于 PCR 技术,同时还不需要模板的热变性、温度循环、等过程。目前已成功应
用于人类及动植物、细菌、病毒、寄生虫、真菌等病原体的快速检测。本试剂
盒具有下列特点:
1. 即开即用的 2×LAMP MagicMix,无色。
2. 高特异性,由于同时使用 4-6 条特异引物,所以特异性比 PCR 更高。
3. 高扩增效率,扩增效率可达到 10E9-10E10,比PCR 灵敏一个数量级,可检测到单拷贝的 DNA 分子
4. 65℃左右等温扩增,可以不需要贵重的热循环仪。
5. 即开即用,包含了除引物和模板 DNA 外的所有成份,十分方便。
6. 本试剂盒足够 50 次 20uL 体系的 LAMP 扩增。
7. 提供扩增对照,便于在遇到困难时分析原因。
8. 本产品只能用于科研,不能用于临床。
运输及保存 低温运输,-20℃保存,有效期一年。
自备试剂 LAMP 模板、LAMP 引物、自备可见光染料
使用方法 1. 制备模板DNA:选用合适的方法制备模板DNA。
2. 配制自备的5×LAMP引物混合液。
先加超纯水或自备TE缓冲液将自备的下列6种(或4种)引物干粉稀释到母
液浓度,然后在一新的离心管中按表中所列体积加入各种引物母液和超纯
水,最后得到1mL的5×LAMP引物混合液,此混合液足够250次20uL体系
的LAMP扩增。如果需要配制的5×LAMP引物混合液体积异于1mL,则各
成分的用量请按比例调整。引物混合液可以在-20℃放置2年。
3. 在冰上融化2×LAMP MagicMix,混匀,稍离心。如果有N个样品,则在
N+2个反应管中加入以下组份:
成份 样品管 LAMP
阳性对照
LAMP
阴性对照
2×LAMP MagicMix(无色) 10 uL 10 uL 10 uL
自备 5×LAMP 引物混合液 4 uL 不加 4 uL
自备模板 DNA 1-100ng 不加 不加
LAMP 阳性对照模板-引物混合物 不加 4 uL 不加
补自备超纯水到 20 uL 20 uL 20 uL
注意:此步可加入自备的各种LAMP可视化染料,这样反应结束后可以根据
反应液的颜色变化或实时荧光强度变化来判断是否有扩增,不需要开盖,避
免污染。如果加入了荧光染料,则需要在荧光定量PCR仪上进行反应和实时
检测。
4. 混匀,置于63℃保温60分钟。如果是在PCR仪中保温,必须加热盖。如
果用金属浴或水浴保温,没有热盖,必须覆盖50uL的石蜡油,否则保温
期间反应体系的水分会蒸发,影响反应效率。
5. 产物取扩增产物5 uL上样,进行2-3%的琼脂糖凝胶电泳,可见LAMP特
征性电泳图谱。
6. 结果分析:如果本试剂盒提供的阳性对照-引物混合物能够扩增而阴性对照
不能扩出,则实验有效。如果阳性对照-引物混合物没有扩增出条带,则试
剂盒的问题,请跟厂家联系。如果阴性对照(水作为模板)有扩增出条带,
则说明LAMP样品或试剂有过去的扩增产物的污染,需要注意操作的规范
性,如果不能解决,可以重新设计引物扩增新的靶片段。也可以使用不需要
开盖的2×可视化LAMP MagicMix。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒),含示踪染料信息由上海泽叶生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒),含示踪染料报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应2XLAMP MagicMix(原通用型LAMP试剂盒),含示踪染料外,上海泽叶生物科技有限公司还可为您提供GTF2A1试剂盒; 人通用转录因子ⅡA肽1检测试剂盒(ELISA方法)、GTF2H1;小鼠通用转录因子ⅡH肽1检测试剂盒、GTF2H1重组蛋白;通用转录因子ⅡH肽1重组蛋白等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。