北京佰司特科技有限责任公司中标西湖大学质量光度计采购项目                                        一、采购人：西湖大学二、项目名称：西湖大学质量光度计采购项目三、采购编号：WLU-HW-DY-WM-2024-0042四、采购方式：单一来源五、公告发布时间：/六、开标时间：2024年3月26日14时00分七、定标时间：2024年3月26日八、成交供应商： 序号供应商名称     货物名称     货物品牌     货物型号     货物数量     货物单价(元)  1北京佰司特科技有限责任公司  质量光度计   壹套                   质量光度计1、检测原理：质量光度法（Mass photometry），通过单分子散射光的方式测量单分子的质量；▲2、无需标记，无需固定，测量溶液中的分子的真实、天然状态；3、适用于各种缓冲液中，与膜蛋白相容；可检测样本中所有亚群体的信息；4、可用于组分分析，即样品纯度和成分分析以及异质生物分子的质量分析测量；5、可用于功能分析，即生物分子间相互作用以及蛋白质复合物的组装与化学计量；▲6、激光自动对焦，波长488nm；7、采样频率（标准设定）：1 kHz（原始），100 Hz（集成）；8、测量精度为物体质量的±2%；9、单次测量质量误差为物体质量的5% @ 10 nM；▲10、分辨率（半高宽）25KDa@66KDa，85KDa@660KDa；▲11、灵敏度＜1ng蛋白质；▲12、基于AOD的点扫描；13、像素：12 nm；▲14、分子量范围：30 kDa – 5 MDa；▲15、浓度范围： 100 pM – 100 nM（颗粒浓度）；16、样品体积：5–20 µl；17、视野：4 x 11 μm (@ 500 Hz) – 12 x 17 μm (@ 135 Hz)；18、自动控制系统，可满足仪器使用过程的要求：英特尔酷睿i7，内存容量16GB，固态硬盘容量256G，硬盘2TB，Windows 10系统；19、预装成熟的数据获取软件和数据分析软件：1 份授权版AcquireMP （数据收集软件） + 6份授权版DiscoverMP（分析软件）。 2024 年 03 月 28 日

2024最新专家共识推荐使用类器官技术开展药物敏感性检测2024年4月12日，中华医学会呼吸病学分会发布《难治性肺癌中国专家共识》，其中明确指导了包括类器官芯片在内的多种精准诊疗新技术方案。”难治性肺癌患者会面临多重耐药等复杂情况，临床医师可在取得患者知情同意前提下，利用类器官芯片技术、人源肿瘤异体移植瘤模型（PDX）及MiniPDX技术开展药物敏感性检测，结合基因测序，综合判断，制定个体化用药方案，推荐如表6。“——《难治性肺癌中国专家共识》精准诊疗新技术方案推荐这其实并非类器官芯片技术在国内官方文件中的第一次亮相。更早之前，就已经有多项肿瘤精准诊疗相关文件，对类器官与器官培养芯片技术提出支持。2022年8月，FDA批准了全球首个完全基于“类器官芯片”研究并获得临床前数据的新药(NCT04658472)进入临床试验。这一里程碑事件，意味着“类器官芯片”实验正式介入传统动物实验和临床人体实验之间，作为药物安全性评价新的替代技术方案，正式获得官方认可。近十几年来，在全球生命科学研究人员共同努力下，数十种类器官模型构建完成，并进入商业化应用。德国TissUse类器官串联培养系统（能够模拟人体病理微环境的“Patient-on-a-Chip”串联培养技术）：能够模拟人体内生理环境，包括温度、压力、真空度、微流道循环频率、时间等参数，芯片有不同的微流道设计，针对不同的器官可以单独设置提供相应的培养条件，提供精准的培养和分化环境。可提供不同类器官的串联共培养方案，避免单一类器官无法模拟人体复杂生理学条件下器官相互通讯交流的不足。通过类器官模拟人类器官组织的生理发育过程，应用于疾病模型、肿瘤发生、以及药物安全性、有效性、毒性、ADME等方面的评估，旨在减少和取代实验室动物测试，简化人体临床试验。人体是一个复杂的调控网络，即便明确病灶部位，但深度解析病理机制就会发现，临床给药“牵一发而动全身”，需要综合考量细胞与细胞、组织与组织、器官与器官之间的信息流动，做到掌握全局变化。单一的类器官培养后用作药物敏感性检测，距离真正的临床替代仍旧非常遥远。基于此，假如我们不仅仅可以体外重构人体类器官，同时可以模拟人体内的网络调控模式，把“芯片上的类器官”（Organs- on- chips）一步步无限趋近于“芯片上的人体”（“Patient/Human-on-a-Chip”），或许可以获取一些新的问题解决方案。越来越多的关于人类疾病建模和人体组织芯片治疗测试的科学文献指出，当生物体可以在MPS上完全功能性地建立时，这种微生理平台有能力精确模拟疾病的病理生物学和药物或治疗的作用模式。企业介绍01TissUse GmbH公司于2010年创立，是一家位于德国柏林的私营公司，它建立了一个"多器官芯片”的平台，利用微型化人体器官模型在系统层面提供临床前的预测，是第一家也是唯一专注于多器官芯片方案的公司。德国TissUse公司专注于类器官培养系统研究22年，推出的HUMIMIC类器官串联芯片培养系统，得到FDA的推荐，可提供不同类器官的串联培养解决方案，避免单一类器官培养无法模拟人体器官相互通讯关联的缺陷，同时也提供相关的技术方案和后续方法试剂支持，在“Multi-Organ-Chip” 和“Human-on-a-chip”领域技术领先。相关方案已被广泛应用于药物开发、化妆品、食品与营养和消费产品等多个领域。技术平台02HUMIMIC技术平台是TissUse GmbH公司建立一个专有的通用 "多器官芯片 "技术平台，在芯片上可以将多个类器官进行共培养的系统。该系统能够模拟人体内生理环境，包括温度，气流，压力，液体流动，提供生物剪切力等，芯片底部有不通的微流道设计，针对不同的器官，可以单独设置提供相应的培养条件，提供精准的培养和分化环境。HUMIMIC技术平台能高效均一的获得用于研究或药物筛选的类器官模型，具有较好的重复性，升级版Autolab包括：自动培养；自动加样，自动换液（可以执行多种不同的培养基/溶液的换液操作）；自动观察等一体化功能。科研版HUMIMIC Starter通过24个预先校准的气动连接器，实现芯片上微流系统的最佳运行状态。应用场景03骨髓-毒性评估，单一药物和多种药物组合的肿瘤治疗方案；肝脏-药物代谢及毒性评价；不同供体的皮肤和免疫细胞共培养-预防同种异体移植组织排斥反应的疗法评估；小肠和肝脏-药物吸收代谢和毒性的评价；肝脏和胰腺-2型糖尿病治疗新靶点鉴定；皮肤和肿瘤-抗肿瘤抗体安全有效性评估、治疗窗口评估；胰岛、胰腺肿瘤和内皮化血管-溶瘤病毒的安全性和有效性测试；血管化骨髓和淋巴结-基因组编辑造血干细胞的致瘤性和增殖能力的评估；血管化肝肾移植-评估调节性T淋巴细胞预防肾移植排斥反应的潜力；心脏、肝脏和胰脏-评估心脏代谢疗法的作用方式；肠、肝、肾、脑和血脑屏障（BBB）-药物ADME分析、药代动力学、器官特异性毒性和血脑屏障迁移能力；淋巴组织培养-维持免疫功能正常的淋巴组织；甲状腺和肝脏共培养-内分泌干扰物鉴定模型；……

类器官代谢分析仪：微生理系统实时监测跨上皮细胞层电阻和细胞外酸化率Skin-on-a-Chip：Transepithelial Electrical Resistance And Extracellular Acidification MeasurementsThrough an Automated Air-Liquid Interface皮肤是人体重要的器官，在保护人体内部器官方面起着至关重要的作用。因此，人们进行了大量的工作来创建人造表皮模型进行体外皮肤毒性试验。这些组织模型被称为重建人表皮细胞模型（reconstructed human epidermis，RhE），被用于在制药、化妆品和环境领域中评估皮肤暴露于外源性物质中的毒性研究。在这里，我们提出了一个无标记的方法，即利用了intelligent mobile lab for in vitro diagnostics（IMOLA-IVD）一个无创、基于传感器的平台，来检测多孔膜上RhE细胞模型和贴壁细胞的跨上皮细胞层电阻（transepithelial electrical resistance，TEER）。首先在聚碳酸酯膜上培养小鼠成纤维细胞作为测试模型，使用定制的生物芯片封闭式设计，以及双微流道结构，用于培养物的连续和自动灌流。检测L929细胞的胞外酸化率（Extracellular acidification rate，EAR）和跨上皮细胞层电阻（transepithelia lelectrical resistance，TEER）。通过该平台监测RhE细胞模型的TEER超过48小时。TEER和EAR测试表明，该平台可以长时间稳定培养芯片上的皮肤细胞模型，监测代谢参数，以及组织降解。    Keywords：TEER；Organ-on-a-Chip；skin models；reconstructed human epidermis；impedance；label-free monitoring1. INTRODUCTION作为人体最大的器官，皮肤代表着人体内部和外部环境之间的结构学屏障，将体内器官与毒素、病原体隔离开来，并保护内部器官免受紫外线（UV）辐射。除了重要的屏障功能，人体皮肤还执行人体的几个基本功能，如热调节、感觉和排泄。因为皮肤是人类抵御外部环境的影响的第一防护罩，新的化学物质的研究，如药物和毒素，必须分析和评估其对调节皮肤完整性的能力。调查在这些化合物的影响下，细胞生物学利用细胞培养模型，更深入的研究了解由化学物质调节的细胞行为。在过去的十年里，科学家开发了各种生物工程模型用于皮肤毒性研究。第一个皮肤模型基于传统的二维（2D）共培养模型，角质细胞接种到培养好的成纤维细胞上。由于在刚性塑料上培养不能长时间维持上皮细胞，而且阻止了细胞分层，组织工程界开发了3D皮肤模型来再现体内类似结构，并通过整合气液界面设计了一个更具有生理相关性的环境。人的皮肤由下列初级层组成，它们具有附属的功能：表皮层、真皮层和皮下组织。将不同皮肤层整合到细胞模型中，目前的皮肤模型可分为含角质细胞的重建人表皮模型、含角质细胞和成纤维细胞的代表真皮和表皮隔层的全层模型，以及带有额外细胞类型（如黑素细胞、干细胞等）的全层模型。由于其结构简化，重新建立人表皮（RhE）模型具有较高的重现性，因而被广泛接受。RhE细胞模型由人源性角质细胞接种在聚碳酸酯半透膜上，并将其纳入细胞培养系统，置于标准孔板中，如商业化的Transwell®系统（Corning Inc.，Corning，NY，USA）。该装置将培养物放置在气液界面，皮肤表面暴露在空气中，形成生理环境类似的培养条件。目前，有开放的皮肤模型，以及商业的模型，如EpiDerm™（MatTek in vitro life science laboratories, Bratislava, Slovak Republic），EpiSkin™（EpiSkin, Lyon Cedex, France），SkinEthic™（EpiSkin），EpiCS®（CellSystemsGmbH，Troisdorf，Germany），和LabCyte（Japan Tissue Engineering Co., Ltd. [J-TEC], Aichi, Japan）。ALEXANDRA协会遵循非营利性和无专利的方法，为制作和测试开放的3D皮肤模型提供了方案。2. Background2.1. 基于重构人表皮的皮肤毒性试验的最新进展从监管角度来看，评价和预测有毒化合物和药物对皮肤的有害影响，3D模型系统必须经过一系列广泛测试化合物的验证。如果通过欧洲替代方法验证中心 （ECVAM） 证实和经济合作与发展组织（OECD）测试指南（TG），具有指定测试技术的模型就可以作为可接受的工具用于皮肤毒性测试。到目前为止，OECD提供了用于皮肤腐蚀和刺激的指南测试的指南，分别基于OECD TG 431和439。2.2.器官芯片平台和微生理测量由于目前的模型在生物学的相关性上，只提供有限的意义，所以毒理学领域测试正朝着实现器官芯片（Organ-on-Chip，OOC）仪器的方向发展。器官芯片系统描述了一种包含灌注小室的微流体细胞培养装置，在生理相关条件下培养活细胞。然而，大多数OOC平台仍然严重依赖端点分析方法，缺乏的不同时间点的测试方法。此外，化学标签，如荧光标签可能会潜在地影响细胞代谢从而改变实验结果。因此，采用无标签技术的实时读数的集成设备，对于测量进行空间和时间解析的是非常有意义的。２.３. 皮肤/重建人表皮的跨上皮细胞层电阻由于潜在的有害化合物会影响皮肤厚度，厚度的测量也是早期研究的参数之一。破坏性测量，例如活组织检查，或非破坏性测量，如共焦拉曼光谱仪和超声波成像。其中最传统的方法和有用的细胞培养的应用就是测量皮肤通透性屏障，以评估上皮或内皮组织的活力和功能。在这里，跨上皮细胞层电阻（TEER）提供了一种无标记和快速的技术来研究皮肤完整性。TEER值代表了一层或几层细胞层的电阻值。２.４. 目前跨上皮细胞层电阻测量的缺点和跨上皮细胞层电阻自动化测量的需要除了微加工方法，还有一些商业上可用的外部测试系统，如“伏特-欧姆计”（World Precision Instruments, Sarasota, FL, USA）,，它可以现成的。由于缺少与细胞培养系统的整合，研究人员需要手动将细胞培养物从生物培养箱放到测量系统。这个过程缺乏重现性和标准化，也不能提供高通量测量的能力。虽然下一代的电极室（如Endohm室）可以直接测量，但是培养基以及试剂都必须手动加入，用于长期培养和药物研究案例。因此，扩展的研究是不可能的，因为旧的介质不能从培养系统中取出，也没有自动灌注新鲜的培养基。总而言之，目前的TEER测量系统仍然严重依赖手动操作和手持式系统，影响了测量的稳定性，从而影响了整体实验的再现性。经济合作与发展组织（OECD）认为，一个可接受的测试方案，分析重现性是验证中的一个基本标准。因此，TEER领域通过集成自动TEER监控和采集，系统能够在培养基频繁变化的情况下执行编程模式测量，也非常有意义。在此，我们介绍了一种新的自动监测测试和采集数据的微生理测量系统（IMOLA-IVD，德国cellasys）用于TEER测量。通过一个密封设计的商业化，用聚碳酸酯膜培养的表皮细胞RhE细胞模型。应用TEER测量用于研究RhE培养，并集成到自动化的流体平台，可以精确灌注培养基和加药。此外，我们能够监测细胞外酸化率（extracellular acidification rate， EAR）。实证研究的目的是通过集成自动化灌流系统和集成测试平台，实现实时动力学测量，同时保证测量稳定性。本研究演示了一种评估皮肤完整性的无创的测量方法的验证和应用。3．Materials and Methods3.1. 体外诊断智能移动实验室概述  IMOLA-IVD是一种芯片上的实验室测量系统，用于自动监测L929小鼠成纤维细胞和EpiDerm™重建人表皮细胞模型的TEER和EAR。IMOLA-IVD的基本操作已经在之前的工作中进行了描述，简单地说，每个IMOLA-IVD包括一个电源、模拟和数字模块，以及一个集成了传感器的生物芯片，该传感器被动地监测细胞模型的微环境。标准的IMOLA-IVD实验是通过装载数据采集和链接应用DALiA 2.0软件的个人计算机实现自动化的，以控制一个蠕动泵和连接6个IMOLA-IVD系统的微流控通路。泵在ON和OFF状态之间循环。在OFF泵关闭周期，细胞能够代谢培养基中的营养物质；在ON泵打开周期，营养丰富的培养基被灌流到细胞中。3.2 改进的BioChip-D小室生物芯片模块包含一个传感器芯片连接到电路板并连接到一个圆柱形密封小室，用以保护芯片的连接并连通细胞及培养基。一个流体头直接连接密封小室，形成一个液体密封、静态微容积（~ 6μL）的反应室，在集成的传感器表面测量细胞外酸化率（EAR）和氧合作用 （图1a）。然而，需要测量RhE的情况下，多孔膜上培养的细胞不适合标准生物芯片或标准的IMOLA-IVD叉指电极传感器（IDES）测量电阻。为了克服这些限制，新的密封小室和流体头的设计，以保持空气-液体使用Pro/Engineer Wildfire 4.0 （PTC Inc., Needham, MA, USA）。密封用Ultimaker 2 （Ultimaker BV，Geldermalsen，Netherlands），使用聚乳酸（PLA）和硅橡胶医用粘合剂（Corning Inc., New York, NY, USA）连接到生物芯片BioChip。重新设计的BioChip小室适用于扩大培养室和其他多孔膜上培养的细胞（图1b）的RhE。3.3. L929细胞与重建人表皮细胞的制备与培养记录小鼠成纤维细胞（L929）和重建人表皮细胞（RhE）的跨上皮细胞层电阻值。L929细胞在加10%胎牛血清（FBS） 和10 μg/ml gentamycin （Thermo Fisher,Waltham, MA, USA）。细胞按照标准的实验室规范（GLP）培养，并保存于37℃和5%的培养箱中培养后，在95%融合度时，细胞传代，100,000细胞种在12mm Transwell®上，孔径3 μm的多孔膜（Corning Inc.）。transwell随后被放置在6孔板上，并在1ml DMEM中再孵育24小时，然后转移到modified BioChip中。L929细胞是我们实验室的标准细胞系，用于验证实验。将EpiDerm™RhE细胞模型转移到6孔板上，并在5.5mm/5mL的MatTek无血清长期培养基（#EPI-100-NMM-250） （MatTek in vitro life science laboratories）。每48小时交换一次培养基，直到转移到BioChips中TEER实验。实验开始前24 h，将培养基减少到0.9 mL然后放在12孔板里。Modified BioChip-D在70%乙醇中室温灭菌处理20 min后，用无菌去离子水冲洗。生物芯片灌流无缓冲DMEM处理24 h以稳定温度，然后将膜培养物放置在芯片上。3.4. 自动化灌流系统的介绍设计了一种自动灌流系统来自动化监测在生物芯片上培养48小时以上的RhE细胞模型的TEER。该系统由两个流体模块（FM）组成，通过与Tygon® E-3603 （ProLiquid GmbH, Ueberlingen, Germany）管道连接成独立的管道。这些独立的网络通过IMOLA-IVD泵标准设置的ON/OFF开关程序，向基底细胞提供营养丰富的细胞培养基，并定期向Transwell®膜的顶部区域，泵入磷酸盐缓冲盐溶液（PBS）。如图2所示。培养基流入模块在无缓冲的DMEM和0.2%SDS的培养基之间切换，提供给膜底部的细胞。TEER测量模块连接到PBS进行TEER测量或测试可用于接种RhE表面的水溶性测试物。L929细胞培养在多孔膜小室上，RhE细胞模型培养在Modified BioChip-D上，通过无缓冲的DMEM与灌流泵进行36小时周期的培养。对于L929细胞，为监测细胞酸化，泵ON时间为5分钟，而泵OFF时间为5分钟、10分钟、30分钟和55分钟。对于RhE细胞模型，泵周期为5分钟ON, 10分钟OFF, 5分钟ON, 25分钟OFF, 5分钟ON, 10分钟OFF。在25分钟的泵OFF阶段，通过将PBS泵入膜顶部小室，在芯片上的电阻传感器和流体头部的导线电极之间建立电路连接，记录TEER测量。以60 μL/min的速度将750 μL的PBS泵到芯片上的膜上，然后以120μL/min的速度去除。TEER测量是在25分钟泵关闭期间进行的。在预定的稳定测量周期后（L929细胞和RhE细胞模型分别为47和36小时），将0.2% SDS无缓冲DMEM泵入芯片作为阳性对照。用SDS培养基灌注至少12小时，以证实对照组对测得的TEER的影响。4. Results and Discussion4.1. 重新设计的经上皮电阻密封功能将多孔膜插入培养室，确定培养室体积为~170 μL。匹配样机通过膜下形成的入口孔灌注到腔内，膜底部的孔允许新鲜营养物质被动地扩散到细胞的基底层和细胞的废物扩散出细胞。在泵ON循环期间，营养消耗后的培养基泵出腔室（图2）。RhE培养物的顶端表面暴露于环境空气中，经过长时间的培养，刺激分化成一个ALI的分层。为了测量这些培养物的TEER，重新设计的流体头包含一个双向的入口/出口阀，周期性地分配一定量的PBS溶液。这种方法连接多孔膜顶端腔的导线电极（见图1b）和传感器芯片上的平面IDES电极之间的电路。溢流阀使TEER电极淹没在稳定的培养基体积中，防止溢流。连续5分钟记录膜的TEER，然后在测量之后取出PBS以维持ALI。4.2. 小鼠成纤维细胞的胞外酸化率的测定使用自动测量程序实时测量EAR，将L929细胞生长在聚碳酸酯膜。用未缓冲的DMEM以50 μL/min的速率灌注L929细胞。图3显示了在泵交替阶段测量的pH值（以mV为单位）。红色条表示泵OFF阶段，灌流新鲜培养基，细胞活跃地将营养物质代谢为酸性废物，生物芯片上的金属氧化物传感器会检测到这些代谢物。绿色条表示泵ON阶段。在此阶段中，膜底部灌注新鲜培养基，提供营养给膜上培养的细胞。从图中可以看出，当培养基酸化时，泵OFF阶段55分钟内，电压会增加~5 mV，而较短的时间内不会产生明显的电压变化。4.3. 小鼠成纤维细胞对十二烷基硫酸钠培养基的代谢反应一旦泵ON周期结束，测量的电压迅速下降，直到达到基线（稳态）值。在下降之前存在一个短暂的延迟，这可能是由于新鲜培养基与芯片上已有的酸化培养基之间的混合导致的，因为出口的位置高于进口。在58小时，测量的信号下降。这可能是由于细胞膜破裂和细胞内内容物释放到培养基中。在56小时，细胞已经溶解，因此不会产生废物酸化周围的介质，导致在55分钟泵OFF阶段信号变平坦。图4描述了在实验持续时间55分钟OFF阶段持续测量EAR。可以看出，加入SDS后，EAR突增，然后迅速降至零以下，表明细胞裂解。然后它逐渐趋近于零，直到实验结束。4.4. 小鼠成纤维细胞的TEER（跨上皮细胞层电阻）监测除了监测L929细胞的代谢率，在25分钟泵OFF期间还可以监测TEER值。在TEER测量过程中，随着PBS泵入测量小室以连接电路进行测量，数值会发生变化。TEER开始无数值，因为电极对之间存在断路。嵌入在流体头的导线电极浸入PBS中，与膜下的芯片上的导电电极一起连接形成电路。PBS在细胞上停留5分钟，泵OFF以进行稳定监测。然后PBS被泵出测量小室，直到下一个测量循环。图4显示了从25小时开始测量的EAR和TEER。在泵OFF阶段，EAR由线性回归计算。表1总结了SDS加入前和加入后的结果。实验开始24小时后，实测的实数电阻稳定在190欧姆附近，虚部电阻为-40欧姆。因为已知L929小鼠成纤维细胞在培养中保持单层，预计电阻将稳定在一个低水平。暴露于0.2% SDS培养基8小时后（时间为第 56小时），实数电阻下降14.8%，对应加入SDS导致的细胞死亡。虚部电阻下降6.11%。这些结果表明，开发的密封设计和泵模块能够进行自动化电阻测量。4.4. RhE细胞模型的TEER（跨上皮细胞层电阻）监测使用上述相同的设置对重建人表皮细胞模型（reconstructed human epidermis，RhE）进行连续监测TEER约50小时。在前12小时，TEER值保持相对稳定，如图5所示。在36小时后，用0.2% SDS处理细胞后2小时，平均TEER值突然下降。（b）SDS培养基加入前，TEER值最初是直线增加的，在用PBS加入顶端腔后，然后迅速稳定并保持，直到5分钟的测量周期结束。当从上部小室中移除培养基后，由于电路短路，TEER再次变成无数值。在换到SDS培养基2小时后，TEER曲线的变化就可以被检测到。起初，TEER值与加入SDS培养基前相同。但是TEER值在测量期间稳步下降，直到稳定在一个更低的值。这导致测得的平均TEER降低，这与加入SDS引起的细胞裂解吻合。此外，随着SDS培养基加入时间的增加，电阻的初始峰幅值减小。尽管暴露于SDS，最初的峰值的持续似乎表明细胞存活。值得注意的是，以前的IMOLA-IVD研究是在简单的单层细胞上进行的，相对较低浓度的0.2% SDS就可以较短的时间内完全杀死细胞。而更加严重细胞裂解过程相对缓慢可能归因于更复杂的3D皮肤模型中培养的细胞的生命力的增强。5. Conclusions在这里，我们提出了一种创新的方法，以非侵入性监测细胞培养在二维和三维多孔膜在各种形态。我们最先进的生物芯片密封设计被证明支持小鼠成纤维细胞的单层，以及更复杂的重建人表皮细胞模型（reconstructed human epidermis，RhE）。此外，设计了一个两部分的自动化流体系统，处理将PBS溶液输送和加入到顶部腔室进行TEER测量。使用L929细胞，设计了一个标准的操作方法，通过定期测量TEER来监测代谢率和屏障完整性。SDS培养基加入之前保持的细胞活力，作为阳性对照。在用L929细胞进行初步试验后，对重建人表皮细胞模型的TEER进行监测。TEER值显示皮肤模型可以培养至少24小时，加入SDS培养基后的细胞裂解也会延迟。在以后的实验中可以使用更高的SDS浓度来提高对照的响应时间。总的来说，这项工作是一项概念验证实验，证明了IMOLA-IVD用于复杂3D组织模型的能力，作为非侵入式自动化细胞分析的工具。值得注意的是，这项工作还提出了一个维持ALI的自动TEER测量的方法。

类器官代谢分析仪：微生理系统监测Transwell上的三维小肠模型Tissue-on-a-Chip: Microphysiometry With Human 3D Models on Transwell Inserts微生理测量已被证明是用于监测活细胞能量代谢以及细胞间相互作用的有利工具，该技术之前主要用于监测二维的单分子细胞层。最近，我们的研究小组发现，微生理测量也可以自动检测皮肤3D培养物的胞外酸化速率和跨上皮电阻值(TEER)，该培养物是培养在3D打印的封闭的生物芯片之中来维持气液界面(ALI)。在这项工作中，我们提出了一种优化的多通道芯片用于监测商品化的3D小肠组织模型的TEER。实验持续1天，60分钟为重复周期，每个周期包括三个阶段：(1)维护气液界面(ALI)；(2)加入测量培养基或者试验物；(3)清洗。初始平衡8小时后，加入细胞毒性和屏障破坏的化学物质（0.2%十二烷基硫酸钠），导致TEER随时间变化逐步降低，而以前传统的细胞毒性测量方法是无法监测到这种变化的。这项工作证实了使用自动气液界面(ALI)的多通道实时监测三维肠模型的TEER的可行性。培养的人体组织结合智能移动检测技术，为在体外诊断提供了一个非常有前景的研究工具，特别是在毒理学，细胞代谢研究，药物吸收等研究领域。Keywords: microphysiometry, transepithelial electrical resistance, label-free monitoring, intestinal model, automated air–liquid interfaceINTRODUCTION尽管在药物开发的临床前阶段进行了完整的试验，但未发现的毒性依然是临床阶段失败的一个常见原因（Kola and Landis, 2004; Marx et al., 2016）。药物毒性的研究之中，重要的一点就是要考虑小肠的吸收效应。临床前体内评估通常依靠小鼠或大鼠模型来代表人类特征（Le Ferrec et al.， 2001）。然而，啮齿动物模型不能完全可靠地预测药物对于人体的各个方面的效应，所以就可能出现对药物毒性或再吸收的错误评估。因此，近年来的研究重点已转移到改善体外毒性研究。在体外研究可重复性和分离影响变量的能力（Ferrick et al., 2008），有助于更好地理解毒性机制。但是2D细胞培养和细胞系（Leonard et al., 2010; Ayehunie et al., 2018）有限的生理相关性和细胞培养实验中缺乏全自动分析的问题已经在之前的文献中讨论过（Gómez-Sjöberg et al., 2007; Meyvantsson et al., 2008; Li et al.,2013）。 3D细胞培养领域的最新进展解决了这些局限性，并提供了新的模型来增强对新药安全性和有效性的信心（Fang and Eglen, 2017; Park et al., 2018）。采用“组织芯片”方法，通过体外培养的组织和器官模型，来改进对吸收、分布、代谢和排泄（ADME）的评估（Madden et al., 2018）。从结肠（大肠）癌中提取的Caco-2单层细胞是一种广泛应用于体外药物吸收和毒性评估的细胞系，它可以代表三个吸收途径：跨细胞（细胞内途径）、细胞间（细胞外途径）和载体转运。但是，细胞系和小肠组织的相关性有限。文献中（Shah et al., 2006）已经描述，它只能预测跨细胞（细胞内途径）渗透。此外，贴壁培养的单层Caco-2培细胞缺乏细胞-细胞和细胞-细胞外基质的相互作用，不能模拟人小肠的多层复杂结构。为了克服这种生理相关性的不足，科学家开发了新的三维重建人体组织模型（Li et al., 2013; Ayehunie et al., 2018）。在空气-液体界面（ALI）上培养三维小肠器官模型，弥补了体外培养的2D的形态学缺陷（Nossol et al.，2011）。使用体外组织培养进行药物效应分析的常用方法需要很多重复的组织样本，还有繁琐复杂的实验步骤。方法和测量的复杂性导致需要大量的人工以及细胞或组织相关的硬件设备，而这些又有可能导致细胞损伤，增加结果的误判（Blume et al.， 2010）。相对手动测试，实时自动分析细胞存活率是一种更优化的测量吸收和毒性的方案。此外，有了实时监测的数据，就可进行短期和长期的分析。对于长期的监测，自动化设备取代人工更换培养基和添加试剂，以提高实验的通量和重复性（Kempner and Felder, 2002）。总之，对细胞培养进行实时连续测量可以同时观察到多个细胞代谢参数，并且支持ALI培养的自动化微流控系统。我们在该研究中提出了这样的一个测试系统：组织芯片（tissue-on-a-chip）结合ALI培养细胞（图1）。通过生物芯片以及3D打印封闭的培养腔体成功培养了3D重建人类小肠模型。   在这项工作中，我们首次提出了一个三通道、全自动的组织芯片测量系统（IMOLA-IVD，德国cellasys），该系统可以测量跨上皮细胞电阻（TEER），进一步深入了解上皮细胞层的组织形态和屏障特性。值得注意的是，与之前描述的单通道芯片系统相比，该系统在三个通道中都有一个自动的ALI，使用的细胞培养基更少（Alexander et al., 2018）。因此，现可以一次在三个的芯片上进行平行实验，例如：测试物，对照和空白。MATERIALS AND METHODSHuman 3D Tissue Model实验采用重建的三维肠组织—EpiIntestinal-FT。这个基于人体细胞的3D组织整合了肠上皮细胞、Paneth细胞、M细胞、簇细胞和小肠干细胞以及人小肠成纤维细胞，它被培养在ALI模拟生理条件之中。EpiIntestinal-FT模型可以用来表征小肠功能的不同方面，包括屏障功能、代谢、炎症和毒性反应（Ayehunie et al ., 2018）。Microphysiometric System德国cellasys公司的IMOLA-IVD是一个由自动化微流控系统扩展的微生理测量系统（Brischwein和Wiest, 2019）。该设备的详细设置在之前的报告中有描述（Weiss et al.， 2013）。简单地说，就是生物芯片上装有两个交叉电极结构的电阻传感器、两个电化学的pH传感器、一个电流的测氧传感器和一个温度传感器。来自传感器的测量数据被数字化记录并传输到计算机上的专有软件—Data Acquisition and Link Application（DALiA）软件。该软件负责流体的数据的处理和流路的控制，使用一个定制化的开/关协议，以控制蠕动泵和微流控系统（双向交界处的阀门）。使用这些工具可以并行监控6通道IMOLA-IVDs同时获得实时数据进行对比分析，例如测试物和阴性/阳性对照通道。为了更好地使用和维护IMOLA-IVD和ALI，Alexander et al（2018）开发了一种新的封闭的培养腔设计，用Ultimaker 3D打印机打印的聚交酯并粘在生物芯片上。有了这种封闭的培养腔，就可以产生两条不同的微流道：一条在培养腔顶端，一条是培养腔侧面。通过一根顶端金电极和一根侧面金电极传感器可以测量在Transwell半透膜小室上培养的三维组织的TEER。测量TEER的频率为10kHz，外加电压为30mv。结合密封腔的生物芯片和用于根尖线的射流头如图1所示。结合封装的生物芯片和流路通道，如图1所示。完整的设置如图2所示。IMOLA suppo系rt 统(ISS-3)包括为IMOLA系统、用于控制流路系统的阀门的开关，以及用于记录气泡探测器数据的电子设备等提供电源。专利的DALiA客户端软件应用程序用于控制测量和记录的数据。泵、流路模块和细胞培养液等IMOLA系统都被安装在通用的细胞培养箱内，保证整个实验都在37◦C。三个通道中的每一个都有两条流路，一条是顶端，一条是侧面，如图3所示。两种流路都可用于将多种物质注射到细胞环境之中，如培养基和测试物。在这篇文章中，顶端流路可以引入两种不同的物质：基础培养基和测试物。在TEER测量过程中，在培养的组织的顶端加入LBM低缓冲培养基，从而在顶端和基底侧面（液体界面）之间建立一个导电连接。另外，顶端覆盖了一层薄薄的培养基（空气界面）（200nm）。基底侧面流路定期向培养的组织的基底外侧注入新的营养物质。在本研究中，流路系统的连接如图3所示。1号阀用于更换顶端培养基；2号阀负责插入的培养小室的顶端的填充或排空；3和4号阀门分别将顶端和基底侧面的培养基注入到生物芯片或废液瓶中，5和6号阀门交替切换到过滤的空气。一个IMOLA-IVD使用6个阀门和单向模式控制的4个泵通道。这里展示的装置使用三个IMOLA-IVD模块平行地研究三个培养小室（三个生物芯片，每个都有一个顶端和一个基底侧面）。Assay Preparation for Verification为验证流路系统的设置和测量，可以用磷酸缓冲液（PBS）做预实验。对于顶端和基底侧面，使用渗透压为300±10% mOsmol/kg的PBS溶液，通过顶端通道的试验物质为1000±10% mOsmol/kg的PBS溶液。Assay Preparation for the EpiIntestinalTM Model开始前，先将组织进行预培养以稳定状态。然后注入5 ml 基底侧面培养基 SMI-100-FT-MM (MatTek In Vitro Life Science Laboratories)；顶端加入200 μl 的SMI-100-MM (MatTek In Vitro Life Science Laboratories) ；然后在 37◦C和5% CO2培养箱至少培养24 小时。实验前，对整个系统进行灭菌和培养液预灌流。所有管道和顶端通过2.5%的次氯酸（Sigma Aldrich, #71696, diluted with double-distilled H2O）消毒20分钟进行灭菌处理，生物芯片密封腔是通过浸润在70%乙醇20分钟进行灭菌处理。随后，基底侧面和顶端注入培养基，对管道进行预灌流处理。将整个系统和培养基放置在37◦C和5% CO2培养箱之中过夜。最后，将含有小肠组织的培养小室放置在经灭菌处理的生物芯片上。基底侧面流路使用SMI-100-FT-MM (MatTek In Vitro Life Science Laboratories)。顶端流路使用无缓冲DMEM (cellasys GmbH, Kronburg, Germany: SOP-G200-006; see supplement material) 和溶解在 DMEM之中的测试物。最后使用浓度为0.2或2.0%的十二烷基硫酸钠(SDS)作为破坏3D小肠组织屏障的物质。在预先设定的灌流周期内，确定了两个流体通道的时间顺序。TEER测量周期包括：35分钟ALI，10分钟TEER测量和15分钟的清洗周期。第一个ALI周期用于流体系统的内部预灌流，将程序设定为每个循环为1小时，持续灌流24小时。第8小时，将顶端培养基更换为含0.2% SDS的培养基，循环一个周期，然后更换为不含SDS的培养基。RESULTS Verification of the Measurement Procedure and the Fluidic System每个TEER测量周期由测量阶段和冲洗阶段，循环程序的一致性可以确保整个监测期间的变化肯定是由待测物引起的。每次TEER测量开始时，培养小室的顶端为空的，慢慢填充相应的培养基。一旦达到足够体积，TEER电极被浸没在相应的培养基之中，并开始够测量电阻。使用PBS溶液进行系统验证的方法如图4。TEER的振幅的最终标准值是244Ω。随后加入测试物，电导率与PBS相比有所增高，电阻的振幅的准值下降到132Ω。重新注入PBS后稀释待测物，再吸出。如果没有第二次注入PBS，测试物将一直保留在培养环境之中，持续影响细胞。如图4所示，需要两次清洗的循环才能完全除去测试物。结果表明，IMOLA-IVD装置的灌流系统和传感器的在整个测量过程之中工作正常。因此可得出结论，传感器是精确稳定的，振幅变化对应于注入的PBS渗透压的变化。Control Experiments为了验证该设置，在一个IMOLA上设计了一个带有正负对照的测试实验。在不添加任何物质的情况下监测小肠组织的TEER值20小时（阴性对照），然后在2.0%SDS的影响下监测20-28小时（阳性对照）。TEER测量每小时进行一次。在每个测量周期中，TEER值可以用PBS测量后期的平台期的平均值来表示，如图4所示。这些平台期的平均值被整合成一个连续的TEER数据图。图5显示了TEER值的大小和相位（左）以及实部和虚部（右）。TEER值通常只显示大小,但是，为了显示所有的测量值，测量的阻抗在两种常用坐标系中充分显示，即在极坐标下（左）表示大小和相位，在笛卡尔坐标下（右）表示实部和虚部。其数学表达式如公式1所示：Tissue-on-a-Chip ModelFigure 6 加入0.2% SDS 的肠组织模型。经过开始的5小时，TEER达到270Ω的平均值。第8小时加入测试物SDS，TEER迅速上升，随后线性降低，在第18小时降到到225Ω。需要注意的是，SDS不会改变细胞培养基的渗透压浓度。测定的0、0.2和2.0% SDS的培养基的渗透压浓度 (OSMOMAT 030, Gonotec, Berlin, Germany) 基本一致(300±5% mOsmol/kg)。CONCLUSION在这里，我们提出了原理证明实验使用三通道微生理测量系统测量重建肠上皮模型的TEER与ALI。参数的测量是非侵入性的、实时的，并且系统定期自动更新培养基。在TEER测量中，培养小室的顶部也注入培养基。PBS和2.0% SDS的验证实验也证实了该测量方法和系统。8 h后加入测试物（0.2% SDS）后发现TEER呈下降趋势。在未来的工作中，我们建议进行后续实验，使用测试物和微传感器来获取pH值和溶解氧的数据(Wiest et al.，2016)。总的来说，IMOLA-IVD系统已被证明是一种灵灵活、可定制的系统，用于分析各种细胞培养物模型，包括贴壁的2D细胞系，3D球状体，以及用于重构人类表皮和肠的组织/类器官芯片。未来的工作将包括研究和优化灌流循环(例如，增加测试物质之前的稳定期的时间)和电极几何形状，以及光谱测量信息的收集（Gilbert et al., 2019; van der Helm et al., 2019），以建立一种可用于肺或其他粘液细胞模型的多功能的组织芯片的研究工具。DATA AVAILABILITY STATEMENTThe datasets generated for this study are available on request to the corresponding author.AUTHOR CONTRIBUTIONSAll authors listed have made a substantial, direct and intellectual contribution to the work, and approved it for publication

TissUse多器官串联芯片用于结核病疫苗开发和候选药物的测试翻译整理：北京佰司特科技有限责任公司 New Multi-Organ-Chip project towards vaccine & drug candidate testing for Tuberculosis TissUse获得比尔和梅琳达·盖茨基金会的资助，在HUMIMIC芯片上开发人类临床前肺-肝-淋巴结串联共培养物，用于研究感染结核分枝杆菌的结核病疫苗开发和候选药物的测试。这一合作将有助于开发结核病候选疫苗和治疗模式。TissUse今天宣布，它已经从比尔和梅琳达·盖茨基金会获得了一个为期3年的项目的资金。联合研究活动的目标是开发一种血管化的微生理系统，将人肺、肝和淋巴结类器官串联起来，用于筛选结核疫苗候选药物和治疗模式。“我们很高兴在这一项目中与结核疫苗行动(TBVI)作为协调员和国家科学研究中心(CNRS)作为科学伙伴进行合作。- Uwe Marx教授，TissUse CSO。微生理模型将支持组织稳态，并将在数周内对治疗效果进行监测。空气传播感染结核分枝杆菌后，新模型系统旨在展示结核分枝杆菌"吞噬受阻"、气血屏障破坏、淋巴结组织活化及肉芽肿形成和维持等疾病特异性表型。然后，该疾病模型将用于测试结核病候选疫苗的筛查。 “我们很高兴能够借助这一项目为开发结核病新疫苗和未来治疗方法作出贡献，并感谢比尔和梅琳达·盖茨基金会支持我们的愿景并资助这一项目。- Reyk Horland博士，TissUse的首席执行官。  原文：Berlin, Germany, November 7th, 2022TissUse will receive funding from the Bill & Melinda Gates Foundation to develop a human preclinical lung-liver-lymph node co-culture on a HUMIMIC Chip infectable with Mycobacterium tuberculosis. This collaboration will contribute to the development of Tuberculosis vaccine candidates and treatment modalities.TissUse announced today that it has received funding from the Bill & Melinda Gates Foundation for a 3-year project. The joint research activities have the goal to develop a vascularized microphysiological system interconnecting human lung, liver and lymph node organoids capable of screening Tuberculosis vaccine candidates and treatment modalities.“We are pleased to collaborate in this project with the TuBerculosis Vaccine Initiative (TBVI) as a coordinator and the Centre National de Recherche Scientifique (CNRS) as a scientific partner.” – Prof. Dr. Uwe Marx, CSO of TissUse.The microphysiological model will support tissue homeostasis and will be monitorable for treatment efficacy over weeks. After airborne infection with Mycobacterium Tuberculosis, the new model system aims to show the disease-specific phenotype of “frustrated” phagocytosis, air-blood barrier damage, activated lymph node tissue and granuloma formation and maintenance. The disease model will then be used to test screening of TB vaccine candidates.“We are excited to be able to contribute with this project to the development of new vaccines and future treatments for Tuberculosis and would like to thank the Bill & Melinda Gates Foundation for supporting our vision and funding this project.” – Dr. Reyk Horland, CEO of TissUse.  北京佰司特贸易有限责任公司:类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；单分子质量光度计-TwoMP；灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；蛋白稳定性分析仪-PSA-16；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪（台式）—BST-100；农药残留定量检测仪（手持式）—BST-10A；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

干细胞分化成肝类器官并且进行串联培养方案1         实验目的 该 SOP 描述了由肝癌细胞系（HepaRG）和原代人肝星状细胞 （SteCs） 组成的肝球体的培养，形成肝脏类器官。此外，还描述了将肝脏类器官整合到 MOC 中，可以与其他类器官串联起来共培养。肝球体的生长大约需要 3 小时。从 384 孔微孔板中去除肝球体大约需要 2~5 小时，具体取决于所需的肝球体数量。将肝球体整合到 MOC 中至少需要 1 小时，这也取决于所需 MOC 的数量及所需的肝球体数量。应计算准备细胞培养的额外时间（约 1 周）以及 MOC 的交付时间。 本 SOP 深入描述了 Corning® Spheroid Microplate 384 孔板（参考号 3830）的装载、这些肝球体的后续收集和计数以及它们与 MOC 的集成以进行进一步的动态培养。 所有描述的工作步骤都应在无菌操作条件下执行。应特别遵循正确洗手以及始终使用手套。 2         负责人 主要负责人：Alexandra Lorenz SOP 作者：Naomia Sisoli-Sambo、Juliane Hübner 与本 SOP 中描述的工作步骤的偏差必须立即报告给 Alexandra Lorenz 女士。如果更改获得批准，则必须相应地修改 SOP。 3         多器官芯片（MOC） 的无菌处理 为避免污染，必须遵守无菌实验室工作的通用准则。在将 MOC 放入生物安全柜之前，应先喷洒经批准的杀菌剂（例如 80% 乙醇）对其进行消毒，然后用无菌纸巾擦拭（建议使用浸泡在消毒剂中的市售纸巾）。必须特别注意引入的任何部件（注射器适配器、组织培养小室支架和泵连接端口）它们的连接和盖子。掉在地上的部件必须用无菌、高压灭菌的备件更换。因此，在运行 MOC 时，必须始终提供适当数量的无菌备件。 除离心、细胞计数和培养（37°C，5% CO2）外，所有工作步骤均应在超净工作台中进行。 4         所需材料 名称备注分化的HepaRG细胞8 mio cells/vial HPR116NS, Biopredic星状细胞 （SteCs）SC-5300 （Provitro）ScienCellSteCs培养基SC-5301 （Provitro）ScienCell80%乙醇消毒组织例如 Bode   Chemie GmbH（德国）的   Bacillol AF 纸巾HepaRG   培养基Williams   E基础培养基（500   ml） 不含酚红，含   2.24 g/L NaHCO3），例如PAN-Biotech   P04-29510 或   HIMEDIA AL240-500ML 10% FCS （50 ml）；5 x 10-5mol/L 氢化可的松半琥珀酸盐（500 µl 来自 25 mg/ml 原液）；5 µg/ml 胰岛素（250 µl 来自 10 mg/ml 储备液），例如PAN P07- 04300;2mM 谷氨酰胺（5 ml 来自 200 mM 原液）；5 µg/ml 硫酸庆大霉素（50 µl 来自 50 mg/ml 原液）；0.25 µg/ml 两性霉素 B（500 µl 来自 250 µg/ml 原液）；分化培养基含 2% DMSO 的 HepaRG 培养基Trypsin/EDTA 5x用于收集 HepaRGs0.25% 胰蛋白酶/2.21mM EDTA，例如康宁 25-053-CITrypsin/EDTA 1x用于收集 SteCs0.05% 胰蛋白酶/0.53mM EDTA，例如康宁 25-052-CIPBSw/o Ca 和 Mg，例如康宁 21-031-CVR Gilson   Platemaster 96 道移液器用于   384 孔板的   Gilson Platemaster 适配器移液器吸头试剂容器灭菌Axygen RES-SW96-HP-SI 或   RES-SW12-HP-SI用于   15/50ml 管的离心机二氧化碳培养箱显微镜细胞计数装置泵控制单元TissUse   有限公司泵管2 毫米 x 1.6 毫米聚氨酯泵管，SMC（美国）扳手 1扳手尺寸 7 毫米 （ISO 272）扳手 2扳手尺寸 10 毫米 （ISO 3318）内六角扳手扳手尺寸   1.5 毫米 （ISO 4762）泵连接端口来自 SMC（美国）的 KJS02-M3   型，内六角，端口尺寸 M3微孔板384 孔黑色透明圆底超低吸附肝球体微孔板康宁 3830大口径提示康宁 TF-205-WB-R-S24孔超低吸附板康宁 3473细胞培养处理的培养瓶和培养皿例如康宁定轨振荡器PS-M3D Grant Instruments灰色和斜体字部分由 TissUse GmbH 提供 5         实验操作5.1    样品准备在肝球体形成前 5 天，根据实验需要解冻尽可能多的分化 HepaRG 细胞。一个循环需要 40 个肝球体（每个由 24,000 个 HepaRG 细胞和 1,000 个星状细胞组成）。每个接种满的 384 孔微孔板将提供大约 300 个肝球体。要完全接种满一个 384 孔微孔板，需要 921.6 万个分化的 HepaRG 细胞。由于一瓶分化的 HepaRG 细胞含有大约 800 万个活细胞，因此应计算每个接种满的 384 孔板需要两瓶。请注意：细胞是在完全融合时接种的，以避免去分化。因此，在接种过程可以丢掉一些细胞，因为准备有富余。 每个小瓶 500 µl 分化的 HepaRG 细胞（订单号 116NS）应在 9.5 ml HepaRG 培养基中稀释，以将 DMSO 降低至0.5%的终浓度。以0.2 x 106/cm2的密度将活细胞计数后种到适当的细胞培养皿中（例如，800 万个细胞种到60 mm 2培养皿上，2个培养皿；或1600 万个细胞种到一个 T75 培养瓶上）。5-12 小时后必须在无菌条件下将培养基更换为 10 ml 分化培养基（2% DMSO）。随后，每两到三天将培养基更换为 10 ml 新鲜分化培养基。 SteCs 应在肝球体形成前约 2 天解冻并放入培养物中。一个装有 SteCs 的 T175 培养瓶将提供至少五个 384微孔板。首先需要预热SteCs 的培养基，一个小瓶约 1-2 x 106 SteCs 需用 9 ml 培养基，离心，重悬于 1 ml 新鲜培养基中，然后接种到含有 24 ml 温热的星状细胞培养基的 T175 细胞培养瓶中。第二天更换培养基以去除死细胞。 对于扩大培养，SteCs 可以生长到 70% 的融合，然后细胞开始增殖。无菌条件下的培养基更换必须每两到三天进行一次。不应使用通道数高于 P8 的 SteCs。                                               图 1 单层分化的 HepaRG 细胞和 HHSteC 的相差显微镜。 （A） HHSteC 在第 9 代的相差图像和（B） 在接种后 4 天分化的 HepaRG 细胞。比例尺 100 µm。 5.2    细胞的收集准备 HepaRG 细胞进行收集，用 10 到 20 ml PBS 冲洗两次。洗涤后，使用胰蛋白酶/EDTA（5x；0.25% 胰蛋白酶/2.21mM EDTA；室温）从细胞培养瓶底部分离细胞。为此，将培养皿中的适量胰蛋白酶/EDTA 涂抹在细胞上，并在 37°C 下孵育 5 至 10 分钟。开始 HepaRGs 的胰蛋白酶消化后，使用胰蛋白酶/EDTA（1x；0.05% 胰蛋白酶/0.53 mM EDTA）收集星状细胞，并在 37°C 下孵育 5 至 10 分钟。通过这种方式，几乎可以同时收集细胞。用显微镜检查细胞的溶解情况并轻轻敲击细胞培养瓶的侧面以加速该过程并脱壁仍贴壁的细胞。一旦所有细胞从培养容器底部脱离，通过添加相同量的胰蛋白酶抑制剂或两倍量的培养基来抑制反应。将细胞溶液转移到 50 ml 离心管中， 然后用 10 ml PBS 冲洗培养容器两次，并将 PBS 添加到离心管中。细胞团块可以通过溶液的重复再悬浮来分散。此时可以合并来自多个培养容器的相同类型的细胞。 一旦进入溶液，将细胞以 300 x g 离心 5 分钟，然后吸出上清液并将细胞沉淀重悬于 1 至 2.5 ml 细胞培养基中。对 SteCs 和 HepaRG 细胞都使用 HepaRG 培养基（不含 DMSO）。用细胞计数跟踪细胞的再悬浮。请彻底混合细胞溶液（HepaRG 和 SteCs）。用 40 µl HepaRG 培养基（1:5 稀释）稀释 10 µl HepaRG 细胞溶液。彻底混合新溶液并用 10 µl 台盼蓝工作溶液（1:2 稀释，总共 1:10 稀释）稀释 10 µl HepaRG 溶液。彻底混匀 StesCs 细胞悬液，并用 10 µl 台盼蓝工作溶液（1:2 稀释）稀释成 10 µl 细胞悬液。在室温下孵育计数溶液 2 至 3 分钟。计数前充分混合。 将计数溶液加载到先前准备好的血细胞计数板中，并在计数室的四个大方格内对每种细胞类型的活细胞和死细胞进行计数。计算每个细胞类型的每个大方块的活细胞的算术平均值。 每毫升的细胞计数计算如下： 或者根据操作说明使用 SOL Counter （半导体式全自动细胞计数仪） 自动确定每毫升的细胞计数。 5.3    在384 孔微孔板中培养肝球体5.3.1      细胞悬液的制备每个肝球体需要 50 µl 细胞悬液。这相当于每个微孔板 19.2 ml （50 µl x 384）。由于移液过程中的波动，每板应制备至少 22 ml（最好是 23 ml）的细胞悬液。要在 50 µl 的体积中生成具有 1,000个 SteCs 和 24,000 个HepaRGs（1:25 比例）的肝球体，细胞悬浮液的浓度应为 20,000个 SteCs/ml 和 480,000 HepaRGs/ml。 使用 （1） 中计算的每毫升细胞计数生成肝球体细胞悬液所需的收集 HepaRG 细胞和 SteCs 的确切体积，具体取决于所需的肝球体细胞悬液体积： HepaRG 和 SteCs 悬浮液的计算体积用于球状细胞悬浮液，添加培养基以达到所需的体积（例如，一个 384 孔球状板为 23 ml）。 5.3.2      将细胞种到 384 孔微孔板中移液器和所有其他设备需要用乙醇 （80%） 擦拭，并在使用前放置在无菌细胞培养工作台下。先前制备的肝球体细胞悬浮液应彻底混合，并将加载一个微孔板所需的大致量填充到试剂储液罐中（推荐储液罐：RES-SW12-HP-SI，Rillenreservoir）。使用 Gilson Platemaster 96 通道移液器和 384 孔板适配器将 50 µl 细胞悬液种到 384 孔微孔板的每个孔中。 注意：-            将 50 µl 细胞悬液直接放在每个孔的底部-            确保所有移液器吸头都牢固地推到 96 通道移液器上。-            对于没有气泡的精确移液，推荐使用反向移液技术。-            为确保细胞在悬浮液中均匀分布，在每次移液步骤前轻轻摇动悬液管。 应将接种满的微孔板短暂离心（250 g，1-2 分钟），以确保孔壁上没有细胞悬浮液，并将细胞收集在孔底。肝球体在 37 °C 和 5% CO2 条件下连续 3 天。图 2 肝球体形成的光学显微镜。 HepaRG 细胞和 SteCs 在肝球体形成的第 1 天和（B）第 3 天的 384 孔超低吸附板（A）的孔中。比例尺 100 µm。5.4    从 384 孔微孔板中取出肝球体为了收集肝球体，将 384 孔微孔板放在层流罩下。使用 200 µl 移液器和大口径移液器吸头，小心地将肝球体从 384 孔微孔板中取出。可以在一个移液器吸头中收集多个肝球体。在平底 24 孔低吸附板的每个孔中收集 40 个肝球体。计数肝球体，并将 40 个肝球体放入每个孔中。可用深色背景（例如黑色铝箔纸）更容易看到 24 孔低吸附板中的肝球体。将 40 个肝球体转移到一个孔中后，小心取出旧培养基并加入约 1.5 ml 新鲜 HepaRG 培养基。之后，在显微镜下对每个孔中的肝球体进行计数。丢弃任何看起来太小或聚合不良的肝球体，类似于薄层而不是肝球体。 注意：用移液器吸头收集肝球体时不要吸入任何空气。肝球体应始终悬浮在培养基中。空气的吸入会导致肝球体卡在移液器尖端。应该习惯于在拿起肝球体之前用培养基润湿移液器尖端。此外，使用移液器的时候使用超过所需的程量。这两点都可以降低肝球体粘附在内移液器吸头表面或肝球体漂浮在培养基表面上的风险。 为避免融合并进一步提高肝球体的圆度，将 24 孔低吸附板置于振荡器上，直到 MOC 实验开始（12 至 48 小时）。为此，用乙醇彻底消毒振荡器，并将其放入培养箱（37 °C；5 % CO2）中。将超低吸附板放在振荡器上，使用以下设置并确保培养基不会因摇晃而溢出： 轨道式往复式Vibrio循环式模式4030°5°00时间25OFF5ON 5.5    将肝球体转移到多器官芯片平台（MOC）在将肝球体转移到 MOC 之前，请确保 MOC 已做好充分准备（充满培养基、正确拧入、清洁、蠕动泵的功能已验证；有关详细信息，请参阅 SOP 1 或 6）。拧下所需培养小室的盖子，并通过将板保持在倾斜位置来收集超低吸附板孔底部边缘的肝球体。可用深色背景（例如黑色铝箔纸）更容易看到 24 孔低吸附板中的肝球体。 使用大口径移液器吸头吸取肝球体。握住移液器，尖端朝下，使肝球体沉淀在尖端。然后通过将移液器尖端放入培养基中，让肝球体沉入所需培养小室的底部。尝试在培养小室加入尽可能少的培养基。转移所有肝球体后，将盖子拧回培养小室上。 40 个肝球体用于 MOC 的一个循环（仅加载一个培养小室）。 图 3 2-OC（二联芯片） 培养小室中的 40 个肝球体。 （A） 融合1天的肝球体。 （B）融合14天后的肝球体。 5.6    MOC中的培养基更换要更换装有肝球体的培养小室中的培养基，请拧下相应培养小室的盖子。使用标准移液器吸头吸出所需量的旧培养基，并添加所需量的新鲜培养基（100% 培养基更换是可以的）。将盖子拧回培养小室上。 请注意以下事项：-            尽管肝球体应生长到培养小室的底部，但在去除旧培养基时，请确保不要绘制任何肝球体。如有必要，检查移液器吸头。-            去除旧培养基时，请勿将任何培养基从 MOC 的微流道中吸出，以免在流路内形成气泡。-            通过移液将其移到插入壁上，缓慢而小心地添加新鲜培养基，以避免插入可能干扰肝球体的湍流。-            用新鲜培养基填充培养小室时，不要超过培养小室内盖的螺纹。

内源差示扫描荧光技术如何应用到多功能蛋白质稳定性分析北京佰司特贸易有限责任公司蛋白质是生物体中广泛存在的一类生物大分子，具有特定立体结构的和生物活性以及诸多功能，根据这些功能我们可以将其应用于蛋白质的分子设计、蛋白质功能的改造、疾病的基因治疗以及新型耐抗药性药物的开发与设计甚至是发现生物进化的规律等先进科研领域上。因此，蛋白质具有非常重要的研究价值。进行蛋白质性质和功能研究的前提是获得稳定的蛋白质样品，而由于蛋白质自身性质的复杂性，难以保证获得的蛋白质样品是否具有正确的三维结构以及功能，因此急需一种技术手段或设备，对蛋白质的稳定性进行分析，确定获得蛋白质最ZUI适宜的缓冲液条件、蛋白质的长期储存稳定性等。另外在进行蛋白质-配体小分子相互作用研究时，因为需要筛选的小分子配体数量巨大，因此也急需一种技术手段或设备，可以高通量的对配体结合进行筛选。蛋白中的色氨酸和酪氨酸可以被280 nm的紫外光激发并释放出荧光，其荧光性质与所处的微环境密切相关。蛋白变性过程中，色氨酸从疏水的蛋白内部逐渐暴露到溶剂中，荧光释放的峰值也从330 nm逐渐转移到350 nm。内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），通过检测温度变化/变性剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光（350 nm/330 nm比值）的改变，获得蛋白的热稳定性(Tm值)、化学稳定性（Cm值）等参数。相比传统的方法，无需添加染料，通量高，样品用量少，数据精度高。  多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16是一款无需加入荧光染料、高通量、低样品消耗量检测蛋白质稳定性的设备。该设备基于内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），通过检测温度变化/变形剂浓度变化过程中蛋白内源紫外荧光的改变，获得蛋白质的热稳定性(Tm值)、化学稳定性（Cm值）等参数。可应用于蛋白缓冲液条件筛选及优化、小分子与蛋白结合情况的定性测定、蛋白质修饰及改造后的稳定性测定、蛋白变/复性研究、不同批次间蛋白稳定性对比等多个方面。基于内源差示扫描荧光技术（intrinsic fluorescence DSF），在无需添加外源染料的条件下，对蛋白进行升温变性，通过内源荧光和散射光的变化与三级结构变化的关系，PSA-16可用于测定不同buffer中蛋白的Tm值变化，获得蛋白质正确折叠的最ZUI优buffer条件；测定不同detergent条件下膜蛋白Tm值，进行detergent筛选；测定不同添加剂对蛋白稳定性的影响；测定添加配体后Tm值变化进行配体结合筛选；测定蛋白中变性部分的比例，进行质量控制；测定蛋白Tm值与浓度的相关性，获得最ZUI优蛋白浓度进行后续结晶等实验；测定蛋白去折叠过程，进行蛋白复性条件筛选；测定蛋白folding enthalpy，研究蛋白的长期稳定性；测定不同批次和存储后的蛋白的稳定性，并进行相似性评分，对蛋白进行质量控制。多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16，无需对蛋白进行荧光标记，可以直接测定蛋白在不同缓冲液条件中的Tm值，进行缓冲液筛选和优化；同时还可以测定添加不同配体化合物对蛋白稳定性的影响，通过Tm值变化进行配体结合筛选。PSA-16满足我们目前对于蛋白质稳定性分析的迫切需求。多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16可用于评估蛋白（抗体或疫苗）热稳定性、化学稳定性、颗粒稳定性等特性，实现非标记条件下的高通量的抗体制剂筛选、分子结构相似性鉴定、物理稳定性、长期稳定性、质量控制、折叠和再折叠动力学研究等功能。★    蛋白热稳定性分析★    蛋白化学稳定性分析★    蛋白等温稳定性分析★    蛋白颗粒稳定性分析★    免标记热迁移实验（dye-free TSA）★    蛋白去折叠、再折叠、结构相似性分析★    蛋白质量控制分析 多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16基于内源差示扫描荧光（ifDSF）技术，广泛应用于蛋白质稳定性研究、蛋白质类大分子药物（抗体）优化工程、蛋白质类疾病靶点的药物小分子筛选和结合力测定等领域，具有快速、准确、高通量等诸多优点。蛋白质中色氨酸/酪氨酸的荧光性质与它们所处的环境息息相关，因此可以通过检测蛋白内部色氨酸/酪氨酸在加热或者添加变性剂过程中的荧光变化，测定蛋白质的化学和热稳定性。PSA-16采用紫外双波长检测技术，可精准测定蛋白质去折叠过程中色氨酸和酪氨酸荧光的变化，获得蛋白的Tm值和Cm值等数据；测定时无需额外添加染料，不受缓冲液条件的限制且测试的蛋白质样品浓度范围非常广（10 µg/ml - 250 mg/ml），因此可广泛用于去垢剂环境中的膜蛋白和高浓度抗体制剂的稳定性研究。此外，PSA-16具有非常高的数据采集速度，从而可提供超高分辨率的数据。同时PSA-16一次最多可同时测定16个样品，通量高；每个样品仅需要15 uL，样品用量少，非常适合进行高通量筛选。PSA-16操作简单，使用后无需清洗，几乎无维护成本。★    非标记测试★    10分钟内完成16个样品的分析★    仅需10μL样品，浓度范围0.005mg/ml—200mg/ml★    15-110℃温控范围，升温速率0.1-7℃/min★    适用于任意种类的蛋白分子★    无需清洗和维护★    可增配机械手臂实现全自动工作 性能参数：★    直接检测蛋白质内源紫外荧光，测定时无需额外添加染料，不限制蛋白缓冲液。★    可同时测定16个样品。★    样品管材质：高纯度石英管，8联排设计，可使用多通道移液器批量上样，亦可单管使用。★    样品体积：15 μL/样品。★    样品浓度范围：0.01 mg/mL–250 mg/mL。★    温控范围：15-110℃可选。★    升温速度范围：0.1-15℃/分钟可调。★    温控精度：+ 0.2℃。★    采样频率：1 HZ，1/60 HZ可选。★    应用范围：热稳定性实验、化学稳定性实验、等温稳定性实验、温度循环实验、TSA实验。★    软件具备比对功能，可通过热变性曲线对蛋白进行相似性评分。★    测定参数：Tm、Ton、Cm、ΔG、Similarity。★    Tm测定精度：★    仪器使用时无需预热及预平衡，实验完成后无需清理，无后续维护费用。★    一体机，可以通过触摸屏进行试验设置，实时采集数据和显示数据，生成详细的结果报告。应用领域：多功能蛋白质稳定性分析仪PSA-16应用涵盖植物、生物学、动物科学、动物医学、微生物学、工业发酵、环境科学、农业基础、蛋白质工程等多学科领域。蛋白质是最终决定功能的生物分子，其参与和影响着整个生命活动过程。现代分子生物学、环境科学、动医动科、农业基础等多种学科研究的很多方向都涉及蛋白质功能研究，以及其下游的各种生物物理、生物化学方法分析，提供稳定的蛋白质样品是所有蛋白质研究的先决条件。因此多功能蛋白质稳定性分析系统在各学科的研究中都有基础性意义。 1.    抗体或疫苗制剂、酶制剂的高通量筛选2.    抗体或疫苗、酶制剂的化学稳定性、长期稳定性评估、等温稳定性研究等3.    生物仿制药相似性研究（Biosimilar Evaluation）4.    抗体偶联药物（ADC）研究5.    多结构域去折叠特性研究6.    物理和化学条件强制降解研究7.    蛋白质变复性研究（复性能力、复性动力学等）8.    膜蛋白去垢剂筛选，膜蛋白结合配体筛选（Thermal Shift Assay）9.    基于靶标的高通量小分子药物筛选（Thermal Shift Assay）10.    蛋白纯化条件快速优化等  

多个类器官串联共培养在疾病模型研究中的意义翻译整理：北京佰司特贸易有限责任公司，2023-07-04人类系统性疾病的发生过程都是通过破坏两个或多个器官的自我平衡和相互交流。研究疾病和药物治疗就需要复杂的多器官平台作为体外生理模型的工具，以确定新的药物靶点和治疗方法。2型糖尿病（T2DM）的发病率正在不断上升，并与多器官并发症相关联。由于胰岛素抵抗，胰岛通过增加分泌和增大胰岛体积来满足胰岛素不断增加的需求量。当胰岛无法适应机体要求时，血糖水平就会升高，并出现明显的2型糖尿病。由于胰岛素是肝脏代谢的关键调节因子，可以将生产葡萄糖的平衡转变为有利于葡萄糖的储存，因此胰岛素抵抗会导致糖稳态受损，从而导致2型糖尿病。过去已经报道了多种表征T2DM特征的动物模型，但是，从动物实验进行的研究往临床上转化的效果不佳。更重要的是，目前使用的药物，虽然能缓解糖尿病症状，但对疾病进一步发展的治疗效果有限。在此，我们以胰腺和肝脏在芯片上的串联共培养为例（参考文献：Functional coupling of human pancreatic islets and liver spheroids on-a-chip: Towards a novel human ex vivo type 2 diabetes model，2017, Nature Scientific Reports）来说明一下。胰腺和肝脏是参与维持葡萄糖稳态的两个关键器官，为了模拟T2DM，阿斯利康（AstraZeneca）的科学家利用TissUse GmbH公司的微流控多器官芯片（MOC）平台，通过微流控通道相互连接，建立一个双器官串联芯片（2-OC）模型，实现芯片上胰腺和肝脏类器官的串联共培养，在体外模拟了胰腺和肝脏之间的交流通讯。建立串联共培养类器官（胰岛+肝脏）和单独培养类器官（仅胰岛或肝脏），在培养基中连续培养15天，串联共培养显示出稳定、重复、循环的胰岛素水平。而胰岛单独培养的胰岛素水平不稳定，从第3天到第15天，降低了49%。胰岛与肝球体串联共培养中，胰岛可长期维持葡萄糖水平，刺激胰岛素分泌，而单独培养的胰岛，胰岛素分泌显著减少。胰岛分泌的胰岛素促进了肝球体对葡萄糖的利用，显示了串联共培养中类器官之间的功能性交流。在单独培养中的肝球体中，15天内循环葡萄糖浓度稳定维持在~11 mM。而与胰岛共培养时，肝球体的循环葡萄糖在48小时内降低到相当于人正常餐后的水平度，表明胰岛类器官分泌的胰岛素刺激了肝球体摄取葡萄糖。T2DM是一种多器官疾病，疾病表型和对药物的反应依赖于具有完全代谢功能的器官和它们之间的相互作用。这篇文章提出了一个胰岛和肝球体之间的类器官串联共培养的模型。与单一培养相比，在GTT（葡萄糖耐量测验）第一天内，串联共培养中的血糖水平从高浓度降至正常范围，随后保持平衡。在没有胰岛素刺激时，单独培养类器官（仅胰岛或肝脏）中的葡萄糖水平一直保持在高浓度。通过测量胰岛在葡萄糖负荷下释放到培养基中的胰岛素水平来评估肝脏和胰岛的串联共培养的作用。胰岛素促进了肝球状体对葡萄糖的利用，在共培养中葡萄糖维持在正常水平，而单独培养中葡萄糖水平一直偏高。因为，串联共培养中，分泌到循环中的胰岛素刺激了肝球体对葡萄糖的摄取，随着葡萄糖浓度的降低，胰岛素分泌会随之减少，这就表明肝脏和胰岛之间存在一个功能反馈回路。长期暴露于高糖水平下，缺乏肝球体的胰岛释放胰岛素的能力会降低，提示了长期高血糖损害胰岛功能。另外，与单层HepaRG细胞相比，受刺激和未受刺激的AKT磷酸化比例在肝球体中明显更高，这表明3D培养环境更利于模拟人体内的生理反应。这些结果鼓励我们建立2-OC模型来模拟T2DM的特征，通过胰岛-肝脏串联共培养揭示与T2DM疾病相关的机制，包括β细胞衰竭、胰岛素抵抗、脂肪变性、脂肪性肝炎和肝硬化。多器官芯片（MOC）的发展目标是建立各种不同的器官组合模型，用于药物有效性和安全性评估以及药动学/药效学(PK/PD)测试。 

多个类器官串联共培养在药代动力学和药效学研究中的意义翻译整理：北京佰司特贸易有限责任公司，2023-07-04目前用于药物开发的体外实验平台无法模拟人体器官的复杂性，而人类和实验室动物的系统差异巨大，因此现有的方案都不能准确预测药物的安全性和有效性。德国、葡萄牙和俄罗斯的研究团队通过德国TissUse GmbH公司的微流控多器官串联芯片培养（MOC）平台，测试毒物对多器官的作用，揭示了基于微流控的多器官串联共培养能够更好的模拟人体的生理学环境。在体外培养条件下，由于氧气和营养供应有限，类器官培养往往会随着时间的推移而去分化。然而微流控系统中通过持续灌注培养基，更好地控制环境条件，如清除分泌物和刺激因子，并且培养基以可控流速通过，以模拟血流产生的生物剪切应力，因此类器官培养物可以保持良好的生长状态。在此，我们以神经球和肝脏在芯片上的串联共培养为例（参考文献：A multi-organ chip co-culture of neurospheres and liver equivalents for long-term substance testing，2015, Journal of Biotechnology）来说明一下。利用德国TissUse GmbH公司的微流控多器官串联芯片培养（MOC）平台，通过双器官串联芯片（2-OC）能够串联共培养人的神经球（NT2细胞系）和肝脏类器官（肝HepaRG细胞和肝HHSteC细胞）。在持续两周的实验中，反复加入神经毒剂2,5-己二酮，引起神经球和肝脏的细胞凋亡。跟单器官培养相比，串联共培养对毒剂更敏感。因此，多器官串联共培养在临床研究中可以更准确地预测药物的安全性和有效性。推测这是因为一个类器官的凋亡信号导致了第二个类器官对药物反应的增强，这一推测得到了实验结果的支持，即串联共培养的敏感性增加主要发生在较低浓度药物中。在体内，每个器官都保持着自己的独立性，同时通过血液中的细胞和因子，与其他器官保持相互通讯。保持体外培养物的表型的同时，如何维持组织和器官间的通信一直是该领域的一个挑战。所以，将几种类器官串联在一个共同的培养基的循环中，通过分泌的因子进行通讯和交流。模拟多器官之间的交流，可以研究每个器官代谢的产物对其他器官产生的影响，以及环境因子对于多器官的系统性效应。Anja Patricia Ramme 等科学家通过TissUse GmbH公司的MOC平台，结合微生理系统循环中人体器官的特点，设计了一个四器官串联芯片（4-OC），将小肠、肝脏、神经球和肾脏等器官串联起来培养，四种类器官均由来自同一健康供体的诱导多能干细胞预分化，在不含组织特异性生长因子的培养基中共培养14天。类器官串联共培养平台为研究器官-器官相互作用、系统稳态和药代动力学、疾病诱导和药物作用提供了一个更快、更准确、更经济、更具有临床相关性的方案。另外，哥伦比亚大学的科学家也开发了一种多器官串联芯片，建立了串联共培养心脏、肝脏、骨骼、皮肤的技术，发表于2022年的Nature Biomedical Engineering，中通过血液循环串联培养4个类器官，保持了各个类器官的表型，还研究了常见的抗癌药阿霉素对串联芯片中的类器官以及血管的影响。结果显示药物对串联共培养类器官的影响与临床研究结果非常相似，证明了多器官串联共培养能够成功的模拟人体中的药代动力学和药效学特征。 “最值得注意的是，多器官串联芯片能够准确的预测出阿霉素的心脏毒性和心肌病，这意味着，临床医生可以减少阿霉素的治疗剂量，甚至让患者停止该治疗方案。“    ----- Gordana Vunjak-Novakovic, Department of Biomedical Engineering, Columbia University

北京佰司特贸易有限责任公司中标同济大学超高速视频级原子力显微镜采购项目                                        一、项目编号：0811-234DSITC0218（招标文件编号：0811-234DSITC0218）二、项目名称：超高速视频级原子力显微镜三、中标（成交）信息供应商名称：北京佰司特贸易有限责任公司供应商地址：北京市朝阳区劲松三区甲302楼地上部分7层703B室中标（成交）金额：341.3341800（万元）四、主要标的信息序号   供应商名称     货物名称     货物品牌     货物型号     货物数量     货物单价(元)  1   北京佰司特贸易有限责任公司     超高速视频级原子力显微镜     RIBM     SS-NEX   壹套     3,413,341.80  五、评审专家（单一来源采购人员）名单：周亚康,周力韦,师育新,葛元新，朱融融  序号    供应商名称      货物名称      货物品牌      货物型号      货物数量      货物单价(元)  1    北京佰司特贸易有限责任公司      超高速视频级原子力显微镜      RIBM      SS-NEX      1      3493000.00                      超快速高分辨大分子互作显微镜1.    工作条件：1.1 仪器适于在气温为摄氏-40℃～＋50℃和相对湿度为 80％的环境条件下运输和贮存。1.2 仪器适于在电源 220V（±10％）/50Hz、气温摄氏+15℃～+30℃和相对湿度小于70％的环境条件下运行。能够连续正常工作。1.3 仪器配置符合中国有关标准要求的插头，如果没有这样的插头，供应商会提供适当的转换插座。 2.    设备用途： 2.1 高速原子力显微镜系统主要用来在溶液下对生物大分子（蛋白、DNA、RNA、病毒等）、细胞等进行高速高分辨三维成像，测量分子与分子之间的相互作用力，特异性生物大分子的识别与定位。3.    高速原子力显微镜模块3.1 该设备可以将生物大分子或者待检测物质在特殊标记的情况下，即可在液体或大气环境下实时进行成像观测。成像分辨率为2nm。3.2 设备检测模式为扫描管移动扫描的轻敲模式，多种成像模式共同探测。★3.3 仪器的配置适用于大分子、细菌、活细胞等的专用扫描台及扫描模式。▲3.4仪器用于生物大分子的标准扫描管扫描模式：用于生物大分子的标准扫描管扫描模式：最高扫描成像速度能达到 20帧/秒，线扫速度不小于200行/秒；扫描尺度不小于700nm×700nm（XY方向），400纳米（Z方向）。▲3.5仪器配套探测所需探针需适合生物大分子，尤其是蛋白质或者DNA。提供相关数据证明。3.6 所匹配探针弹性系数不大于0.1 N/m；曲率半径不大于10nm；共振频率400-600kHz（液体环境下）。3.7 仪器样品台扫描，XYZ三轴扫描台独立控制，满足高速扫描需求。3.8 仪器具备动态PID反馈，实时调整增益。悬臂探针自动漂移校准，适用于长时间样品观测。 3.9 仪器配置频谱放大器：差分频谱放大器，傅里叶变换分析系统确保信号准确。3.10 仪器具备主动扫描驱动漂移校正系统。▲3.11 仪器在用于细菌及病毒等微生物的大尺度扫描模式：高扫描成像速度不小于1帧/秒，扫描尺寸不小于 4微米×4微米（XY方向），0.5微米（Z方向）。▲3.12用于活细胞成像超大尺度扫描模式：高扫描成像速度不小于 0.1帧/秒，扫描尺寸可达 30微米×30微米（XY 方向），1.2微米（Z方向）。4.    4.仪器配置专用微流控模块：可快速替换样品池中的组分，以改变其成分及pH；5.    仪器配置加热模块：室温至50℃连续可调；6.    仪器配置紫外光学系统：可以将紫外光整合导入到原子力显微镜的扫描探针部位。7.    仪器配置荧光成像模块：▲7.1 能够进行荧光成像，具备荧光模块；照明模式：明场、荧光；荧光波长范围：340nm至650 nm；7.2 配套相应的滤光片，可对常规的荧光染料如DAPI、GFP、Cy3、mCherry、AF647等进行激发及收集。8.    仪器配置减震系统：8.1 防震台：宽带阻尼结构工作桌面，可消除表面共振；尺寸≥0.7m*0.7m，负载≥150 kg； 固有频率：垂直：1.0～2.0Hz 水平：1.0～2.0Hz；振幅：1（um）。8.2 气泵：空气源静音空气压缩机不大于50dB9.    仪器所配置的软件部分：9.1 仪器采集软件系统：可实时观测采集数据，包括样品形貌，高度，力学信号等。9.2 分析软件具备：2D/3D 数据分析；可导出原始数据和分析得到的视频数据。 2023 年 03 月 27 日 北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com)：类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；单分子质量光度计-TwoMP；灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；蛋白质稳定性分析仪-PSA-16；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪（台式）—BST-100；农药残留定量检测仪（手持式）—BST-10A；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特贸易有限责任公司中标大连理工大学超高速视频级原子力显微镜采购项目                                        公司新闻：大连理工大学超高速视频级原子力显微镜采购项目项目编号：DUTASC-2022417（招标文件编号：DUTASC-2022417）项目名称：大连理工大学超高速视频级原子力显微镜采购项目 中标（成交）信息供应商名称：北京佰司特贸易有限责任公司供应商地址：北京市朝阳区劲松三区甲302楼地上部分7层703B室中标（成交）金额：349.3000000（万元）主要标的信息序号    供应商名称      货物名称      货物品牌      货物型号      货物数量      货物单价(元)  1    北京佰司特贸易有限责任公司      超高速视频级原子力显微镜      RIBM      SS-NEX      1      3493000.00                      超快速高分辨大分子互作显微镜1.    工作条件：1.1 仪器适于在气温为摄氏-40℃～＋50℃和相对湿度为 80％的环境条件下运输和贮存。1.2 仪器适于在电源 220V（±10％）/50Hz、气温摄氏+15℃～+30℃和相对湿度小于70％的环境条件下运行。能够连续正常工作。1.3 仪器配置符合中国有关标准要求的插头，如果没有这样的插头，供应商会提供适当的转换插座。 2.    设备用途： 2.1 高速原子力显微镜系统主要用来在溶液下对生物大分子（蛋白、DNA、RNA、病毒等）、细胞等进行高速高分辨三维成像，测量分子与分子之间的相互作用力，特异性生物大分子的识别与定位。3.    高速原子力显微镜模块3.1 该设备可以将生物大分子或者待检测物质在特殊标记的情况下，即可在液体或大气环境下实时进行成像观测。成像分辨率为2nm。3.2 设备检测模式为扫描管移动扫描的轻敲模式，多种成像模式共同探测。★3.3 仪器的配置适用于大分子、细菌、活细胞等的专用扫描台及扫描模式。▲3.4仪器用于生物大分子的标准扫描管扫描模式：用于生物大分子的标准扫描管扫描模式：最高扫描成像速度能达到 20帧/秒，线扫速度不小于200行/秒；扫描尺度不小于700nm×700nm（XY方向），400纳米（Z方向）。▲3.5仪器配套探测所需探针需适合生物大分子，尤其是蛋白质或者DNA。提供相关数据证明。3.6 所匹配探针弹性系数不大于0.1 N/m；曲率半径不大于10nm；共振频率400-600kHz（液体环境下）。3.7 仪器样品台扫描，XYZ三轴扫描台独立控制，满足高速扫描需求。3.8 仪器具备动态PID反馈，实时调整增益。悬臂探针自动漂移校准，适用于长时间样品观测。 3.9 仪器配置频谱放大器：差分频谱放大器，傅里叶变换分析系统确保信号准确。3.10 仪器具备主动扫描驱动漂移校正系统。▲3.11 仪器在用于细菌及病毒等微生物的大尺度扫描模式：高扫描成像速度不小于1帧/秒，扫描尺寸不小于 4微米×4微米（XY方向），0.5微米（Z方向）。▲3.12用于活细胞成像超大尺度扫描模式：高扫描成像速度不小于 0.1帧/秒，扫描尺寸可达 30微米×30微米（XY 方向），1.2微米（Z方向）。4.    4.仪器配置专用微流控模块：可快速替换样品池中的组分，以改变其成分及pH；5.    仪器配置加热模块：室温至50℃连续可调；6.    仪器配置紫外光学系统：可以将紫外光整合导入到原子力显微镜的扫描探针部位。7.    仪器配置荧光成像模块：▲7.1 能够进行荧光成像，具备荧光模块；照明模式：明场、荧光；荧光波长范围：340nm至650 nm；7.2 配套相应的滤光片，可对常规的荧光染料如DAPI、GFP、Cy3、mCherry、AF647等进行激发及收集。8.    仪器配置减震系统：8.1 防震台：宽带阻尼结构工作桌面，可消除表面共振；尺寸≥0.7m*0.7m，负载≥150 kg； 固有频率：垂直：1.0～2.0Hz 水平：1.0～2.0Hz；振幅：1（um）。8.2 气泵：空气源静音空气压缩机不大于50dB9.    仪器所配置的软件部分：9.1 仪器采集软件系统：可实时观测采集数据，包括样品形貌，高度，力学信号等。9.2 分析软件具备：2D/3D 数据分析；可导出原始数据和分析得到的视频数据。 2023 年 02 月 15 日 北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com)：类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；单分子质量光度计-TwoMP；灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；蛋白质稳定性分析仪-PSA-16；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪（台式）—BST-100；农药残留定量检测仪（手持式）—BST-10A；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特贸易有限责任公司中标浙江大学的超快速高分辨大分子互作显微镜项目                                        公司新闻：北京佰司特贸易有限责任公司成功中标浙江大学的超快速高分辨大分子互作显微镜项目。项目编号：QSZB-Z(H)-A22417(GK)项目名称：超快速高分辨大分子互作显微镜     超快速高分辨大分子互作显微镜用来在溶液下对生物大分子（蛋白、DNA、RNA、病毒等）、细胞等进行高速高分辨三维成像，测量分子与分子之间的相互作用力，特异性生物大分子的构象识别。1. 工作条件：1.1 适于在电源 220V（10％）/50Hz、气温摄氏+15℃～＋30℃和相对湿度小于 70％ 的 环境条件下运行能够连续正常工作。1.2 配备基础防尘条件，避免光学元件受到污染2. 技术规格：2.1 超快速高分辨大分子互作显微镜2.1.1  生物大分子或者待检测物质无需特殊标记，即可在液体或大气环境下实时进行成像观测。成像分辨率不低于2nm。▲2.1.2 检测模式: 扫描管移动扫描的轻敲模式，多种成像模式共同探测。2.1.3 探测所需探针需适合生物大分子，尤其是蛋白质或者DNA。探针弹性系数不大于0.1 N/m；曲率半径不大于10nm；共振频率400-600kHz（液体环境下）。▲2.1.4 用于生物大分子的标准扫描管扫描模式：最高扫描成像速度能达到 20 帧/秒，线扫速度不小于1500line/秒；扫描尺度不小于500nm×500nm（XY方向），300纳米（Z方向）。（需要有相关数据支撑。未提供或不符合要求的视为本项负偏离）2.1.5 配备细菌对光反射所需的紫外光学系统。2.1.6 用于活细胞成像超大尺度扫描模式：高扫描成像速度不小于 0.1帧/秒，扫描尺寸不小于 30微米×30微米（XY 方向），1.2微米（Z方向）。2.1.7 样品台扫描，XYZ三轴扫描台独立控制，满足高速扫描需求。▲2.2  具备动态PID反馈，实时调整增益。2.2.1 悬臂探针自动漂移校准，适用于长时间样品观测。2.2.2 频谱放大器：差分频谱放大器，傅里叶变换分析系统确保信号准确2.2.3 具备主动扫描驱动漂移校正系统2.2.4 具备PID控制模块，可驱动压电位移台实时反馈。2.3  专用微流控模块：可快速替换样品池中的组分，以改变其成分及 pH值；2.4  加热模块：室温至50℃连续可调；2.5  紫外光学系统：可以将紫外光整合导入到原子力显微镜的扫描探针部位。2.6  减震系统：宽带阻尼结构工作桌面，可消除表面共振；尺寸≥0.7m*0.7m,负载≥100 kg； 固有频率：垂直：1.0～2.0Hz 水平：1.0～2.0Hz；振幅：1（um）； 2.7  仪器采集软件系统：可实时观测采集数据2.8  操作台主机：主机配置不低于Intel® Core# i5处理器；一个256GB SSD硬盘；一个2TB的HHD硬盘；16GB内存；27寸显示器，分辨率2560*16002.9 数据分析软件系统2.9.1 2D/3D 数据分析▲2.9.2 可导出原始数据和分析得到的视频数据。3.产品配置要求： 3.1 超快速高分辨大分子互作显微镜 1套3.2 标准成像模块                 1套3.3 超大尺度扫描模块             1套3.4 防震台                       1套3.5 成像用探针                  20根3.6 配套工作站及软件             1套 2022 年 12 月 16 日 北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com)：类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；单分子质量光度计-TwoMP；灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；蛋白质稳定性分析仪-PSA-16；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪（台式）—BST-100；农药残留定量检测仪（手持式）—BST-10A；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特签约韩国Sol Inc. 公司的全自动细胞计数仪SOL COUNT 公司新闻：北京佰司特贸易有限责任公司韩国Sol Inc. 公司的全自动细胞计数仪SOL COUNT，获得中国的独家代理权，全权负责韩国Sol Inc. 公司的全自动细胞计数仪SOL COUNT在中国的的市场推广，客户拜访，宣传讲座，路演DEMO，销售定价，投标签约，进出口以及安装售后等所有事宜。Sol Inc. 是一家具有创新技术的韩国生物科技公司，公司生产半导体无透镜传感器。Sol Inc 开发了一种技术，用于评估和校准生物和医疗设备产品的半导体传感器和传感器模块，该技术基于一种只使用半导体而不使用光学透镜的无透镜光学传感器，在此技术的基本上，推出商业化的全自动细胞计数仪---SOL COUNT。 SOL COUNT全自动细胞计数仪是一种可以同时对多种细胞类型进行自动计数的新技术。SOL COUNT全自动细胞计数仪采用无透镜LED光学和CMOS传感技术，快速准确地测量细胞总数、活细胞和死细胞数量，并且实施快速存储和传输数据。此外，还可以同时测量两种细胞。 ※    什么是细胞计数?细胞计数法不仅可以测定活细胞的数量，还可以通过台盼蓝染色测定死细胞的数量，并计算活细胞与死细胞的比例，即细胞的存活率。通过计算细胞存活率，可以鉴定用于实验的细胞是否得到了很好的培养，从而优化培养条件提高细胞的存活率。•    用于研究和医疗的细胞计数：干细胞、组织、培养细胞、血细胞等；•    细胞计数目的：维持细胞质量和生长，保持研究和培养过程的一致性； SOL COUNT全自动细胞计数仪的应用领域1)    细胞疗法：细胞疗法是将活细胞注射、移植或植入病人体内以达到药物效果的一种疗法      （软骨细胞治疗，皮肤细胞治疗，异基因细胞治疗（烧伤），干细胞，间充质干细胞，ALS治疗…）；2)    培养细胞的监测与维护：通过持续培养维持细胞生长，稳定细胞供应；       ①    将细胞用作细胞疗法，则有可能确保治疗剂的用量；       ②    疫苗研发中，监测病毒感染细胞的状态和生长来验证疫苗的有效性；       ③    细胞毒性试验是替代动物试验，因为动物保护法禁止的毒性试验；       ④    在生物类似物部位进行细胞大规模培养时，检查细胞是否状态良好；3)    活力（活细胞数和死细胞数）；4)    新药研发（新冠肺炎疫苗、抗癌药物、慢性病等）； SOL COUNT全自动细胞计数仪的四步检测流程： SOL COUNT全自动细胞计数仪的测量面积：SOL COUNT的细胞计数面积的是传统血细胞计数器的10倍 SOL COUNT全自动细胞计数仪的兼容细胞类型：干细胞、免疫细胞、体细胞等等； SOL COUNT全自动细胞计数仪的云服务器---SOLOUD1.    数据管理便捷性；2.    简单的数据处理；3.    简便分析新细胞和集群细胞；4.    可访问性；5.    快速的决定；6.    不需要物理空间；7.    AWS云； SOL COUNT全自动细胞计数仪的主要特点： SOL COUNT全自动细胞计数仪的优点：  北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com):类器官培养仪-HUMIMIC；质量光度计--OneMP；灌流式细胞代谢分析仪-IMOLA；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特贸易有限责任公司中标北京生命科学研究所质谱招标采购项目 （国内第一台质量光度计二代机）                                              公司新闻：北京佰司特贸易有限责任公司于2022-02-14日中标北京生命科学研究所质谱招标采购项目（国内第一台质量光度计二代机）      项目编号：OITC-G220310225      项目名称：北京生命科学研究所质谱招标采购项目     包号货物名称数量简要用途采购预算1超高分辫率组合式串联液质联用仪1套四极杆-高分辨组合式液质联用仪1套2MALDI质谱成像系统1套3质量光度计1套生物大分子分子量粗测、组装监测、结合关系测定175万元4氢氘交换离子淌度高分辨飞行时间质谱仪1套 1.采购人信息名 称：北京生命科学研究所　　　　　地址：北京市中关村生命科学园科学园路七号 　　　　　　　　联系方式：张玉琴老师、李硕老师； 010-80726688　　　　　　2.采购代理机构信息名 称：东方国际招标有限责任公司　　　　　　　　　　　　地　址：北京市海淀区西三环北路甲2号院科技园6号楼13层01室　　　　　　　　　　　　联系方式：王军 010-68290508　　　　　　　　　　　　3.项目联系方式项目联系人：张玉琴老师、李硕老师电　话：　　010-80726688 质量光度法是一种新性的分析生物分子的新方法，即超微量单分子质量和分布测量分析法。它能够在溶液中精确测量单个分子的质量，不需要任何偶联固化或者标记标签，在天然状态下，完成对生物分子的分析。这种方法为生物分析和生物分子功能研究开辟了新的可能性。★  无标记无修饰；★  保持结构完整性和活性； ★  测量只需要几微升的样品；★  设计紧凑的台式仪器，无特殊安装要求；★  软件自动控制采集过程，并在几分钟内进行质量分析；★  直观地解释质量分布的结果，而不需要任何经验和知识；★  准确测量在溶液（而不需真空）中的蛋白分子质量；    ★  单分子分析，可靠区分样品中所有已知和未知组分，高精度捕获高丰度和低丰度分子；★  快速、简单、最小样本量：纳米浓度下的微升样品体积，几分钟内获得结果，宽质量范围和高动态范围；这么优秀的分子分析技术，您还不动心么？ 质量光度法Mass photometry的技术背景：2018年，牛津大学的Philipp Kukura团队宣布他们开发的一种全新技术：质量光度法（Mass photometry），通过单分子散射光的方式测量单分子的质量。这种方法提可以精确测量溶液中单个分子的质量——处于原始状态、无需标记，提供了一种新的分析生物分子的方法，为生物分析和研究生物分子的功能开辟了新的方法。质量光度学建立在干涉反射显微镜和干涉散射显微镜的原理之上。牛津大学的Kukura教授团队证明了单分子在观察界面上散射的微小光量能够被可靠地检测到，可以用于计算溶液中的分子数量，更重要的是，它与分子质量直接相关，可以用于测量分子的质量。牛津大学（University of Oxford）迅速将其业务剥离出来，英国Refeyn公司的质量光度计One MP于2019年3月上市，2020年进入中国市场，2021年，推出更新型号的产品---质量光度计的二代机，Two MP，在硬件和软件上均有升级。北京生命科学研究所此次从北京佰司特贸易有限责任公司采购的质量光度计，是中国第一台质量光度计二代机，Two MP，其分辨率和稳定性，相对之前的质量光度计的一代机，有大幅提升。北京佰司特贸易有限责任公司借此机会，也为国内科研人员提供更有更好的产品和服务。 Refeyn TwoMP Mass Photometer  质量光度计二代机 Two MP原理：干涉光散射，无需标记质量范围：30kDa – 5MDa测量精度：±2% @ 10 nM单次测量质量误差：±5% @ 10 nM分辨率（FWHM）：25kDa @ 66kDa，60KDa @ 660 kDa浓度范围：100pM - 100nM（粒子浓度）灵敏度：样品体积：5 - 20 μ l帧率（标准设置）：1 kHz（原始），100 Hz（集成）视场：4 x 11µm （@ 500 Hz）至12 x 17µm（@ 135 Hz）波长：488 nm像素尺寸：12nm控制计算机（Core i7, 16 GB RAM, 256 GB SSD, 2TB HD, Windows 10），包括键盘或鼠标和24”显示器 英国Refeyn公司的质量光度计One MP于2019年3月上市，2020年进入中国市场，2021年，推出更新型号的产品---质量光度计的二代机，Two MP，在硬件和软件上均有升级。2022年2月，北京佰司特贸易有限责任公司中标 北京生命科学研究所质谱招标采购项目（国内第一台质量光度计二代机）TwoMP，其分辨率和稳定性，相对之前的质量光度计的一代机OneMP，有大幅提升。北京佰司特贸易有限责任公司借此机会，也为国内科研人员提供更有更好的产品和服务。 2021年开始，北京佰司特贸易有限责任公司（www.best-sciences.com）获得中国大陆地区的代理权；2023年开始，北京佰司特贸易有限责任公司独家全权负责英国Refeyn公司的质量光度计在中国所有高校、科研院所、政府实验室、医院等研究单位的市场推广、产品宣传、销售和售后工作。 全新的英国Refeyn公司的质量光度计TwoMP，将质量光度法（Mass photometry）技术引入到日常的实验室生活中，这种独特的仪器可以让你以很高的灵敏度、速度、准确度和简单性来表征你感兴趣的分子，是监测蛋白质纯化、优化样品、研究蛋白质功能和相互作用的理想仪器。所有测量都可在各种各样的天然缓冲液中逐个分子地完成，还不需要标签，就可以直观地解释质量分布结果，且无需任何先验知识。 北京佰司特贸易有限责任公司 (https://www.best-sciences.com):类器官串联芯片培养仪-HUMIMIC；单分子质量光度计-TwoMP；灌流式细胞组织类器官代谢分析仪-IMOLA；光片显微镜-LSM-200；超高速视频级原子力显微镜-HS-AFM；蛋白质稳定性分析仪-PSA-16；全自动半导体式细胞计数仪-SOL COUNT；农药残留定量检测仪（台式）—BST-100；农药残留定量检测仪（手持式）—BST-10A；蓝光/绿光LED凝胶成像；台式原子力显微镜-ACST-AFM；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特签约德国cellasys公司的细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD 公司新闻：北京佰司特贸易有限责任公司成功签约德国cellasys GmbH公司的细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD，获得中国大陆地区，香港，澳门，台湾以及新加坡的长期的独家代理权，全权负责德国cellasys GmbH公司的灌流式、多参数、实时代谢监测细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD的的市场推广，客户拜访，宣传讲座，路演DEMO，销售定价，投标签约，进出口以及安装售后等所有事宜。德国cellasys提供的灌流式、多参数、实时代谢监测的细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD，是一种基于生物芯片的微生理参数测量系统，对活细胞/组织/类器官的代谢和形态进行无标记实时监测，搭配自动化灌流系统进行换液或者加药，可以实现几天或几周的连续测量，研究药物对活细胞/组织/类器官的影响以及移除药物后的恢复和再生效应。通过生物芯片技术，可以在体外直接研究活细胞或组织、器官在培养过程种的多个参数的变化，包括细胞外酸化（pH）、细胞呼吸（pO2、pCO2）和形态学（电阻）。整个测量过程无需标记、多通道平行进行、连续检测、实时记录。     德国cellasys的细胞/组织/类器官分析仪—IMOLA-IVD，采用的是芯片技术，而不是通用的光学检测技术，其检测灵敏度更高，检测时间更长，而且这两个产品都有密闭的灌流系统，可以适时更换溶液，适合长时间检测细胞/组织/类器官的生理行为变化，以及观察外界条件（加药等）处理后的细胞/组织/类器官的再生等效应。    多个传感器芯片并联平行工作    非侵入式、实时无标记监测    pH值、O2消耗率、细胞外酸度、贴壁电阻四参数同时测量    独特的灌流系统可实现随时换液主要参数：1.  可实时监测细胞/组织/器官生理状态变化，可以监视形态的变化，并以定量的形式高时间分辨率的测量，。2.  分析样本：可分析贴附性细胞，悬浮细胞，各类细胞器，组织以及类器官。硅材料的生物芯片表面比塑料更适合大多数细胞的生长。     3.  侦测目标：可以同时实时监测细胞/组织/器官代谢的多个参数，包括细胞酸化度（pH）、细胞氧消耗（pO2）和细胞贴壁电阻值（impedance）4.  分析数据要包含：基础代谢率、电子泄漏、极限呼吸率、线粒体功能、细胞贴壁电阻等有害物的情况。5.  无需标记物的非入侵式荧光测量：不用额外的试剂，不接触细胞，不破坏细胞结构，不需人员监控，全自动检测采集数据，并且分析导出监测细胞/组织/器官代谢获得的生理学参数变化曲线 。6.  通过芯片电极监测，电信号比荧光检测的抗干扰能力更强，监测数据更准确，每个芯片含有多个不同类型的传感器元件，分别测量不同的生理学参数，每个参数均可获得多个位置的数据点。7.  可以保证每1-4分钟换液一次，始终保持培养环境的新鲜，O2的充足，不会累积代谢废物，不会影响细胞/组织/器官的生长，整个实验环境中保证细胞/组织/器官相同的溶液环境。8.  芯片组成：试验重复误差：高质量CMOS芯片技术，监测更准确， 试验重复误差：≤3%。ISFETs（离子敏感场效应晶体管）： 测量细胞/组织/器官外环境的pH值变化即产酸率；OS（改进型clark型电极）：测量细胞/组织/器官外环吗氧气浓度即呼吸作用；IDES（交叉的电极结构）：测量细胞/组织/器官的贴壁电阻即粘附和融合度；9.  检测室温度控制范围25 - 45°。10.代谢测量芯片安装于生物模块之内，每个分析系统含有6个生物模块，可以平行地操控6个芯片。生物模块在一个可调的控温孵箱中（标准温度为37°C）。自动加样器控制6个支架，每个支架带有6个储液器,每个支架的储液池针对一个生物模块。11. 具备灌流换液体系可以实现细胞/组织/器官环境溶液自动更新，并且可以加药和换药，每个样本对应6个注射通道，可以随时更换溶液，并且对酸化速率和呼吸速率，以及细胞/组织/器官贴壁电阻进行测量。12. 具备灌流换液体系可以实现细胞/组织/器官环境溶液自动更新，并且可以加药和换药，每个样本对应6个注射通道，可以随时更换溶液，并且对酸化速率和呼吸速率，以及细胞/组织/器官贴壁电阻进行测量。13. 连续测量时间：最长细胞/组织/器官培养和监测到14天。14. 封闭的灌流体系保证了细胞/组织/器官培养过程的无菌环境。15. 可自定义检测程序，并能实时存储。16. 专业性分析控制软件控制整个实验并且在电脑显示屏上实时在线显示具体的数据，所以实验者可以随时观察实验进程并及时做出记录和分析。17. 实时数据获取与分析，可检测多种指标。并且自动将一个芯片上的多个电极的数据拟合出变化率，IC50曲线和数值，自动标准化每次的灌流换液程序。 北京佰司特贸易有限责任公司(https://www.best-sciences.com):类器官培养仪-HUMIMIC；灌流式细胞代谢分析仪-IMOLA；便携式4通道SPR仪-P4SPR；蓝光/绿光LED凝胶成像；Nanocellect细胞分选仪-WOLF；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000；

北京佰司特签约英国Refeyn公司的质量光度计OneMP 公司新闻：北京佰司特贸易有限责任公司签约英国Refeyn公司的质量光度计OneMP，获得中国大陆地区的代理权，全权负责英国Refeyn公司的质量光度计OneMP的市场推广，客户拜访，宣传讲座，路演DEMO，销售定价，投标签约，进出口以及安装售后等所有事宜。英国Refeyn公司的质量光度计OneMP质量光度计是一款超微量单分子质量和分布测量仪器，通过一种革命性的分析生物分子的新方法，即超微量单分子质量和分布测量分析法。它能够在溶液中精确测量单个分子的质量，不需要任何偶联固化或者标记标签，在天然状态下，完成对生物分子的分析。这种方法为生物分析和生物分子功能研究开辟了新的可能性。2018年，牛津大学的Philipp Kukura团队宣布他们开发的一种全新技术：质量光度法（Mass photometry），通过单分子散射光的方式测量单分子的质量。这种方法提可以精确测量溶液中单个分子的质量——处于原始状态、无需标记，提供了一种全新的分析生物分子的方法，为生物分析和研究生物分子的功能开辟了新的方法。质量光度学建立在干涉反射显微镜和干涉散射显微镜的原理之上。牛津大学的Kukura教授团队证明了单分子在观察界面上散射的微小光量能够被可靠地检测到，可以用于计算溶液中的分子数量，更重要的是，它与分子质量直接相关，可以用于测量分子的质量。牛津大学（University of Oxford）迅速将其业务剥离出来，英国Refeyn公司的质量光度计OneMP于2019年3月上市，2020年进入中国市场，2021年，北京佰司特贸易有限责任公司（www.best-sciences.com）获得中国大陆地区的代理权，全权负责英国Refeyn公司的质量光度计OneMP的市场推广、产品销售和售后工作。全新的英国Refeyn公司的质量光度计OneMP，将质量光度法（Mass photometry）技术引入到日常的实验室生活中，这种独特的仪器可以让你以前所未有的灵敏度、速度、准确度和简单性来表征你感兴趣的分子，是监测蛋白质纯化、优化样品、研究蛋白质功能和相互作用的理想仪器。所有测量都可在各种各样的天然缓冲液中逐个分子地完成，还不需要标签，就可以直观地解释质量分布结果，且无需任何先验知识。★  无标记无修饰；★  保持结构完整性和活性； ★  测量只需要几微升的样品；★  设计紧凑的台式仪器，无特殊安装要求；★  软件自动控制采集过程，并在几分钟内进行质量分析；★  直观地解释质量分布的结果，而不需要任何经验和知识；★  准确测量在溶液（而不需真空）中的蛋白分子质量；    ★  单分子分析，可靠区分样品中所有已知和未知组分，高精度捕获高丰度和低丰度分子；★  快速、简单、最小样本量：纳米浓度下的微升样品体积，几分钟内获得结果，宽质量范围和高动态范围；主要应用：★    样品纯度和成分分析：样品的纯度和稳定性是成功的生化和结构研究的关键因素。在制药生产的背景下，蛋白质的纯度是特别重要的，特别是随着蛋白质类产品如生物制剂的日益流行。质谱光度法提供了在单个分子水平上样品异质性的快速评估，使用最小的样品体积和在几分钟内。通过质量光度法获得的质量分布提供了样品中现有物种的直接信息，由于条件变化而产生的任何变化都可以用于样品优化。      ★    异质生物分子的质量分析测量：许多生物系统的一个关键特征是蛋白质自组装成特定的四级结构，这往往决定和调节它们的功能。蛋白质低聚化的评估对于详细了解复杂的生物过程是至关重要的。在这种情况下，分子质量是一个重要的参数，因为它作为低聚化的直接度量。质量光度法提供了高分辨率的分子质量分布与单分子灵敏度。这使得我们的技术能够有效地检测出占主要样本总数不到1%的稀有物种。  ★    生物分子间相互作用：生物分子之间的相互作用在每个生物过程中起着关键作用。质谱光度法非常适合于定量低浓度下的相互作用，其主要优点是检测溶液中存在的生物复合物。分子质量是反映生物分子和生物分子复合物的同质性、结构完整性和活性等多种性质的通用读数。这使得质谱光度法不仅可以用于简单的纯度测定，还可以用于活性和结合性评估，提供了独特水平的数据完整性和其他类似技术的可比性。★    蛋白质复合物的组装与化学计量：在分子自组装中，分子或分子的一部分在没有外部因素的情况下自发形成有序结构。大分子组合包括多种蛋白质，而且通常包含其他分子，如DNA、RNA、糖和/或脂类。大分子复合物在细胞内的组装是一个高度调控的多步骤过程。质量光度计能够高效、准确地表征这些复杂的粒子，使新型超分子结构的工程具有巨大的医学研究潜力。 北京佰司特贸易有限责任公司（https://www.best-sciences.com）：质量光度计-OneMP；类器官培养仪-HUMIMIC；灌流式细胞代谢分析仪-IMOLA；便携式4通道SPR仪-P4SPR；蓝光/绿光LED凝胶成像；Nanocellect细胞分选仪-WOLF；微纳加工点印仪-NLP2000/DPN5000