一文读懂液相色谱（HPLC）

色谱法的分离原理就是利用待分离的各种物质在两相中的分配系数、吸附能力等亲和能力的不同来进行分离的。

使用外力使含有样品的流动相（气体、液体）通过一固定于柱中或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。当流动相中携带的混合物流经固定相时，混合物中的各组分与固定相发生相互作用。

由于混合物中各组分在性质和结构上的差异，与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同，随着流动相的移动，混合物在两相间经过反复多次的分配平衡，使得各组分被固定相保留的时间不同，从而按一定次序由固定相中先后流出。与适当的柱后检测方法结合，实现混合物中各组分的分离与检测。

一、在食品研究中的分析应用

1.食品中的天然成分碳水化合物类脂化合物、甘油三酸酯、胆固醇脂肪酸和有机酸蛋白、肽、氨基酸2.食品添加剂酸味剂、甜味剂、香精、乳化剂抗氧化剂、防腐剂颜料和染料(色素〕维生素3.污染物霉菌(黄曲霉毒素)农药和兽药残留多环芳烃（PAHS）和亚硝酸

二、在兽药研究中分析应用

1.在医药研究中分析应用药物分析有USP、BP、CP等标准常用药物研究中的应用:解热镇痛药、镇静药、安定药、心血管药、磺胺类消炎药等。

甾体药物研究中的应用:肾上腺皮质激素、雄性激素、雌性激素和孕激素等。

抗菌素类药物研究中的应用:青霉素、头孢菌素、庆大毒素、四环素、氯霉素、诺氟沙星等。

中草药研究中的应用:生物碱、甙类(皂甙、强心甙、黄酮甙等)、萜类

手性药物研究中的应用:光学异构体的拆分(如解毒剂D-青霉胺毒性小，L-异构体毒性很强)

医疗药物的检测、新药研究、药物代谢、药代动力学研究。

三、在生物化学和生物工程中的应用1.氨基酸、多肽和蛋白质的分析研究核碱、核苷、核苷酸和核酸的分析研究生物胺的分析研究(儿茶酚胺类)

在精细化工分析中的应用

1.醇、醛和酮、醚的分离分析

2.酸和酯的分离分析表面活性剂的分析聚合物的分析研究

3.药物、农药、染料、炸药等工业产品在无机离子分析中应用4.饮用水、酸雨、土壤中阴离子和阳离子分析

四、在公安、刑警破案工作需要分析等

1.在环境污染分析中的应用

2.废气、废水、废渣中多环芳烃、多氯联苯、农药残留酚类和胺类的检测

色谱峰-Peak

1.色谱柱流出组分通过检测器时产生的响应信号的微分曲线

峰底-Peak Base峰的起点与终点之间连接的直线

峰高 - Peak Height峰最大值到峰底的距离

峰宽-Peak Width在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点之间的距离

半(高)峰宽-Peak Width at Half Height通过峰高的中点作平行于峰底的直线，其与峰两侧相交两点之间的距离峰面积-Peak Area峰与峰底之间的面积,又称响应值标准偏差;σ-Standard Error0.607倍峰高处所对应峰宽的一半拖尾峰 - Tailing Peak后沿较前沿平缓的不对称峰

前伸峰- Leading Peak前沿较后沿平缓的不对称峰

鬼峰- Ghost Peak并非由试样所产生的峰;亦称假峰

基线-Baseline在正常操作条件下，仅由流动相所产生的响应信号的曲线

基线飘移-Baseline Drift基线随时间定向的缓慢变化

基线噪声:N-Baseline Noise由各种因素所引起的基线波动

谱带扩展- Band Broadening由于纵向扩散,传质阻力等因素的影响,使组分在色谱柱内移动过程中谱带宽度增加的现象

死时间to-Dead time不被固定相滞留的组分，从进样到出现峰最大值所需的时间

保留时间，tR-Retention time组分从进样到出现峰最大值所需的时间

死体积，Vo-Dead volume不被固定相滞留的组分，从进样到出现峰最大值所需的流动相体积

保留体积，VR-Retention volume组分从进样到出现峰最大值所需的流动相体积